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重組CHO細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基的研制

發(fā)布時(shí)間:2018-06-09 21:02

  本文選題:CHO細(xì)胞 + 無(wú)血清培養(yǎng) ; 參考:《中國(guó)生物制品學(xué)雜志》2014年07期


【摘要】:目的研制適合于重組CHO細(xì)胞生長(zhǎng)的低成本無(wú)血清培養(yǎng)基。方法以無(wú)血清培養(yǎng)基SFM為基礎(chǔ),分別向其中加入不同的組分,包括水解物(0.8%大豆蛋白水解物、0.8%超濾植物蛋白棟、0.8%酵母提取物、0.8%谷類水解物、0.4%大豆蛋白水解物+0.4%酵母提取物)、激素(10μmol/L的地塞米松、氫化可的松)、脂類物質(zhì)(0.05%脂肪乳劑、50 mg/L氯化膽堿、10 mmol/L磷脂酰膽堿),培養(yǎng)CHOK1細(xì)胞(表達(dá)重組人腫瘤壞死因子受體-Fc融合蛋白),檢測(cè)不同添加物質(zhì)對(duì)細(xì)胞密度、活力、蛋白表達(dá)量及蛋白中聚體含量的影響。結(jié)果添加大豆蛋白水解物和酵母提取物的混合物、地塞米松及脂肪乳劑可增加細(xì)胞密度,提高細(xì)胞活力,增加目的蛋白的表達(dá)量,降低蛋白中的聚體含量。結(jié)論通過(guò)對(duì)幾種關(guān)鍵組分的優(yōu)化,研制出適合于重組CHO細(xì)胞生長(zhǎng)的低成本無(wú)血清培養(yǎng)基。
[Abstract]:Objective to develop a low cost serum-free medium for the growth of recombinant Cho cells. Methods on the basis of serum-free medium SFM, different components were added to SFM. Including 0.8% soybean protein hydrolysate, 0.8% ultrafiltration plant protein extract, 0.8% yeast extract, 0.8% cereal hydrolysate, 0.4% soybean protein hydrolysate, 0.4% yeast extract, and 10 渭 mol / L dexamethasone, Hydrocortisone, 0.05% lipid emulsion, 50 mg / L choline chloride 10 mmol / L phosphatidylcholine, cultured CHOK1 cells (expressed recombinant human tumor necrosis factor receptor -FC fusion protein), detected the cell density and activity of different additives. The effect of protein expression and polymer content in protein. Results adding the mixture of soybean protein hydrolysate and yeast extract, dexamethasone and fat emulsion could increase cell density, increase cell viability, increase the expression of target protein, and decrease the content of polymer in protein. Conclusion A low cost serum-free medium suitable for the growth of recombinant Cho cells was developed by optimizing several key components.
【作者單位】: 魯南制藥集團(tuán)股份有限公司;
【分類號(hào)】:R392

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本文編號(hào):2000818

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