本文關(guān)鍵詞：IgA腎病患者體質(zhì)、黏膜炎癥、中醫(yī)證型及臨床病理相關(guān)性研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《中南大學(xué)》 2014年

肌酐、尿酸干化學(xué)檢測試紙條的臨床應(yīng)用研究

成平  

【摘要】：目的 在原肌酐、尿酸酶法試劑盒中添加新色原物質(zhì)TBHBA,提高肌酐、尿酸酶學(xué)檢測方法的靈敏度,在其理論基礎(chǔ)支持下研究出一種具有自主知識產(chǎn)權(quán)的,高度靈敏的、快速檢測肌酐、尿酸干化學(xué)試紙條,為臨床監(jiān)測腎功能水平,尤其是對家庭監(jiān)測慢性腎病(CKD)患者腎功能的變化和終末期腎病(ESRD)患者透析效果的判斷提供一種簡便、快捷定量/半定量的可靠的檢測手段。 方法 1.建立高靈敏度新色原酶學(xué)檢測方法：選擇高純度的新色原2,4,6-三溴-3-羥基苯甲酸(TBHBA)添加到肌酐、尿酸檢測試劑盒的R1試劑中,混勻后作為新色原試劑。通過全波段掃描檢測新色原試劑的最佳比色波長；根據(jù)濃度-吸光度曲線選擇TBHBA的最佳濃度；通過對比試驗確定新方法試劑比例和最佳樣品量；采用最佳檢測參數(shù),評估新色原檢測方法的的各項性能,確定TBHBA對提高檢測靈敏度的可行性提供依據(jù)。 2.試紙條的制作：首先微孔反應(yīng)板上進行大量濕化學(xué)試驗,探索紙片反應(yīng)體系的最佳條件參數(shù)；配制濾紙浸漬液,手工制作肌酐、尿酸酶促檢測試紙條。 3.標準比色卡的制作：在微孔反應(yīng)板上進行濕化學(xué)實驗,根據(jù)一系列樣本標準液反應(yīng)后的顏色深淺梯度,制作試紙條結(jié)果判讀的標準比色卡。 4.試紙條的評價：檢測已知濃度的標準品和臨床血清標本,對比全自動分析儀測定的肌酐、尿酸濃度,分析自制試紙條檢測結(jié)果的精準性,評價自制肌酐、尿酸試紙條的臨床應(yīng)用價值。 結(jié)果 1.高靈敏度肌酐、尿酸檢測新方法的參數(shù)分別為：檢測波長為520nm、510nm, TBHBA濃度為3g/L、5g/L,最大樣本添加量為20μL15μL,最佳試劑比例為3：1、4：1。 2.肌酐、尿酸酶學(xué)新方法線性回歸方程分別為y=0.0006x+0.0165、y=0.0009x-0.0209。線性范圍分別為12.5μmol/L～1000μmol/L、40μmol/L～1600μmol/L,該范圍涵蓋了正常人和腎病患者的肌酐、尿酸水平,滿足臨床檢測需要。新方法檢測反應(yīng)顯色能穩(wěn)定2小時,肌酐和尿酸高、低值標準品的CV值分別是2.02%、4.13%和3.25%、2.86%。新色原試劑4℃能保存2個月。新色原方法與原試劑盒比較,靈敏度分別是原方法的2倍和1.5倍。 3.研發(fā)制作了肌酐、尿酸檢測試紙條和標準比色卡；試紙條制作過程中浸漬時間為10秒,試紙條檢測樣本量為15μL,檢測結(jié)果最佳終點觀察時間為20～30min；臨床血清標本檢測,試紙條檢測分組的血清樣本生化檢測,濃度均值和中位數(shù)均在試紙條設(shè)置的理論區(qū)間內(nèi),自制試紙條半定量結(jié)果與全自動生化儀測定濃度基本符合。 結(jié)論 1.選擇以TBHBA為色原能有效提高肌酐、尿酸酶學(xué)檢測方法的靈敏度,為肌酐、尿酸干化學(xué)檢測試紙條的研究提供可靠依據(jù)。 2.肌酐、尿酸干化學(xué)檢測試紙條測定結(jié)果準確、可靠,重復(fù)性好,可半定量/定量檢測到肌酐、尿酸低濃度水平的樣本,理論上支持唾液樣本肌酐、尿酸的檢測。 3.肌酐、尿酸干化學(xué)檢測試紙條攜帶方便、檢測快捷,為臨床監(jiān)測腎功能水平、尤其是家庭CKD患者的腎功能監(jiān)測和ESRD透析效果的判斷具有重要臨床意義。 4.自主研發(fā)的肌酐、尿酸酶促干化學(xué)檢測試紙條有較好的應(yīng)用前景和市場開發(fā)價值。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：中南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R446.1;R692
【目錄】：

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本文編號：199433