發(fā)布時(shí)間：2018-11-24 17:07

【摘要】： 為尋找人類皮膚研究合適的動(dòng)物模型,科學(xué)家們研究了多種動(dòng)物的皮膚,發(fā)現(xiàn)豬的皮膚在解剖、生理等方面與人類皮膚最為接近。但由于普通商品豬遺傳背景不清晰,個(gè)體差異大,生長(zhǎng)速度快,不適于用作實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。巴馬香豬是我國(guó)獨(dú)特的小型豬種之一,體型小,操作容易,遺傳穩(wěn)定,個(gè)體差異小,是一種理想的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。但其缺乏與人的比較醫(yī)學(xué)生物學(xué)系統(tǒng)基礎(chǔ)資料,制約了巴馬香豬在醫(yī)學(xué)生物學(xué)中的應(yīng)用。 無(wú)細(xì)胞真皮作為一種有效的臨床用生物材料,具有重要的臨床應(yīng)用價(jià)值。但國(guó)內(nèi)目前僅有人無(wú)細(xì)胞真皮產(chǎn)品面世,且價(jià)格昂貴。隨著國(guó)家人體器官移植技術(shù)臨床應(yīng)用管理暫行規(guī)定的正式實(shí)施,人組織器官的應(yīng)用將面臨來(lái)源、倫理、法律等一系列問(wèn)題,而且還具有傳染HIV、HBV等血液傳播性疾病的危險(xiǎn)。因此,以標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)用小型豬無(wú)細(xì)胞真皮替代人無(wú)細(xì)胞真皮具有良好的應(yīng)用前景。 為了推廣巴馬香豬在醫(yī)學(xué)生物學(xué)中的應(yīng)用,評(píng)估巴馬香豬作為人皮膚模型動(dòng)物在創(chuàng)傷修復(fù)領(lǐng)域的應(yīng)用價(jià)值,同時(shí)為了開(kāi)發(fā)巴馬香豬皮膚來(lái)源的異種移植生物材料,本課題從比較醫(yī)學(xué)的角度,對(duì)巴馬香豬與人皮膚對(duì)比進(jìn)行了組織學(xué)結(jié)構(gòu)、免疫組化反應(yīng)特點(diǎn)、超微結(jié)構(gòu)、皮膚膠原蛋白理化特性等的系統(tǒng)研究;同時(shí),制備了巴馬香豬無(wú)細(xì)胞真皮,與人無(wú)細(xì)胞真皮對(duì)比進(jìn)行了安全性有效性評(píng)價(jià),以期利用巴馬香豬無(wú)細(xì)胞真皮替代人無(wú)細(xì)胞真皮而應(yīng)用于創(chuàng)傷修復(fù)領(lǐng)域,為其產(chǎn)品研發(fā)形成基礎(chǔ),同時(shí)也進(jìn)一步比較巴馬香豬皮膚與人皮膚在應(yīng)用特性方面的相似性。全文主要結(jié)果及結(jié)論如下: 1.本課題對(duì)巴馬香豬皮膚的組織學(xué)結(jié)構(gòu)、免疫組化反應(yīng)特點(diǎn)、超微結(jié)構(gòu)、膠原蛋白理化特性等進(jìn)行了系統(tǒng)研究,發(fā)現(xiàn)巴馬香豬的皮膚結(jié)構(gòu)除汗腺結(jié)構(gòu)與人不同外,其它結(jié)構(gòu)及其特點(diǎn)與人極為相似。其4月齡小型豬皮膚發(fā)育程度最接近于成人皮膚,各層厚度及結(jié)構(gòu)都與成人皮膚相似。上述研究結(jié)果表明,巴馬香豬可作為研究人類皮膚的模型動(dòng)物。 巴馬香豬在皮膚厚度、分層、真表皮的高低起伏的連接方式、發(fā)達(dá)的淺表血管系統(tǒng)以及皮膚的超微結(jié)構(gòu)都與人類皮膚相似;皮膚中所含細(xì)胞種類和成纖維細(xì)胞、血管內(nèi)皮朗格罕細(xì)胞、肥大細(xì)胞的密度也與人類皮膚相近;具有與人類Ⅰ型膠原、Ⅲ型膠原、層粘連蛋白、纖維連接蛋白、中間絲相關(guān)蛋白相似的抗原決定簇,可與抗人血清發(fā)生交叉反應(yīng),且分布特點(diǎn)與人類皮膚相似;真皮中主要的胞外基質(zhì)構(gòu)成成分-Ⅰ型膠原的結(jié)構(gòu)及理化特性也幾乎與人類Ⅰ型膠原相同。但巴馬香豬皮膚中的汗腺為頂泌汗腺,而人類皮膚中主要為外泌汗腺;另外,巴馬香豬皮膚中的色素細(xì)胞在身體的不同部位差異很大;巴馬香豬皮膚缺乏與抗人CD34、ICAM-1、S-100等抗體對(duì)應(yīng)的抗原決定簇。 2.優(yōu)化了無(wú)細(xì)胞真皮的制備方法,制備了巴馬香豬無(wú)細(xì)胞真皮,對(duì)其與人無(wú)細(xì)胞真皮對(duì)比進(jìn)行了生物學(xué)特性與安全性有效性評(píng)價(jià)研究。對(duì)巴馬香豬與人無(wú)細(xì)胞真皮對(duì)比進(jìn)行了胞外基質(zhì)的種類和分布、微生物學(xué)檢測(cè)、致敏實(shí)驗(yàn)、淋巴細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)、組織學(xué)相容性實(shí)驗(yàn)、單純無(wú)細(xì)胞真皮移植實(shí)驗(yàn)以及結(jié)合大鼠自體皮的復(fù)合移植實(shí)驗(yàn)等實(shí)驗(yàn)研究。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,巴馬香豬無(wú)細(xì)胞真皮與人無(wú)細(xì)胞真皮的形態(tài)結(jié)構(gòu)、抗原性、生物相容性、血管化速度及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)效果無(wú)顯著差異,顯示巴馬香豬無(wú)細(xì)胞真皮可望替代人無(wú)細(xì)胞真皮應(yīng)用于創(chuàng)傷修復(fù)領(lǐng)域。 經(jīng)0.25%胰酶4℃處理過(guò)夜,0.5%Triton X-100室溫振蕩處理12h制備而成的巴馬香豬無(wú)細(xì)胞真皮,具有如下特點(diǎn):成功去除了引起強(qiáng)烈免疫排斥反應(yīng)的表皮和細(xì)胞成分,完整保留了基底膜,與抗原性有關(guān)的胞外基質(zhì)結(jié)蛋白和波形蛋白也得到有效的去除;保留了Ⅰ型膠原、Ⅲ型膠原、Ⅳ型膠原、纖維連接蛋白等與細(xì)胞粘附、生長(zhǎng)相關(guān)的胞外基質(zhì);具有與人無(wú)細(xì)胞真皮相似的無(wú)菌、無(wú)致敏反應(yīng)、生物相容性好、抗原性低、血管化速度快等優(yōu)良的生物學(xué)特性;將其與大鼠自體刃厚皮復(fù)合植入大鼠創(chuàng)面后,巴馬香豬無(wú)細(xì)胞真皮與人無(wú)細(xì)胞真皮組的移植皮片存活率、創(chuàng)面收縮率相似,且與大鼠同種無(wú)細(xì)胞真皮組的移植皮片存活率和創(chuàng)面收縮率無(wú)明顯差異,未引發(fā)明顯的免疫排斥反應(yīng)。表明巴馬香豬無(wú)細(xì)胞真皮可望替代人無(wú)細(xì)胞真皮應(yīng)用于創(chuàng)傷修復(fù)領(lǐng)域。
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【學(xué)位授予單位】：第三軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2006
【分類號(hào)】：R318.08;R-332

【引證文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 龐琳琳;張會(huì)永;楊關(guān)林;;巴馬小型豬在醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用進(jìn)展[J];中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)報(bào);2014年01期

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本文編號(hào)：2354431