本文選題：骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs) + 拉伸��； 參考：《重慶大學(xué)》2005年碩士論文

【摘要】：骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(Marrow Mesenchymal Stem Cells,MSCs)是中胚層來源的具有多向分化潛能的干細(xì)胞,存在于不同種屬的動(dòng)物體內(nèi)(如雞、鼠、兔、犬、人),主要分布在全身的結(jié)締組織及組織器官中,以骨髓組織中的含量最為豐富。在不同的誘導(dǎo)條件下,MSCs 具有向成骨細(xì)胞、成肌細(xì)胞、成軟骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞和基質(zhì)細(xì)胞等中胚層細(xì)胞分化的能力,同時(shí)還可分化為外胚層的神經(jīng)細(xì)胞和內(nèi)胚層的肝細(xì)胞。隨著組織細(xì)胞工程學(xué)和基因工程學(xué)的發(fā)展,利用MSCs 的多向分化的潛能,將其運(yùn)用于組織工程、細(xì)胞因子替代治療、基因治療、細(xì)胞移植及器官移植等方面的研究已成為熱點(diǎn)。 然而,MSCs 在體內(nèi)含量很少,骨髓中每10 萬單核細(xì)胞中大約有1 個(gè)MSCs,且隨著年齡的增長(zhǎng),MSCs 數(shù)量逐漸減少。顯然,如此微量的MSCs 根本難以滿足細(xì)胞工程的需要。因此,如何摸索一個(gè)適宜的體外純化、擴(kuò)增的培養(yǎng)條件,對(duì)于進(jìn)一步研究MSCs 的生物學(xué)特性、誘導(dǎo)分化和細(xì)胞移植就顯得尤為重要。 體外調(diào)節(jié)MSCs 增殖的方法有很多種,其中力學(xué)刺激是一種重要的途徑。近年來,力學(xué)因素對(duì)細(xì)胞和組織生長(zhǎng)發(fā)育的調(diào)節(jié)一直是生物力學(xué)十分重視的研究領(lǐng)域,國(guó)內(nèi)外學(xué)者已經(jīng)在這一領(lǐng)域作了大量的研究工作,積累了豐富的研究經(jīng)驗(yàn)。拉伸是力學(xué)刺激中的一種有效方法,文獻(xiàn)顯示:最佳刺激條件的拉伸能促進(jìn)細(xì)胞增殖。但目前利用力學(xué)拉伸加載作用調(diào)節(jié)MSCs 增殖的研究尚未見詳細(xì)文獻(xiàn)報(bào)道,其機(jī)理更不清楚。本實(shí)驗(yàn)擬研制拉伸加載裝置,選取大鼠作為實(shí)驗(yàn)材料,進(jìn)行MSCs的原代分離、培養(yǎng)、鑒定。然后在一定條件下對(duì)MSCs 的進(jìn)行拉伸刺激,研究分析拉伸刺激后MSCs 的增殖情況,從中找到在設(shè)定范圍內(nèi),該拉伸裝置刺激MSCs增殖的最佳條件,并為以后MSCs 在力學(xué)拉伸刺激下的定向分化及進(jìn)一步研究打下良好基礎(chǔ)。 本實(shí)驗(yàn)的研究方法和主要研究?jī)?nèi)容包括:首先,研制一套符合實(shí)驗(yàn)要求的拉伸加載裝置,初步設(shè)定拉伸參數(shù),進(jìn)行相關(guān)預(yù)實(shí)驗(yàn)檢測(cè);同時(shí),選取成年大鼠作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,采用Percoll 梯度離心法結(jié)合貼壁篩選法分離提取MSCs,培養(yǎng)傳代,進(jìn)行相關(guān)鑒定;然后使用拉伸加載裝置,在一定的條件下,對(duì)MSCs 進(jìn)行拉伸刺激,采用MTT 法分析增殖影響,分子生物學(xué)相關(guān)技術(shù)分析與增殖相關(guān)的c-fos 基因的表達(dá)變化,從中研究不同的拉伸刺激條件對(duì)MSCs 增殖的相應(yīng)影響,并總結(jié)出在設(shè)定的參數(shù)范圍內(nèi),本實(shí)驗(yàn)研制的拉伸加載裝置刺激MSCs 增殖的最佳拉伸條件。 本實(shí)驗(yàn)的研究結(jié)果如下:
[Abstract]:Bone marrow mesenchymal stem cells ( MSCs ) , which are derived from mesoderm , are multi - directionally differentiated stem cells , which are mainly distributed in connective tissues and tissues of different species , and are mainly distributed in connective tissue and tissue organs of the whole body .








However , there are few MSCs in the bone marrow , about 1 of every 100 000 monocytes in the bone marrow , and the number of MSCs gradually decreases with age . It is clear that such a trace of MSCs can hardly meet the needs of cell engineering . Therefore , it is very important to study the biological characteristics of MSCs in vitro and to induce differentiation and cell transplantation .








Mechanical stimulation is an important way to regulate the proliferation of MSCs in vitro . In recent years , the regulation of the growth and development of MSCs has been a very important research field .








The research methods and main research contents of this experiment include : firstly , developing a set of tensile loading devices which meet the requirements of the experiment , initially setting the tensile parameters , carrying out relevant pre - experiment detection ; and simultaneously , selecting adult rats as experimental animals , separating and extracting MSCs by a Percolgradient centrifugation method , culturing the passages , and carrying out relevant identification ;








The results of this experiment are as follows :
【學(xué)位授予單位】：重慶大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2005
【分類號(hào)】：R-331

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本文編號(hào)：1946151