【摘要】：目的探討Apelin對(duì)人誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞(hiPSC)的心肌定向分化作用。方法 hiPSC經(jīng)懸浮法誘導(dǎo)形成擬胚體,分為Apelin處理組(Apelin組)和對(duì)照組。Apelin組在高糖DMEM培養(yǎng)液中加入10μmol/ml Apelin,分別于第3、7、11、15、21天采用RT-PCR、Western blot法檢測(cè)及免疫熒光染色,觀察干細(xì)胞全能性標(biāo)記物Oct4、心肌祖細(xì)胞標(biāo)記物Nkx 2.5、心肌特異性肌鈣蛋白I(cTnI)的表達(dá)變化。結(jié)果 Apelin組iPSC在誘導(dǎo)分化后第3天Oct4和Nanog基因表達(dá)水平明顯降低,分別為同期對(duì)照組的(63.2±10.1)%和(51.7±1.6)%(P0.01);誘導(dǎo)分化后第7天Nkx 2.5和cTnI基因表達(dá)水平明顯升高,分別為同期對(duì)照組的(162.4±22.5)%和(250.6±22.3)%(P0.05,P0.01);誘導(dǎo)分化后第15天時(shí),cTnI表達(dá)為同期對(duì)照組的(156.2±6.4)%(P0.05);免疫熒光染色顯示,cTnI陽(yáng)性細(xì)胞明顯多于對(duì)照組。結(jié)論 Apelin可明顯促進(jìn)hiPSC的心肌定向分化。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of Apelin on myocardial directional differentiation of human inducible pluripotent stem cells (hiPSC). Methods hiPSC was induced to form embryoid body by suspension method and was divided into two groups: Apelin treated group (Apelin group) and control group. In Apelin group, 10 渭 mol/ml Apelin, was added to the high glucose DMEM culture medium on the 3rd day of 711111521 days, and was detected by RT-PCR,Western blot assay and immunofluorescence staining. The expression of cardiomyocyte progenitor cell marker Nkx 2.5 and myocardial specific troponin I (cTnI) (I (cTnI) were observed. Results the levels of Oct4 and Nanog gene expression in Apelin group were significantly lower than those in control group (63.2 鹵10.1)% and (51.7 鹵1.6)% respectively on the 3rd day after induction of differentiation (P0.01). On the 7th day after differentiation, the expression of Nkx 2.5 and cTnI increased significantly, which were (162.4 鹵22.5)% and (250.6 鹵22.3)%, respectively. On the 15th day after differentiation, the expression of cTnI was (156.2 鹵6.4)% of that of the control group (P0.05), and immunofluorescence staining showed that cTnI positive cells were significantly higher than those in the control group. Conclusion Apelin can obviously promote the myocardial directional differentiation of hiPSC.
【作者單位】： 第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院心內(nèi)科;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(30970845,81270168) 軍隊(duì)十二五重點(diǎn)項(xiàng)目(BWS12J037)
【分類號(hào)】：R329

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2313545