本文選題：Ⅰ型艾滋病病毒CN株 + 疫苗��； 參考：《中國(guó)艾滋病性病》2014年03期

【摘要】：目的構(gòu)建表達(dá)中國(guó)流行株HIV-1CRF_07B/C亞型(HIV-1CN54)膜蛋白gp140和gp140FdFc三聚體疫苗,比較其免疫原性。方法構(gòu)建gp140和gp140FdFc重組質(zhì)粒,將質(zhì)粒分別瞬時(shí)轉(zhuǎn)染293F細(xì)胞,120小時(shí)后收獲上清液,經(jīng)純化、濃縮、PBS置換、BCA試劑盒檢測(cè)蛋白質(zhì)濃度后,利用SDS-PAGE電泳檢測(cè)蛋白分子量大小及純度,酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)其與陽(yáng)性病人血清的反應(yīng)性。通過(guò)肌肉注射的方式分別免疫兔子,取兔子血清,ELISA檢測(cè)血清抗體,并通過(guò)假病毒系統(tǒng)檢測(cè)血清中和抗體滴度,比較gp140和gp140FdFc的免疫原性。結(jié)果成功獲得基因重組gp140和gp140FdFc蛋白。免疫兔子后,gp140和gp140FdFc蛋白質(zhì)均有很強(qiáng)的體液免疫應(yīng)答,抗gp160抗體滴度分別為2.24×105和4.48×105,但gp140組未誘導(dǎo)出中和抗體,gp140FdFc組對(duì)4種假病毒具有一定的中和活性。結(jié)論 Gp140FdFc三聚體能誘導(dǎo)兔子產(chǎn)生較強(qiáng)的結(jié)合抗體和一定的中和抗體反應(yīng),可作為潛在的HIV-1免疫原進(jìn)行疫苗研究。
[Abstract]:Objective to construct and compare the immunogenicity of gp140 and gp140FdFc trimer vaccine expressing HIV-1CRF_07B/C subtype 1 CN54. Methods Recombinant plasmids of gp140 and gp140FdFc were constructed. The supernatants of 293F cells were instantly transfected into the plasmids for 120 hours. The supernatants were purified, then the protein concentration was detected by concentrated PBS replacement kit, and the molecular weight and purity of the proteins were detected by SDS-PAGE electrophoresis. Enzyme linked immunosorbent assay (Elisa) was used to detect its reactivity to the serum of positive patients. Rabbits were immunized by intramuscular injection and serum antibodies were detected by Elisa. The immunogenicity of gp140 and gp140FdFc was compared by using pseudovirus system to detect neutralizing antibody titers. Results the recombinant gp140 and gp140FdFc proteins were successfully obtained. Both gp140 and gp140FdFc protein had a strong humoral immune response, the titers of anti gp160 antibody were 2.24 脳 10 5 and 4.48 脳 10 5, respectively, but the neutralizing antibody gp140 Fc group was not induced to neutralize the four pseudoviruses in gp140 group. Conclusion Gp140FdFc trimer can induce strong binding antibody and neutralizing antibody reaction in rabbits and can be used as a potential HIV-1 immunogen for vaccine research.
【作者單位】： 中國(guó)疾病預(yù)防控制中心
【基金】：國(guó)家科技重大專(zhuān)項(xiàng)(2012ZX10001008-012) 傳染病預(yù)防控制國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室(2012SKLID402)~~
【分類(lèi)號(hào)】：R392

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本文編號(hào)：1927342