本文選題：胰蛋白酶原Ⅱ + 胰腺外分泌功能�。� 參考：《第一軍醫(yī)大學(xué)》2005年碩士論文

【摘要】：胰腺外分泌功能研究是為了從生理的角度觀察胰腺的正常分泌的過(guò)程或從病理生理的角度來(lái)探討胰腺疾病的發(fā)病機(jī)制。本實(shí)驗(yàn)利用顯微注射技術(shù)試圖建立一種胰腺外分泌功能的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物模型,利用整體成像儀能夠在活體內(nèi)動(dòng)態(tài)地觀察到胰蛋白酶原Ⅱ的分泌過(guò)程。為研究胰腺外分泌功能生理機(jī)制和與胰腺外分泌功能相關(guān)的疾病(如胰腺炎、胰腺癌)的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程的病理生理機(jī)制以及篩選治療上述疾病的藥物提供理想的動(dòng)物模型。為此,本文進(jìn)行了如下的研究: 1.目的基因的構(gòu)建: 1.1 胰蛋白酶原Ⅱ信號(hào)肽(Pre-pro)基因的構(gòu)建:采用人工合成Pre-pro基因:5′aattcatgagtgcacttctgatcctagctcttgttggagctgctgttgctttccccgtggatgatgatgacaaga 3′gtactcacgtgaagactaggatcgagaacaacctcgacgacaacgattggggcacctacgactactgttct tcgttggag 3′agcaacctcctag 5′其5’端帶有EcoR I,3’端帶有BamH Ⅰ酶切位點(diǎn)。 1.2 中間載體pPreEGFP的構(gòu)建:我們將Pre-pro基因定位克隆到pEGFP-N1載體的EcoR I,BamH Ⅰ位點(diǎn),增強(qiáng)型綠色熒光蛋白基因(EGFP)的5’端與Pre-pro基因相連接,這一載體我們稱之為:pPreEGFP 1.3 載體pPEL-PreEGFP的構(gòu)建:將在胰腺中特異性表達(dá)的彈性酶Ⅰ啟動(dòng)子(Rat Elastase Ⅰ Promoter,PEL)克隆到pPreEGFP載體的HindⅢ及EcoR Ⅰ位點(diǎn),PEL的3’端與Pre-pro基因的5’端相連,這一載體我們稱之為pPELPreEGFP。 1.4 目的基因PEL-Pre-EGFP的獲得:BindⅢ和Sph Ⅰ雙酶切pPEL-PreEGFP質(zhì)
[Abstract]:The purpose of the study of pancreatic exocrine function is to observe the normal secretion process of pancreas from a physiological point of view or to explore the pathogenesis of pancreatic diseases from the perspective of pathophysiology. In this experiment, a transgenic animal model of pancreatic exocrine function was established by microinjection technique, and the secretion process of trypsinogen 鈪，

本文編號(hào)：1910611