【摘要】：目的建立不同濃度的H2O2誘導(dǎo)人黑素細(xì)胞系PIG1產(chǎn)生氧化應(yīng)激狀態(tài)的模型,為進(jìn)一步研究白癜風(fēng)氧化應(yīng)激發(fā)病機(jī)制奠定基礎(chǔ)。方法分別以不同濃度的H2O2處理人黑素細(xì)胞系PIG1 24 h,光學(xué)顯微鏡觀察黑素細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化,流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡情況及細(xì)胞內(nèi)活性氧簇(ROS)水平,CCK-8法檢測處理后細(xì)胞活性,硫代硫酸巴比妥法檢測細(xì)胞脂質(zhì)過氧化代謝產(chǎn)物丙二醛(MDA)產(chǎn)生情況。結(jié)果隨著作用濃度的增加,黑素細(xì)胞體積變小,樹突數(shù)量減少,長度縮短,凋亡及壞死逐漸增加;以0 mmol/L濃度作為對照,0.50、0.75、1.00、1.25、1.50、2.00 mmol/L的H2O2分別處理人黑素細(xì)胞系PIG1 24 h后,細(xì)胞凋亡率分別為6.8%、11.5%、15.6%、22.7%、38.7%和57.5%;細(xì)胞活性隨著作用濃度的增加而逐漸降低,細(xì)胞內(nèi)ROS水平及MDA含量隨著作用濃度的增加而逐漸升高,1.00 mmol/L濃度處理24 h后開始與對照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論該文摸索出了H2O2引起人黑素細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷的最佳實(shí)驗(yàn)濃度,并成功建立了人黑素細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷模型。
[Abstract]:Objective to establish a model of oxidative stress induced by different concentrations of H2O2 in human melanoma cell line PIG1, and to lay a foundation for further study on the pathogenesis of oxidative stress in vitiligo. Methods Human melanoma cell line PIG1 was treated with different concentrations of H2O2 for 24 h. The morphologic changes of melanocytes were observed by optical microscope. The apoptosis of melanocytes and the (ROS) level of intracellular reactive oxygen species were detected by flow cytometry and CCK-8 method respectively. The production of malondialdehyde (MDA) (MDA), a metabolite of lipid peroxidation, was detected by barbitol thiosulfate method. Results with the increase of action concentration, the volume of melanocytes became smaller, the number of dendrites decreased, the length of dendrites decreased, the apoptosis and necrosis increased gradually, and the H2O2 at 0 mmol/L concentration of 0 mmol/L was used to treat PIG1 cell line PIG1 for 24 h. The cell apoptosis rate was 6.8and 11.5g, respectively. The cell activity decreased gradually with the increase of the concentration of action, and the percentage of cell apoptosis was 38.7% and 57.5%, respectively. The level of ROS and the content of MDA increased gradually with the increase of action concentration. After 24 h treatment with 1.00 mmol/L concentration, there was a significant difference compared with the control group (P0.05). Conclusion the optimal concentration of oxidative stress on human melanocytes induced by H2O2 was found out, and the oxidative stress injury model of human melanocytes was successfully established.
【作者單位】： 解放軍第四軍醫(yī)大學(xué)西京皮膚醫(yī)院;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81371739)
【分類號】：R-332;R758.41

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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【二級參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2228437