RGS4與GR結(jié)構(gòu)域相互作用的初步研究
本文選題:rgs4 + GR; 參考:《四川大學(xué)》2005年碩士論文
【摘要】:糖皮質(zhì)激素的多種生理和藥理效應(yīng)可能與其非基因組效應(yīng)有關(guān),糖皮質(zhì)激素受體(Glucocorticoid Receptor,GR)參與某些非基因組效應(yīng)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo),G蛋白信號轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子(Regulator of G protein signaling 4,RGS4)與GR之間的相互作用可能是調(diào)節(jié)這一效應(yīng)的重要途徑之一。本研究擬采用酵母雙雜交技術(shù)探討RGS4與GR之間是否存在相互作用,進(jìn)而明確相互作用的確切位點。 該研究工作分為兩個部分:1、利用酵母雙雜交技術(shù)研究RGS4與GR各結(jié)構(gòu)域之間的相互作用;2、利用GST-pulldown技術(shù)研究RGS4及GR各結(jié)構(gòu)域蛋白之間相互作用。 采用SD大鼠肝組織RNA,構(gòu)建RGS4蛋白全編碼框表達(dá)質(zhì)粒作為誘餌蛋白表達(dá)質(zhì)粒,并構(gòu)建GR(AB、CD、EF、C、D)結(jié)構(gòu)域的AD質(zhì)粒,成功地建立了酵母雙雜交體系。酵母雙雜交結(jié)果顯示,RGS4全編碼框表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染酵母細(xì)胞后無自激活作用,GR各個
[Abstract]:Many physiological and pharmacological effects of glucocorticoids may be related to their non-genomic effects. Glucocorticoid receptor Glucocorticoid Receptorgrass is involved in the signal transduction of some non-genomic effects. The interaction between protein signaling 4 and gr may be one of the important ways to regulate this effect. In this study, yeast two-hybrid technique was used to investigate the interaction between RGS4 and gr, and the exact site of interaction was determined. The study was divided into two parts: 1. The interaction between RGS4 and gr domains was studied by yeast two-hybrid technique, and the interaction between RGS4 and gr domain proteins was studied by GST-pulldown technique. The full-coding frame expression plasmid of RGS4 protein was constructed as bait protein expression plasmid by RNAs from SD rat liver tissue, and the AD plasmid of GRABN CDSE-EFCU DG domain was constructed. The yeast two-hybrid system was successfully established. The results of yeast two-hybrid showed that the expression plasmid of RGS4 full coding frame had no self-activating effect on yeast cells after transfection.
【學(xué)位授予單位】:四川大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2005
【分類號】:R341
【共引文獻(xiàn)】
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,本文編號:1823508
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