本文選題：分枝桿菌 + 結(jié)核�。� 參考：《中華結(jié)核和呼吸雜志》2005年12期

【摘要】：目的獲得具有生物學(xué)活性的結(jié)核分枝桿菌重組異檸檬酸裂解酶蛋白。方法以結(jié)核分枝桿菌H37Rv基因組為模板,擴(kuò)增該菌株的異檸檬酸裂解酶基因ic l,克隆入原核表達(dá)載體pET-28 a(+)中,通過在大腸桿菌BL21(DE3)中表達(dá),獲得以鎳離子螯合型瓊脂糖凝膠親和層析柱純化的重組蛋白,并對其酶學(xué)性質(zhì)進(jìn)行測定分析。結(jié)果純化出具有生物學(xué)活性的重組結(jié)核分枝桿菌異檸檬酸裂解酶。酶學(xué)性質(zhì)測定分析表明,重組異檸檬酸裂解酶ICL的比活力為7.657×102μmol.mg-1.m in-1,反應(yīng)最適pH值約為7.4。重組蛋白經(jīng)高效液相色譜及質(zhì)譜鑒定,測得相對分子質(zhì)量為50 603.347。在5 mmol/L Tris-C l緩沖液、pH值7.8、25℃條件下,重組ICL的二級結(jié)構(gòu)中相對有43.8%的α螺旋、31.9%的β折疊、3.4%β轉(zhuǎn)角、20.9%無規(guī)則卷曲。結(jié)論本研究成功克隆表達(dá)結(jié)核分枝桿菌H37Rv異檸檬酸裂解酶基因,酶學(xué)性質(zhì)鑒定獲得了具有生物學(xué)活性的重組蛋白,為該酶免疫學(xué)研究及新型抗結(jié)核藥物的篩選奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:The recombinant protein of Mycobacterium tuberculosis H37Rv was cloned into prokaryotic expression vector pET - 28 a ( + ) . The recombinant protein was purified by high performance liquid chromatography and mass spectrometry .
【作者單位】：
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項目(30270072) 國家基礎(chǔ)研究973基金資助項目(2002CB512804) 上海市博士后基金資助項目(04R214132)
【分類號】：R378

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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本文編號：1911093