【摘要】：骨髓間充質(zhì)干細胞(MSC)是一種具有多向分化潛能的干細胞,在體外培養(yǎng)擴增且能長期維持其遺傳性狀穩(wěn)定。造血干細胞移植(HSCT)作為一種重要的生物或細胞治療,盡管已取得了很好的臨床療效,但供源不足、不能在體外大量擴增等方面原因使得HSCT 的應用仍受多方面的限制。那么,人骨髓MSC(hMSC)能否分化為造血細胞?需要那些必要的條件?移植后能否進行造血重建?針對上述問題,本研究首先分離人骨髓MSC,建立大規(guī)模培養(yǎng)及擴增體系,并對其生物學特性進行檢測。然后利用小鼠胎肝基質(zhì)細胞條件培養(yǎng)液、造血因子,對其進行體外誘導分化,其次以綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)染hMSC , 獲得穩(wěn)定表達綠色熒光蛋白的hMSC (hMSC/EGFP)。最后以hMSC 和hMSC/EGFP 為供體細胞,亞致死劑量射線照射后的裸鼠為受體,綠色熒光蛋白作為示蹤,通過免疫組化、流式細胞術(shù)等方法觀察hMSC 的體內(nèi)造血分化潛能和造血重建能力,結(jié)果表明所分離、培養(yǎng)及擴增的hMSC 均一性好,具有多潛能成體干細胞特性。在體外,胎肝基質(zhì)細胞條件培養(yǎng)液可誘導hMSC 分化為具有造血干/祖細胞特性的細胞。hMSC 能在亞致死劑量射線照射的裸鼠骨髓中植入并分化表型為人CD34+的造血干/祖細胞。
[Abstract]:The bone marrow mesenchymal stem cell (MSC) is a kind of stem cell with multi-directional differentiation potential, which is cultured in vitro and can maintain its genetic character stably for a long time. Hematopoietic stem cell transplantation (HSCT) is an important biological or cellular therapy. Although a good clinical curative effect has been achieved, it is not enough for the source, and cannot be amplified in a large amount in vitro, so that the application of HSCT is still limited in many ways. So, can human bone marrow MSC (hMSCs) differentiate into hematopoietic cells? What are the necessary conditions? Can the hemopoietic reconstruction be performed after transplantation? In view of the above problems, this study first separates human bone marrow MSC, establishes a large-scale culture and amplification system, and detects its biological characteristics. and then the hMSCs were transfected with green fluorescent protein to obtain hMSCs (hMSCs/ EGFP) stably expressing the green fluorescent protein. The hematopoietic differentiation potential and the hematopoietic reconstitution ability of hMSCs were observed by using hMSC and hMSC/ EGFP as the receptor and the green fluorescent protein as the tracer. The results showed that the cells were separated. The hMSCs cultured and amplified have good properties and have the characteristics of multipotent stem cell. In vitro, the fetal liver stromal cell conditioned medium may induce hMSCs to differentiate into cells with hematopoietic stem/ progenitor cell characteristics. hMSCs can be implanted and differentiated into hematopoietic stem/ progenitor cells of human CD34 + in the bone marrow of bare mice irradiated with sublethal dose radiation.
【學位授予單位】：吉林大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2005
【分類號】：R329.2

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本文編號：2425975