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人體脂肪基質(zhì)細(xì)胞的分離培養(yǎng)及其成骨活性的研究

發(fā)布時(shí)間:2018-05-06 11:01

  本文選題:基質(zhì)細(xì)胞 + 脂肪組織。 參考:《中國組織工程研究與臨床康復(fù)》2007年37期


【摘要】:目的:脂肪組織來源的脂肪基質(zhì)細(xì)胞具備向其他多種組織成分,如神經(jīng)細(xì)胞、骨骼肌細(xì)胞、心肌細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、骨細(xì)胞等分化的能力。探討人體脂肪組織來源脂肪基質(zhì)細(xì)胞的分離培養(yǎng)方法及其成骨活性。方法:于2005-10/2006-05選取臨床手術(shù)中收集的廢棄脂肪組織及行脂肪抽吸術(shù)所得的脂肪組織為實(shí)驗(yàn)材料,采用機(jī)械切割及Ⅰ型膠原酶消化法從脂肪組織中分離獲得脂肪基質(zhì)細(xì)胞,原代培養(yǎng)后,以誘導(dǎo)培養(yǎng)基(內(nèi)含10mmol/Lβ-甘油磷酸鈉、10-8mol/L地塞米松、50mg/L維生素C)進(jìn)行誘導(dǎo)培養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)評(píng)估:應(yīng)用形態(tài)學(xué)觀察、堿性磷酸酶鈣-鈷法染色檢測(cè)堿性磷酸酶,Von Kossa鈣化結(jié)節(jié)染色檢測(cè)鈣化結(jié)節(jié)的形成等方法來鑒定誘導(dǎo)分化所得細(xì)胞的成骨活性。結(jié)果:行誘導(dǎo)培養(yǎng)的脂肪基質(zhì)細(xì)胞呈多層成長,形態(tài)多為梭形、錐形或立方形,細(xì)胞外基質(zhì)有白色鈣化結(jié)節(jié)形成;細(xì)胞增殖速度減慢,生長周期變長。堿性磷酸酶鈣鈷法染色及Von Kossa鈣化結(jié)節(jié)染色后均表現(xiàn)為陽性,未誘導(dǎo)培養(yǎng)的脂肪基質(zhì)細(xì)胞則表現(xiàn)為陰性。結(jié)論:初步建立了一套由脂肪組織分離培養(yǎng)脂肪基質(zhì)細(xì)胞的方法,并證明該細(xì)胞具備成體干細(xì)胞的特性,在體外誘導(dǎo)培養(yǎng)條件下具備向成骨細(xì)胞分化的能力。
[Abstract]:Objective: adipose tissue derived adipose matrix cells have the ability to differentiate into many other tissue components, such as nerve cells, skeletal myocytes, cardiomyocytes, chondrocytes, and bone cells. Methods of isolation and culture of adipose tissue derived fat stromal cells from human body adipose tissue and its osteogenic activity. Methods: a clinical operation was selected in 2005-10/2006-05. The adipose tissue collected from discarded adipose tissue and liposuction was used as experimental material. The adipose stroma cells were isolated from the adipose tissue by mechanical cutting and type I collagenase digestion. After primary culture, the induction medium (including sodium 10mmol/L beta glycerol, 10-8mol/L dexamethasone, 50mg/L vitamin C) was induced. Experimental evaluation: morphological observation, alkaline phosphatase and calcium cobalt staining were used to detect alkaline phosphatase, Von Kossa calcified nodule staining was used to detect the formation of calcified nodules and other methods to identify the osteogenic activity of the induced differentiation cells. A white calcified nodule was formed in the extracellular matrix; cell proliferation slowed down and the growth cycle grew longer. Alkaline phosphatase staining with calcium cobalt method and Von Kossa calcified nodules were all positive, and the uncultured adipose stroma cells were negative. Conclusion: a set of adipose tissue was isolated and cultured from adipose tissue at the initial stage. It is proved that the cells possess the characteristics of adult stem cells and have the ability to differentiate into osteoblasts in vitro induced culture conditions.

【作者單位】: 天津市第三中心醫(yī)院骨科 天津市第三中心醫(yī)院骨科 天津市第三中心醫(yī)院骨科 天津市第三中心醫(yī)院骨科 天津市第三中心醫(yī)院骨科
【分類號(hào)】:R329

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

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3 鮑t,

本文編號(hào):1852051


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