【摘要】： BIV-兔模型是研究HIV感染的一種很有前景的小動(dòng)物模型。然而,盡管它在基礎(chǔ)和臨床研究中很重要,目前對(duì)BIV及其感染機(jī)制知之甚少。在本文的研究中,通過(guò)生物化學(xué)和生物物理的方法,確定了BIV Env中兩個(gè)七肽重復(fù)區(qū)(heptad repeat region, HR)的特性(由于BIV Env與其他的慢病毒如HIV, SIV和FIV等的相似性較小,我們通過(guò)程序只能預(yù)測(cè)出一個(gè)HR區(qū)域)。并且證實(shí)了預(yù)測(cè)出的HR區(qū)能夠像其他慢病毒一樣在膜融合過(guò)程中形成穩(wěn)定的三聚體發(fā)夾結(jié)構(gòu)或六螺旋束。也證實(shí)了BIV HR2多肽在病毒介導(dǎo)的細(xì)胞融合過(guò)程中具有很好的抑制活性,類(lèi)似這種抑制活性曾被證實(shí)在AIDS治療上具有重大意義并且已經(jīng)引導(dǎo)了抗AIDS藥物的發(fā)現(xiàn)。本文研究是我們揭示大多不為人知的BIV致病機(jī)制的第一步,也是聯(lián)系BIV研究與HIV研究的橋梁。 HCV是肝癌的主要病原體,發(fā)展抗HCV感染的預(yù)防性和治療性疫苗迫在眉睫。本文研究集中于構(gòu)建和評(píng)估基于具有復(fù)制能力的MVTT(modified vaccinia TianTan)和復(fù)制缺陷的MVA(modified vaccine Ankara)載體的HCV疫苗。痘苗病毒天壇株作為疫苗載體在消滅天花的戰(zhàn)役中成功的免疫了成百萬(wàn)的中國(guó)人。由于MVTT和MVA有不同的復(fù)制能力,本文研究比較了兩者在免疫動(dòng)物中免疫原性的強(qiáng)弱,以判斷兩者不同的復(fù)制能力是否對(duì)免疫原性水平有影響。 因?yàn)镠CV1b基因型是全世界主要的基因型,我們利用Genbank中發(fā)表的序列信息,采用電腦模擬設(shè)計(jì)和重疊PCR技術(shù)構(gòu)建了同源的密碼子優(yōu)化的HCV-1b全長(zhǎng)序列(COP-HCV-1b-E1E2)。我們發(fā)現(xiàn)較之未優(yōu)化片斷, COP-HCV-1-E1E2糖蛋白能以更高水平在293T細(xì)胞中表達(dá)。帶有COP-HCV-1b-E1E2糖蛋白的HCV-1假病毒能夠感染Huh7.5肝細(xì)胞系并且對(duì)HCV-1b E2特異的單克隆抗體中和反應(yīng)敏感。為了研究COP-HCV-1b-E1E2的免疫原性,我們構(gòu)建了兩種重組痘苗病毒,分別基于MVTT載體和MVA載體。之后我們用這兩種重組痘苗病毒(MVTT-COP-E1E2和MVA-COP-E1E2)經(jīng)免疫Blab/c小鼠和兔子。這兩種重組痘苗病毒都能誘導(dǎo)高水平的針對(duì)帶有HCV-1b糖蛋白的假病毒的中和抗體反應(yīng)。我們希望這種以MVTT或MVA為載體的優(yōu)化了的功能一致COP-HCV-1b-E1E2基因能成為抵抗HCV感染的治療性和預(yù)防性的有效疫苗。
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【學(xué)位授予單位】：武漢大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2007
【分類(lèi)號(hào)】：R392

【共引文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前6條

1 陳威巍;赫兢;辛紹杰;;丙型肝炎病毒DNA疫苗的研究進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報(bào);2006年05期

2 陳志輝;趙平;吳淑梅;曹潔;張斌;萬(wàn)謨彬;柯金山;戚中田;;攜帶HCV核心蛋白原核表達(dá)質(zhì)粒與真核表達(dá)質(zhì)粒的減毒傷寒沙門(mén)菌誘導(dǎo)小鼠免疫應(yīng)答之比較[J];生物工程學(xué)報(bào);2007年05期

3 洪沙,黃長(zhǎng)形,楊為松,陳紅梅,李光玉,王平忠,陳偉紅,張巖,李羽;HCV核蛋白羧基端信號(hào)肽基因缺失突變體的構(gòu)建、鑒定和真核表達(dá)[J];世界華人消化雜志;2005年07期

4 ;Enhancement Effect of CpG DNA on the Somatostatin DNA Vaccine in Mice[J];Agricultural Sciences in China;2007年07期

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相關(guān)博士學(xué)位論文 前2條

1 包木勝;新型CpG ODN大規(guī)模篩選及其抗病毒作用的研究[D];吉林大學(xué);2005年

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3 沈才飛;不同缺失突變的丙型肝炎病毒核蛋白在大腸桿菌中的表達(dá)[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2006年

4 崔先利;抑制素基因疫苗pCISI免疫南陽(yáng)黃牛試驗(yàn)研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2006年

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本文編號(hào)：2436304