【摘要】：DHA(22:6n-3)、EPA(20:5n-3)和ARA(20:4n-6)三種長鏈多不飽和脂肪酸在生物體內(nèi)活性最強,它們在促進大腦發(fā)育和功能維持以及在預防和治療心血管疾病、炎癥、癌癥等多種疾病方面有著重要作用。然而,盡管哺乳動物體內(nèi)有完整的長鏈多不飽和脂肪酸合成酶系,但哺乳動物合成這些長鏈多不飽和脂肪酸的效率很低而主要依賴于食物獲取。本研究應用轉(zhuǎn)基因方法,將哺乳動物來源的Δ6和Δ5脂肪酸去飽和酶以及Δ6和Δ5脂肪酸延長酶這4種酶的編碼基因構(gòu)建成為一個多基因表達載體,然后轉(zhuǎn)染哺乳動物細胞HEK293T,實現(xiàn)了4個目的基因的超表達,再通過氣質(zhì)聯(lián)用(GC-MS)分析證實了DHA、EPA和ARA等長鏈多不飽和脂肪酸的合成效率及水平顯著增加,DHA的水平更是提高了2.5倍。由此可見,哺乳動物具有某種抑制長鏈多不飽和脂肪酸高水平合成的機制,但通過Δ6和Δ5脂肪酸去飽和酶以及Δ6和Δ5脂肪酸延長酶的超表達,能夠打破哺乳動物這種抑制機制,從而顯著提高DHA、EPA、ARA等的合成水平。同時,本研究的思路也為在轉(zhuǎn)基因動物中生產(chǎn)長鏈多不飽和脂肪酸提供了重要的啟示。
[Abstract]:DHA (22:6n-3), EPA (20:5n-3) and ARA (20:4n-6) are the most active long chain polyunsaturated fatty acids in vivo. They play an important role in promoting brain development and functional maintenance and in preventing and treating cardiovascular diseases, inflammation, cancer and other diseases. However, although there are complete long chain polyunsaturated fatty acid synthase systems in mammals, the efficiency of the synthesis of these long chain polyunsaturated fatty acids in mammals is very low and is mainly dependent on food acquisition. In this study, the genes encoding 螖 6 and 螖 5 fatty acid desaturase and 螖 6 and 螖 5 fatty acid prolongation enzymes from mammalian origin were constructed into a multi-gene expression vector by transgenic method. Four target genes were overexpressed by transfection of mammalian HEK293T, and the synthesis efficiency and level of long chain polyunsaturated fatty acids such as DHA,EPA and ARA were significantly increased by GC-MS analysis, and the level of DHA was increased by 2.5 times. It can be seen that mammals have some mechanism to inhibit the high level synthesis of long chain polyunsaturated fatty acids, but this mechanism can be broken by the overexpression of 螖 6 and 螖 5 fatty acid desaturase and 螖 6 and 螖 5 fatty acid prolongation enzymes. Thus, the synthesis level of DHA,EPA,ARA et al was improved significantly. At the same time, the idea of this study also provides important inspiration for the production of long chain polyunsaturated fatty acids in transgenic animals.
【作者單位】： 佳木斯大學基礎(chǔ)醫(yī)學院;
【基金】：國家自然科學基金(No.31000984) 黑龍江省教育廳科學技術(shù)研究項目(No.12511563)資助~~
【分類號】：R3416

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