【摘要】：目的通過觀測創(chuàng)傷早期大鼠異位骨化模型中基質(zhì)金屬蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP-9)表達變化,探討MMP-9對預測異位骨化發(fā)生的價值。方法取4~5周齡雄性SD大鼠132只,體重(135.0±6.5)g,隨機分為兩組(n=66)。實驗組通過鉗夾并切斷跟腱制備異位骨化模型,對照組僅暴露跟腱。術后觀察兩組大鼠一般情況,2、3、4、5、6、7、8 d兩組各取8只大鼠,取跟腱組織行大體、組織學及免疫組織化學染色觀察,取血清及跟腱組織分別行ELISA及RT-PCR檢測MMP-9蛋白含量及基因表達。通過兩組剩余10只大鼠術后5、10周X線片及術后10周組織學觀察結果,診斷異位骨化形成情況。結果所有大鼠均存活至實驗完成。各時間點對照組大鼠跟腱無明顯變化,呈正常跟腱結構;實驗組隨時間延長,跟腱斷端硬度逐漸增加,出現(xiàn)大量不規(guī)則結締組織及軟骨細胞,MMP-9免疫組織化學染色呈深染陽性。各時間點實驗組MMP-9蛋白含量及基因相對表達量均顯著高于對照組(P0.05);實驗組MMP-9蛋白含量及基因相對表達量均總體呈上升趨勢(P0.05)。根據(jù)X線片及組織學觀察結果,術后10周實驗組大鼠跟腱組織均發(fā)生異位骨化,對照組均無異位骨化發(fā)生。結論在大鼠跟腱異位骨化早期,MMP-9表達明顯升高,提示其對預測異位骨化發(fā)生有參考意義。
[Abstract]:Objective to investigate the value of MMP-9 in predicting ectopic ossification by observing the changes of matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) expression in rat model of ectopic ossification at the early stage of trauma. Methods 132 male SD rats (135.0 鹵6.5g) were randomly divided into two groups (n = 66). The experimental group made ectopic ossification model by clamp and amputated Achilles tendon, while the control group only exposed Achilles tendon. The general condition of the two groups was observed after operation. Eight rats were taken from each group for 8 days after operation. The Achilles tendon tissues were observed by gross, histological and immunohistochemical staining. ELISA and RT-PCR were used to detect MMP-9 protein content and gene expression in serum and Achilles tendon respectively. The formation of ectopic ossification was diagnosed by X ray film and histologic observation at 5 and 10 weeks postoperatively in the remaining 10 rats in both groups. Results all rats survived until the experiment was completed. The Achilles tendon of the control group showed normal Achilles tendon structure. In the experimental group, the hardness of the Achilles tendon increased gradually with the extension of time, a large number of irregular connective tissues and chondrocytes appeared, and the MMP-9 immunohistochemical staining showed deep staining. The content of MMP-9 protein and the relative expression of gene in experimental group were significantly higher than those in control group at each time point (P0.05), while the content of MMP-9 protein and relative expression of gene in experimental group were all on the rise (P0.05). According to the results of X-ray film and histological observation, heterotopic ossification occurred in the Achilles tendon of the experimental group 10 weeks after operation, but no ectopic ossification occurred in the control group. Conclusion in the early stage of heterotopic ossification of Achilles tendon, the expression of MMP-9 was significantly increased, suggesting that it may be useful in predicting the occurrence of ectopic ossification.
【作者單位】： 南方醫(yī)科大學第三臨床醫(yī)學院;南方醫(yī)科大學附屬奉賢醫(yī)院骨科;
【基金】：上海市衛(wèi)生局科研課題資助項目(20134204)~~
【分類號】：R-332;R641

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本文編號：2414439