本文選題：背根神經(jīng)節(jié) + 細(xì)胞模型�。� 參考：《山東大學(xué)》2007年碩士論文

【摘要】： 目的：建立大鼠背根神經(jīng)節(jié)(Dorsal root ganglion，DRG)細(xì)胞加壓培養(yǎng)模型，觀察在恒定壓力下培養(yǎng)24h和48h的神經(jīng)元形態(tài)和活性的變化，評(píng)價(jià)這種神經(jīng)元加壓培養(yǎng)模型的優(yōu)缺點(diǎn)。 方法：取新生Wistar大鼠腰背段全部DRG，將處理好的DRG神經(jīng)元進(jìn)行培養(yǎng)，根據(jù)受壓時(shí)間，將神經(jīng)元隨機(jī)分為正常對(duì)照組、受壓24h組、受壓48h組，在80mmHg壓力的密閉環(huán)境中培養(yǎng)相應(yīng)時(shí)間后觀察各組神經(jīng)元在熒光顯微鏡和電鏡下的形態(tài)學(xué)特點(diǎn)，并用MTT法分析各組神經(jīng)元細(xì)胞生長(zhǎng)活性的改變。 結(jié)果：①熒光顯微鏡下觀察加壓培養(yǎng)組DRG神經(jīng)元形態(tài)較正常未受壓組五無明顯差異。②超微結(jié)構(gòu)示加壓48h組和24h組神經(jīng)元較正常組線粒體腫脹明顯，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)縮短，變少，游離核糖體增多，部分核固縮，神經(jīng)元代謝水平下降。③MTT法比較加壓前、后各組神經(jīng)元活性的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論：加壓培養(yǎng)未對(duì)DRG神經(jīng)元活性產(chǎn)生顯著影響，此模型可觀察機(jī)械壓力單一因素對(duì)神經(jīng)元的影響，有望成為一種在亞細(xì)胞和分子水平研究機(jī)械壓力對(duì)DRG神經(jīng)元的影響的有效細(xì)胞模型。 目的：建立大鼠背根神經(jīng)節(jié)持續(xù)壓迫模型，測(cè)定術(shù)后大鼠運(yùn)動(dòng)功能和機(jī)械痛閾的變化，觀察背根神經(jīng)節(jié)受壓后組織形態(tài)學(xué)改變，測(cè)定受壓不同時(shí)間后大鼠背根節(jié)上TRPV4通道蛋白的表達(dá)變化，探討TRPV4離子通道在背根神經(jīng)節(jié)受到持續(xù)壓迫后產(chǎn)生疼痛的機(jī)制中所發(fā)揮的作用。 方法：健康雄性Wistar大鼠63只，隨機(jī)分為空白對(duì)照組(n=9)、假手術(shù)7天組(n=9)、假手術(shù)14天組(n=9)、假手術(shù)28天組(n=9)、手術(shù)7天組(n=9)、手術(shù)14天組(n=9)、手術(shù)28天組(n=9)。建立大鼠背根神經(jīng)節(jié)持續(xù)壓迫模型。測(cè)定手術(shù)后不同時(shí)期(1天、3天、5天、7天、9天、11天、13天、15天、17天、19天、21天、23天、25天及27天)動(dòng)物運(yùn)動(dòng)功能和機(jī)械刺激痛閾閾值等神經(jīng)行為學(xué)指標(biāo)的變化情況。造模后7天、14天、28天取材，HE染色，光鏡下觀察背根神經(jīng)節(jié)的組織形態(tài)學(xué)改變：采用Western-Blotting技術(shù)結(jié)合凝膠分析系統(tǒng)，分析壓迫不同時(shí)間后，背根神經(jīng)節(jié)上TRPV4通道蛋白表達(dá)的變化。 結(jié)果：①手術(shù)組各時(shí)間段大鼠右后肢機(jī)械痛閾值的改變具有顯著性差異，出現(xiàn)明顯的痛覺過敏現(xiàn)象，空白對(duì)照組及各假手術(shù)組各時(shí)間段的機(jī)械痛閾值均無明顯改變。②術(shù)后7天組的病理切片顯示持續(xù)受壓的背根神經(jīng)節(jié)出現(xiàn)組織水腫，神經(jīng)元空泡樣變性，間質(zhì)血管充血；術(shù)后14天時(shí)神經(jīng)外膜和神經(jīng)纖維水腫明顯，神經(jīng)元空泡樣變性，核固縮，間質(zhì)充血，，局部少量炎細(xì)胞浸潤(rùn)；術(shù)后28天時(shí)神經(jīng)元水腫明顯減輕，局部纖維母細(xì)胞增生，神經(jīng)內(nèi)膜增厚。而空白對(duì)照組及各假手術(shù)組背根神經(jīng)節(jié)病理改變不明顯。③和相應(yīng)假手術(shù)對(duì)照組相比，手術(shù)后7天、14天及28天的背根節(jié)上TRPV4通道蛋白的表達(dá)均明顯高于其同時(shí)期假手術(shù)組。 結(jié)論：建立大鼠背根神經(jīng)節(jié)持續(xù)壓迫模型，手術(shù)組損傷側(cè)后肢出現(xiàn)機(jī)械痛覺過敏，受壓背根節(jié)在急性期主要表現(xiàn)為炎癥反應(yīng)，慢性期表現(xiàn)為以纖維組織增生為主，在此模型基礎(chǔ)上測(cè)定手術(shù)組背根節(jié)上TRPV4通道蛋白的表達(dá)水平隨時(shí)間延長(zhǎng)有增多的趨勢(shì)，說明TRPV4通道可能與大鼠背根節(jié)受到持續(xù)壓迫后異常痛覺的產(chǎn)生有關(guān)。
[Abstract]:Objective : To establish a rat dorsal root ganglion ( DRG ) cell pressure culture model , observe the changes of neuronal morphology and activity at 24 h and 48 h under constant pressure , and evaluate the advantages and disadvantages of this model .









Methods : All DRG neurons of Wistar rats were cultured with DRG neurons . The neurons were randomly divided into two groups : normal control group , pressure - stressed 24h group , compressed 48h group and 80mmHg pressure closed environment . The morphological characteristics of each group were observed under fluorescent microscope and electron microscope , and the changes of growth activity of each group were analyzed by MTT method .









Results : 鈶

本文編號(hào)：1948620