【摘要】：目的研究白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF)聯(lián)合bFGF對人BMSCs(human BMSCs,hBMSCs)增殖及分化的影響。方法取第4代hBMSCs根據(jù)培養(yǎng)條件不同分為4組:A組為對照組,加入完全培養(yǎng)基(含10%FBS的α-MEM)常規(guī)培養(yǎng);B組加入含10 ng/mL LIF的完全培養(yǎng)基;C組加入含10 ng/mL bFGF的完全培養(yǎng)基;D組加入含10 ng/mL LIF和10 ng/mL bFGF的完全培養(yǎng)基。采用細(xì)胞計數(shù)試劑盒8(cell counting kit 8,CCK-8)測定各組第4代hBMSCs生長曲線;倒置相差顯微鏡觀察各組hBMSCs形態(tài)變化;流式細(xì)胞術(shù)檢測各組第8代hBMSCs表面標(biāo)志CD44、CD90、CD19、CD34表達情況。結(jié)果 4組細(xì)胞生長曲線均近似S形,且細(xì)胞增殖速率表現(xiàn)為D組C組B組A組。各組細(xì)胞形態(tài)觀察發(fā)現(xiàn)A組細(xì)胞較早出現(xiàn)衰老和分化現(xiàn)象;B組細(xì)胞早期形態(tài)維持較好,但增殖相對緩慢,后期出現(xiàn)部分衰老細(xì)胞;C組少量細(xì)胞呈神經(jīng)樣細(xì)胞分化,但增殖較快;D組細(xì)胞增殖迅速,且能長期維持hBMSCs形態(tài)特征。流式細(xì)胞術(shù)檢測示,A、C組骨髓基質(zhì)標(biāo)志CD44、CD90表達較B、D組低;各組造血細(xì)胞標(biāo)志CD19、CD34均呈陰性,組間差異不明顯。結(jié)論 LIF聯(lián)合bFGF不僅可以維持hBMSCs的多向分化潛能,而且能夠促進其快速增殖。
[Abstract]:Objective To study the effect of bFGF on proliferation and differentiation of human BMSCs and hBMSCs. Methods The 4th generation hBMSCs were divided into 4 groups according to the culture conditions: group A was control group, complete culture medium (containing 10% FBS) routine culture was added, B group was added with 10 ng/ mL LIF complete medium, and group C was added with 10 ng/ mL bFGF complete medium. A complete medium containing 10 ng/ mL LIF and 10 ng/ mL bFGF was added to the D group. Cell counter kit 8 (CCK-8) was used to determine the growth curve of hBMSCs in each group; the morphological changes of hBMSCs were observed by reversed phase contrast microscope; and the expression of CD44, CD90, CD19 and CD34 on the 8th generation hBMSCs was detected by flow cytometry. Results The growth curves of the four groups were approximately S-shaped, and the cell proliferation rate was expressed as group B (group A). The cell morphology of group B showed that group A had earlier aging and differentiation; the early morphology of group B was good, but the proliferation was relatively slow, and some aging cells appeared later; small number of cells in group C differentiated into neural-like cells, but the proliferation was faster; the proliferation of group D cells was rapid. and the morphological characteristics of hBMSCs can be maintained for a long time. The expression of CD44 and CD90 in bone marrow stromal cells of group A and C was lower than that in group D, and CD19 and CD34 were negative in each group, and the difference between groups was not obvious. Conclusion LIF combined with bFGF can not only maintain the multipotent differentiation potential of hBMSCs, but also can promote the rapid proliferation of hBMSCs.
【作者單位】： 九江學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院;南昌大學(xué)研究生院醫(yī)學(xué)部;南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院骨科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項目(81260283) 江西省自然科學(xué)基金資助項目(20122BAB205043) 江西省教育廳科學(xué)技術(shù)研究項目(贛教技字10737號)~~
【分類號】：R329.2

【參考文獻】

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本文編號：2290686