【摘要】：電流及電位型電化學免疫傳感器是將免疫分析技術(shù)與電化學傳感器相結(jié)合的一種新的免疫分析方法,是基于測量電流、電位變化來進行免疫分析的生物傳感器。抗原或抗體在敏感膜上的結(jié)合或繼后的反應引起電流、電極電位或膜電位發(fā)生改變,而且這種變化與待測物濃度之間存在線性關(guān)系。與其它免疫傳感技術(shù)相比,該方法具有靈敏、快速、成本低、攜帶方便,操作簡單、易數(shù)字化、能方便地實現(xiàn)實時輸出和檢測。 免疫球蛋白G(IgG)是人體血清中含量最高的抗體,占血清中免疫球蛋白的70～80%,是唯一能通過胎盤的免疫球蛋白,具有抗菌、抗病毒、抗毒素的特性,在機體免疫防護中起著重要作用。正常人血清中的甲胎蛋白(AFP)含量在20ng/mL以下,如果血液中AFP呈現(xiàn)較高濃度,往往是幾種惡性病如精原細胞癌、原發(fā)性肝癌的的重要特征之一,此外,一些患有非癌疾病如毛細管擴張失調(diào)、遺傳酪氨酸血癥、急性病毒性肝炎、肝硬化等的病人也觀察到AFP濃度有上升的現(xiàn)象。AFP已經(jīng)成為臨床檢驗上的一項重要指標。研究IgG和AFP的檢測方法具有重要的理論意義和實際意義。 本文利用納米金、納米銀材料,采用多種電極材料,運用包埋、沉積、吸附等手段固定抗體,直接測定抗原與抗體反應前后的電流、電位變化,主要內(nèi)容如下: 1.利用滴涂于鉑盤表面的Nafion膜中負電性的磺酸基與anti-IgG分子中的氨基陽離子之間的靜電作用實現(xiàn)抗體的結(jié)合,同時通過負電性的納米金增加抗體的固定量,最后在修飾電極的表面涂敷一層明膠(Gelatin)薄膜進行固定,制成Gelatin/anti-IgG/Au/Nafion/Pt膜,制得非標記免疫傳感器。用循環(huán)伏安法(CV)和交流阻抗法(Nyquist)對電極逐層修飾過程進行了表征,并對免疫傳感器的性能進行了研究。該傳感器測定lgG的最低濃度為2.0ng/mL,標準曲線的線性范圍在5～960ng/mL,回歸方程為:AE=-2.2+31.7log[IgG],響
[Abstract]:Current and potential type electrochemical immunosensor is a new immunosensor which combines immunoassay technique with electrochemical sensor. It is a biosensor based on measuring the changes of current and potential. The binding of antigen or antibody on the sensitive membrane or the subsequent reaction caused the change of current, electrode potential or membrane potential, and there was a linear relationship between the change and the concentration of the substance to be measured. Compared with other immunosensor techniques, this method is sensitive, fast, low cost, easy to carry, easy to operate, easy to digitize, and can easily realize real-time output and detection. Immunoglobulin G (IgG) is the highest antibody in human serum, accounting for 70% of the immunoglobulin in the serum. It is the only immunoglobulin that can pass through the placenta. It has the characteristics of antibacterial, antivirus and antitoxin. It plays an important role in immune protection. The content of alpha-fetoprotein (AFP) in normal human serum is below 20ng/mL. If the concentration of AFP in blood is higher, it is often one of the important characteristics of several malignant diseases such as spermatogonia and primary liver cancer. Some patients with non-cancerous diseases such as capillary dilatation, hereditary tyrosinemia, acute viral hepatitis, liver cirrhosis and other patients also observed that the concentration of AFP has increased. AFP has become an important index in clinical tests. It is of great theoretical and practical significance to study the detection methods of IgG and AFP. In this paper, we use nano-gold, nano-silver, various electrode materials, entrapping, depositing, adsorption and other means to fix the antibody, and directly determine the changes of current and potential before and after the reaction of antigen and antibody. The main contents are as follows: 1. The binding of the antibody was realized by electrostatic interaction between the negatively charged sulfonic acid group in the Nafion film coated on the platinum-disk surface and the amino cation in the anti-IgG molecule, and the fixed amount of the antibody was increased through the negative electrically charged nanocrystalline gold. Finally, a gelatin (Gelatin) film was coated on the surface of the modified electrode to make a Gelatin/anti-IgG/Au/Nafion/Pt film, and an unlabeled immunosensor was prepared. The electrode layer modification process was characterized by cyclic voltammetry (CV) and alternating current impedance (Nyquist), and the performance of the immunosensor was studied. The minimum concentration of lgG measured by the sensor is 2.0 ng / mL, and the linear range of the standard curve is 5 ~ 960ng / mL. The regression equation is: AE=-2.2 31.7log [IgG], ring.
【學位授予單位】：西南大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2006
【分類號】：R392

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本文編號：2292502