【摘要】：目的研究狂犬病不同固定毒株對動物的致病性和對細胞的感染性。方法以小鼠腦內和肌內途徑接種比較不同毒株的致病性,研究并建立HEPES(4-羥乙基哌嗪乙磺酸)誘導的空斑形成技術測定病毒空斑形成單位(plaque-forming unit,PFU)和細胞病變感染技術測定病毒感染滴度(CCID50),并用以比較不同毒株的病毒滴度,實驗同時以常規(guī)的直接免疫熒光法(direct immunofluorescent assay,dFA)做對照。結果不同固定毒株對10~12g小鼠的腦內致病力普遍很高,但肌內毒力普遍較低,腦腔感染致病力比肌內感染致病力高3.0~5.0lg LD50,CVS株相差最大為5.0lg LD50。用兩種新的方法 (PFU和CCID50)測定不同毒株的病毒滴度與dFA法測定的結果比較,除個別株外無明顯差異,如CVS-11、4aG、PV株用三種方法測定的滴度均在7.1~7.9lg。結論用dFA法測定病毒滴度的結果與小鼠腦內測定的結果有可比性,用以替代小鼠腦內法測定病毒滴度是可行的。兩種細胞感染法測定的病毒滴度操作簡便,無需貴重儀器和昂貴試劑,可以更廣泛地應用于狂犬病病毒和疫苗發(fā)展的研究。
[Abstract]:Objective to study the pathogenicity and cell infectivity of different fixed rabies strains to animals. Methods the pathogenicity of different virulent strains was compared by intracerebral and intramuscular inoculation in mice, and the plaque formation technique induced by HEPES (4-hydroxyethylpiperazine ethanesulfonic acid) was established for the determination of viral plaque forming units (plaque-forming unit,). PFU) and cytopathic infection assay (CCID50) were used to compare the viral titers of different virulent strains, and the conventional direct immunofluorescence assay (direct immunofluorescent assay,dFA) was used as control. Results the intracerebral pathogenicity of different fixed strains was very high in 10g / 12g mice, but the intramuscular virulence was generally low. The difference of the pathogenicity of intracerebral infection with 3.0~5.0lg LD50,CVS strain was that of 5.0lg LD50.. Two new methods (PFU and CCID50) were used to determine the virus titers of different strains. There was no significant difference between the two methods except individual strains, for example, the titers of CVS-11,4aG,PV strains measured by the three methods were all 7.1g or 7.9 lg. Conclusion the results of virus titer determination by dFA method are comparable with those of mice brain, and it is feasible to replace the virus titer assay in mice brain. The virus titers determined by two cell infection methods are easy to operate and can be widely used in the research of rabies virus and vaccine development without expensive instruments and expensive reagents.
【作者單位】： 中國食品藥品檢定研究院蟲媒病毒疫苗室;
【基金】：國家高技術研究發(fā)展計劃(863計劃)項目(2012AA02A402)
【分類號】：R373.9

【參考文獻】

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本文編號：2383381