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RNA干擾技術抑制3T3-L1脂肪細胞中脂聯(lián)素的表達

發(fā)布時間:2018-04-14 21:08

  本文選題:3T3-L1前脂肪細胞 + 細胞培養(yǎng)。 參考:《重慶醫(yī)科大學》2006年碩士論文


【摘要】: 目的:優(yōu)化3T3-L1前脂肪細胞的誘導分化方案;觀察細胞誘導分化過程中的生理學及形態(tài)學變化。 方法:常規(guī)培養(yǎng)前脂肪細胞,采用IBMX+地塞米松+胰島素+DMEM+10%FCS誘導方案分化細胞48h,再用含胰島素的DMEM+10%FCS培養(yǎng)48h,然后用DMEM+10%FCS維持培養(yǎng)直至分化成熟;光鏡下及油紅O染色觀察第0天,第5天,以及第9天細胞的形態(tài)學改變。 結果:分化后的3T3-L1前脂肪細胞逐漸變圓,突觸收縮,體積增大,光鏡下立體感增強,胞漿內(nèi)出現(xiàn)較多大而圓的脂滴,油紅O染色呈桔紅色。到第9天,大部分前體細胞分化為能分泌脂聯(lián)素的成熟脂肪細胞,可用于第二階段實驗。 結論:采用該誘導分化及進展維持方案,細胞分化成功率高,分化進度均一,且盡可能的避免了分化刺激因子對脂聯(lián)素表達的抑制作用,為第二階段實驗提供了良好的細胞模型。
[Abstract]:Aim: to optimize the induction and differentiation of preadipocytes from 3T3-L1 and to observe the physiological and morphological changes in the process of differentiation.Methods: adipocytes were cultured with IBMX dexamethasone insulin DMEM 10s for 48h, then DMEM 10s containing insulin for 48h, and then DMEM 10s for 48 h.The morphological changes of the cells were observed on day 0, day 5 and day 9 under light microscope and oil red O staining.Results: after differentiation of 3T3-L1, adipocytes gradually became round, synaptic contraction, volume increased, stereosensory increased under light microscope, more large and round lipid droplets appeared in the cytoplasm, and oil red O staining was orange red.On the 9th day, most of the precursor cells differentiated into adiponectin secreting adipocytes, which could be used in the second stage experiment.Conclusion: with this strategy of differentiation induction and progression maintenance, the cell differentiation success rate is high, differentiation progress is uniform, and the inhibitory effect of differentiation stimulating factor on adiponectin expression is avoided as far as possible.It provides a good cell model for the second stage experiment.
【學位授予單位】:重慶醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2006
【分類號】:R329.2

【共引文獻】

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本文編號:1751021

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