【摘要】： 研究背景及目的 有相關(guān)調(diào)查表明5%到10%的骨折病人發(fā)生延遲愈合或愈合不理想。這些不愈合的骨折通常發(fā)生于距骨頸和舟狀骨折、感染、暴力損傷和骨質(zhì)疏松的病人。對(duì)于此類的骨折,目前治療措施通常有自體骨移植、帶血管的骨移植、添加骨蛋白的異體骨移植等。通常愈后較差,且供骨區(qū)常發(fā)生感染和骨缺損等并發(fā)癥。本課題立足于尋求一種表達(dá)BMP2能力高、取材方便且對(duì)機(jī)體創(chuàng)傷小的細(xì)胞載體,并將其用于臨床,以尋求一種可替代、且行之有效的微創(chuàng)基因療法來促進(jìn)上述骨不連或延遲愈合的恢復(fù)。 方法 建立相應(yīng)幾組的小鼠模型,80只C_3H小鼠分為4組:按分組要求將移植物注入小鼠腓腸肌肌腹,轉(zhuǎn)染Ad-BMP2的肌母細(xì)胞組(A組)、轉(zhuǎn)染Ad-LacZ的肌母細(xì)胞組(B組),注入空白肌母細(xì)胞組(C組),注入等劑量Ad-BMP2組(D組),術(shù)后每周(連續(xù)3次)觀察各組小鼠注射區(qū)的組織學(xué)變化情況及各組小鼠模型處的放射學(xué)表現(xiàn)。 結(jié)果 (1)間接免疫熒光:Ad-BMP2轉(zhuǎn)染的肌母細(xì)胞中BMP-2陽性細(xì)胞多見,未轉(zhuǎn)染的細(xì)胞,未觀察到陽性細(xì)胞,僅見微弱的背景染色。(2)ALP活性:空白肌母細(xì)胞和轉(zhuǎn)染Ad-LacZ的肌母細(xì)胞的ALP活性含量極低,Ad-BMP2轉(zhuǎn)染組中ALP活性含量較高。(3)4組動(dòng)物模型骨折愈合的影像學(xué)表現(xiàn):只有A組小鼠模型處有明確的異位成骨灶出現(xiàn)。 結(jié)論 (1)構(gòu)建的Ad-BMP2腺病毒能高效轉(zhuǎn)染小鼠肌母細(xì)胞,且轉(zhuǎn)染后的肌母細(xì)胞能在機(jī)體持續(xù)分泌有效量的BMP2。(2)本實(shí)驗(yàn)采用的肌母細(xì)胞孵育方法可快速培養(yǎng)、擴(kuò)增所需載體細(xì)胞。(3)轉(zhuǎn)染Ad-BMP2的鼠肌母細(xì)胞具有異位成骨能力。
[Abstract]:Background and objective: 5% to 10% of fracture patients have delayed healing or poor healing. These nonunion fractures usually occur in patients with talus and scaphoid fractures, infections, violent injuries, and osteoporosis. For such fractures, autografts, vascularized bone grafts and allogeneic bone grafts with bone protein are commonly used. Usually, the recovery is poor, and the donor area often has complications such as infection and bone defect. The purpose of this study is to seek a cell vector with high ability to express BMP2, easy to draw materials and less trauma to the body, and to use it in clinical practice to find an alternative. And effective minimally invasive gene therapy to promote the above-mentioned nonunion or delayed healing recovery. Methods 80 C3H mice were divided into 4 groups: the grafts were injected into the gastrocnemius muscle abdomen of the mice according to the request of grouping, and the myoblast cells transfected with Ad-BMP2 (group A). Ad-LacZ transfected myoblast group (group B), blank myoblast group (group C) and equal dose of Ad-BMP2 group (group D). The histological changes in the injection area of each group and the radiologic manifestations in the model of each group were observed every week (3 times in succession). Results (1) indirect immunofluorescence: BMP-2 positive cells were more common in Ad-BMP2 transfected myoblasts, but no BMP-2 positive cells were observed in untransfected cells. (2) ALP activity: the ALP activity of blank myoblasts and Ad-LacZ transfected myoblasts was very low. (3) the imaging manifestations of fracture healing in the four groups: only a clear ectopic osteogenic focus appeared in the model of group A mice. Conclusion (1) the constructed Ad-BMP2 adenovirus can efficiently transfect the murine myoblasts, and the transfected myoblasts can continuously secrete the effective BMP2. (2) the myoblast incubating method used in this experiment can be cultured rapidly. (3) murine myoblast transfected with Ad-BMP2 had ectopic osteogenic ability.
【學(xué)位授予單位】：同濟(jì)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2007
【分類號(hào)】：R683;R346

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2415921