本文選題：氨基脲敏感胺氧化酶 + 甲胺�。� 參考：《汕頭大學(xué)》2007年碩士論文

【摘要】： 氨基脲敏感胺氧化酶(SSAO)是一類包含銅和苯醌，并對氨基脲敏感的酶。在有糖尿病并發(fā)癥、血管病癥和心臟病的病人血清中，SSAO活性升高。甲胺是一種外源性(存在于香煙煙霧、酒和食物中)或內(nèi)源性(為體內(nèi)腎上腺素、肌酸、煙堿、肌氨酸等多種化合物的代謝終產(chǎn)物)胺，它是SSAO的生理底物之一，經(jīng)SSAO催化脫氨生成甲醛、過氧化氫(H_2O_2)和氨。甲醛性質(zhì)活潑，它能夠與單胺或酰胺類反應(yīng)生成亞甲基網(wǎng)橋或與蛋白質(zhì)和單鏈DNA生成不可逆共價(jià)交聯(lián)物；H_2O_2是主要的活性氧簇，具有細(xì)胞毒性。甲醛與H_2O_2能協(xié)同作用造成細(xì)胞損傷。盡管甲胺對培養(yǎng)的內(nèi)皮細(xì)胞相對無毒，但在有SSAO存在時(shí)可引起內(nèi)皮細(xì)胞損傷，而用SSAO抑制劑(MDL-72974A)處理對細(xì)胞有保護(hù)作用。因此，甲胺在體內(nèi)的長期存在可能是人類血管性疾病的潛在危險(xiǎn)因素之一。內(nèi)皮是覆蓋在心臟、血管、淋巴管及軀體漿膜腔表面的一層單層上皮。此外，內(nèi)皮還是一個十分活躍的代謝及內(nèi)分泌器官，合成并分泌多種生物活性介質(zhì)，參與多種細(xì)胞功能的調(diào)控。內(nèi)皮功能異常是動脈粥樣硬化發(fā)病機(jī)理的起始步驟之一。因此，我們通過長期(6個月)給予Wistar大鼠及New Zealand兔甲胺，以研究甲胺及代謝產(chǎn)物對內(nèi)皮的病理生理作用。 方法： 一、Wistar大鼠及New Zealand白兔(雌雄各半)隨機(jī)分成兩組。鼠：甲胺組(20只)，對照組(10只)；兔：甲胺組(12只)，對照組(6只)。甲胺組大鼠及兔分別用低劑量(50 mg·kg~(-1)、100 mg·kg~(-1))的鹽酸甲胺溶液進(jìn)行灌胃，對照組以相同體積的生理鹽水灌胃，灌胃時(shí)間為6個月。兔每隔一周稱量體重，大鼠每隔兩周稱量體重，根據(jù)體重改變調(diào)整給藥量。灌胃期間進(jìn)行樣本采集。 二、兔及大鼠血漿SSAO活性及甲醛濃度測定采用高效液相色譜方法。 三、采用流式細(xì)胞定量儀檢測兔動脈血中內(nèi)皮細(xì)胞數(shù)。 四、兔血清及大鼠血漿一氧化氮(NO)測定采用硝酸還原酶法。 五、采用免疫組化方法檢測vWf在大鼠胸主動脈中的表達(dá)。 六、透射電鏡下觀察兔及大鼠的升主動脈和心內(nèi)膜中內(nèi)皮細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)。 結(jié)果： 一、甲胺組大鼠在第1、2、3、4、5月時(shí)的體重與對照組比無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。甲胺組兔在第1、2、3、4、5、6月的體重與對照組比無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 二、甲胺組兔在1、2、3、4、5、6月血漿SSAO活性與對照組比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。甲胺組大鼠第6月血漿SSAO活性為1.85±0.29 nmol·h~(-1)·ml~(-1)，對照組為1.69±0.17 nmol·h~(-1)·ml~(-1)，兩組比無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 三、甲胺組兔在1、2、3、4、5、6月血漿甲醛濃度高于對照組，但僅在前三個月有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。甲胺組大鼠在第6月血漿甲醛濃度與對照組比無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 四、甲胺組兔在第3、4、5、6月血清NO濃度高于對照組，但僅在第3、4月有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。在第6月時(shí)，甲胺組與對照組大鼠血漿NO濃度比無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 五、在灌胃第23周，甲胺組兔(6例)耳動脈血循環(huán)內(nèi)皮細(xì)胞數(shù)為(17±10/150，000個細(xì)胞)，對照組(5例)為(67±37/150，000個細(xì)胞)，兩組比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。 六、vWf在對照組大鼠胸主動脈內(nèi)皮及血管外周有較弱表達(dá)，而在甲胺組大鼠胸主動脈內(nèi)皮、內(nèi)皮下及血管外周表達(dá)增加。 七、透射電鏡下可見甲胺組兔升主動脈內(nèi)皮細(xì)胞有大量包涵體，心內(nèi)膜內(nèi)皮細(xì)胞可見核固縮、核分裂；對照組升主動脈及心內(nèi)膜內(nèi)皮細(xì)胞顯示正常病理形態(tài)。大鼠甲胺組升主動脈內(nèi)皮細(xì)胞胞漿空泡樣變，心內(nèi)膜內(nèi)皮細(xì)胞呈不規(guī)則及濃縮狀核。 結(jié)論： 一、低劑量甲胺在大鼠及兔體內(nèi)的慢性分布對其體重沒有明顯影響。 二、低劑量甲胺在大鼠及兔體內(nèi)的慢性分布能誘導(dǎo)兔血漿SSAO活性上調(diào)，但對大鼠的SSAO活性沒有明顯影響。 三、甲胺組兔血漿甲醛濃度在起初3個月明顯高于對照組，這表明甲胺進(jìn)入體內(nèi)經(jīng)SSAO催化產(chǎn)生較多的甲醛，隨著時(shí)間延長，，機(jī)體可能通過甲醛代謝酶類活性代償性增高，使甲醛水平有所降低。甲胺組大鼠與對照組比，在第6月時(shí)甲醛濃度沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，這可能與大鼠血漿SSAO活性較低有關(guān)。 四、長期攝入甲胺可導(dǎo)致兔及大鼠內(nèi)皮細(xì)胞損傷。
[Abstract]:Aminourea sensitive amine oxidase (SSAO) is a class of enzymes that contain copper and quinone, and is sensitive to aminourea. In the serum of patients with diabetic complications, vascular diseases and heart disease, the activity of SSAO is elevated. Methylamine is a exogenous (in cigarette smoke, wine and food) or endogenous (in vivo adrenaline, creatine, nicotine, muscle ammonia, etc.) The metabolic end product of a variety of compounds) amine, which is one of the physiological substrates of SSAO, is catalyzed by SSAO to degenerate formaldehyde, hydrogen peroxide (H_2O_2) and ammonia. Formaldehyde is active. It can react with monoamine or amides to produce methylene bridge or produce irreversible covalent crosslinking with protein and single strand DNA; H_2O_2 is the main active oxygen cluster. It is cytotoxic. The synergistic effect of formaldehyde and H_2O_2 causes cell damage. Although methylamine is relatively non-toxic to cultured endothelial cells, it can cause endothelial cell damage when there is a SSAO presence and the protective effect of SSAO inhibitor (MDL-72974A) on the cells. Therefore, the long-term existence of methylamine in the body may be the potential of human vascular disease. One of the risk factors. The endothelium is a layer of epithelium covering the surface of the serous cavity of the heart, blood vessel, lymphatic tube and body. In addition, the endothelium is a very active metabolic and endocrine organ that synthesizes and secretes a variety of bioactive mediators and participates in the modulation of various cell functions. The abnormal endothelial function is the pathogenesis of atherosclerosis. One of the initial steps, therefore, was given to Wistar rats and New Zealand rabbit methylamine for a long time (6 months) to study the pathophysiological effects of methylamine and metabolites on the endothelium.
Method錛

本文編號：1904737