【摘要】： 為尋找人類皮膚研究合適的動物模型,科學(xué)家們研究了多種動物的皮膚,發(fā)現(xiàn)豬的皮膚在解剖、生理等方面與人類皮膚最為接近。但由于普通商品豬遺傳背景不清晰,個體差異大,生長速度快,不適于用作實驗動物。巴馬香豬是我國獨特的小型豬種之一,體型小,操作容易,遺傳穩(wěn)定,個體差異小,是一種理想的實驗動物。但其缺乏與人的比較醫(yī)學(xué)生物學(xué)系統(tǒng)基礎(chǔ)資料,制約了巴馬香豬在醫(yī)學(xué)生物學(xué)中的應(yīng)用。 無細胞真皮作為一種有效的臨床用生物材料,具有重要的臨床應(yīng)用價值。但國內(nèi)目前僅有人無細胞真皮產(chǎn)品面世,且價格昂貴。隨著國家人體器官移植技術(shù)臨床應(yīng)用管理暫行規(guī)定的正式實施,人組織器官的應(yīng)用將面臨來源、倫理、法律等一系列問題,而且還具有傳染HIV、HBV等血液傳播性疾病的危險。因此,以標準化實驗用小型豬無細胞真皮替代人無細胞真皮具有良好的應(yīng)用前景。 為了推廣巴馬香豬在醫(yī)學(xué)生物學(xué)中的應(yīng)用,評估巴馬香豬作為人皮膚模型動物在創(chuàng)傷修復(fù)領(lǐng)域的應(yīng)用價值,同時為了開發(fā)巴馬香豬皮膚來源的異種移植生物材料,本課題從比較醫(yī)學(xué)的角度,對巴馬香豬與人皮膚對比進行了組織學(xué)結(jié)構(gòu)、免疫組化反應(yīng)特點、超微結(jié)構(gòu)、皮膚膠原蛋白理化特性等的系統(tǒng)研究;同時,制備了巴馬香豬無細胞真皮,與人無細胞真皮對比進行了安全性有效性評價,以期利用巴馬香豬無細胞真皮替代人無細胞真皮而應(yīng)用于創(chuàng)傷修復(fù)領(lǐng)域,為其產(chǎn)品研發(fā)形成基礎(chǔ),同時也進一步比較巴馬香豬皮膚與人皮膚在應(yīng)用特性方面的相似性。全文主要結(jié)果及結(jié)論如下: 1.本課題對巴馬香豬皮膚的組織學(xué)結(jié)構(gòu)、免疫組化反應(yīng)特點、超微結(jié)構(gòu)、膠原蛋白理化特性等進行了系統(tǒng)研究,發(fā)現(xiàn)巴馬香豬的皮膚結(jié)構(gòu)除汗腺結(jié)構(gòu)與人不同外,其它結(jié)構(gòu)及其特點與人極為相似。其4月齡小型豬皮膚發(fā)育程度最接近于成人皮膚,各層厚度及結(jié)構(gòu)都與成人皮膚相似。上述研究結(jié)果表明,巴馬香豬可作為研究人類皮膚的模型動物。 巴馬香豬在皮膚厚度、分層、真表皮的高低起伏的連接方式、發(fā)達的淺表血管系統(tǒng)以及皮膚的超微結(jié)構(gòu)都與人類皮膚相似;皮膚中所含細胞種類和成纖維細胞、血管內(nèi)皮朗格罕細胞、肥大細胞的密度也與人類皮膚相近;具有與人類Ⅰ型膠原、Ⅲ型膠原、層粘連蛋白、纖維連接蛋白、中間絲相關(guān)蛋白相似的抗原決定簇,可與抗人血清發(fā)生交叉反應(yīng),且分布特點與人類皮膚相似;真皮中主要的胞外基質(zhì)構(gòu)成成分-Ⅰ型膠原的結(jié)構(gòu)及理化特性也幾乎與人類Ⅰ型膠原相同。但巴馬香豬皮膚中的汗腺為頂泌汗腺,而人類皮膚中主要為外泌汗腺;另外,巴馬香豬皮膚中的色素細胞在身體的不同部位差異很大;巴馬香豬皮膚缺乏與抗人CD34、ICAM-1、S-100等抗體對應(yīng)的抗原決定簇。 2.優(yōu)化了無細胞真皮的制備方法,制備了巴馬香豬無細胞真皮,對其與人無細胞真皮對比進行了生物學(xué)特性與安全性有效性評價研究。對巴馬香豬與人無細胞真皮對比進行了胞外基質(zhì)的種類和分布、微生物學(xué)檢測、致敏實驗、淋巴細胞增殖實驗、細胞毒性實驗、組織學(xué)相容性實驗、單純無細胞真皮移植實驗以及結(jié)合大鼠自體皮的復(fù)合移植實驗等實驗研究。實驗結(jié)果表明,巴馬香豬無細胞真皮與人無細胞真皮的形態(tài)結(jié)構(gòu)、抗原性、生物相容性、血管化速度及動物實驗效果無顯著差異,顯示巴馬香豬無細胞真皮可望替代人無細胞真皮應(yīng)用于創(chuàng)傷修復(fù)領(lǐng)域。 經(jīng)0.25%胰酶4℃處理過夜,0.5%Triton X-100室溫振蕩處理12h制備而成的巴馬香豬無細胞真皮,具有如下特點:成功去除了引起強烈免疫排斥反應(yīng)的表皮和細胞成分,完整保留了基底膜,與抗原性有關(guān)的胞外基質(zhì)結(jié)蛋白和波形蛋白也得到有效的去除;保留了Ⅰ型膠原、Ⅲ型膠原、Ⅳ型膠原、纖維連接蛋白等與細胞粘附、生長相關(guān)的胞外基質(zhì);具有與人無細胞真皮相似的無菌、無致敏反應(yīng)、生物相容性好、抗原性低、血管化速度快等優(yōu)良的生物學(xué)特性;將其與大鼠自體刃厚皮復(fù)合植入大鼠創(chuàng)面后,巴馬香豬無細胞真皮與人無細胞真皮組的移植皮片存活率、創(chuàng)面收縮率相似,且與大鼠同種無細胞真皮組的移植皮片存活率和創(chuàng)面收縮率無明顯差異,未引發(fā)明顯的免疫排斥反應(yīng)。表明巴馬香豬無細胞真皮可望替代人無細胞真皮應(yīng)用于創(chuàng)傷修復(fù)領(lǐng)域。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：第三軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2006
【分類號】：R318.08;R-332

【引證文獻】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 龐琳琳;張會永;楊關(guān)林;;巴馬小型豬在醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用進展[J];中國實驗動物學(xué)報;2014年01期

，

本文編號：2354431