本文選題：核酸疫苗　切入點(diǎn)：乙型肝炎　出處：《第二軍醫(yī)大學(xué)》2005年博士論文

【摘要】：核酸疫苗是90年代興起的新型疫苗,已在多種疾病的防治中顯示出巨大的潛能。然而核酸疫苗是一個新生事物,目前還存在許多尚未解決的問題,其中安全性的問題最為重要,直接關(guān)系到核酸疫苗的應(yīng)用。全面評價乙肝DNA疫苗的安全性,我們進(jìn)行了以下的毒理研究:1.急性毒性試驗(yàn) 本研究分別考察了乙肝DNA疫苗肌肉注射或皮下注射免疫小鼠或豚鼠的急性毒性,結(jié)果表明乙肝DNA疫苗在小鼠或豚鼠上未見任何明顯急性毒性反應(yīng)。半數(shù)致死量是推薦臨床劑量的幾百倍。 2.重復(fù)劑量的長期毒性試驗(yàn) 分別用三個劑量組的DNA疫苗(4.5m乙肝g/kg、1.5mg/kg、0.5mg/kg)肌注免疫小鼠56天(每1周給藥2次,之后每周1次),從實(shí)驗(yàn)開始至停藥后30天內(nèi)進(jìn)行毒性觀察。結(jié)果表明小鼠體重、食量及糞便與對照組之間未見明顯改變。血液學(xué)及臨床生化指標(biāo)均屬正常范圍內(nèi)波動,未發(fā)現(xiàn)與受試藥相關(guān)的毒性反應(yīng)。尸檢、器官重量檢查未發(fā)現(xiàn)有與受試藥物有關(guān)的毒性改變。觀察了在上述給藥條件下小鼠的多項(xiàng)疫苗免疫指標(biāo),發(fā)現(xiàn)乙肝DNA疫苗未發(fā)現(xiàn)有產(chǎn)生免疫耐受的跡象;不能導(dǎo)致自身免疫;不會誘導(dǎo)抗核抗體;不會引起慢性炎癥及非特異性的免疫激活等免疫病理狀況。 以PCR法檢測質(zhì)粒DNA的染色體整合情況,結(jié)果表明1μg基因組DNA中整合質(zhì)粒低于10拷貝(即PCR的最大靈敏度);說明質(zhì)粒DNA整合到宿主細(xì)胞基因組上并使細(xì)胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化的可能性微乎其微。 3.致突變及生殖毒性實(shí)驗(yàn) 致突變試驗(yàn)的結(jié)果表明乙肝DNA疫苗在-S9和+S9系統(tǒng)對CHL細(xì)胞染色體畸變均小于5%。乙肝DNA疫苗對染色體無畸變作用。乙肝DNA疫苗不引起母體毒性和胚胎毒性的無毒劑量(NOAEL)大于5.4 mg/kg。
[Abstract]:Nucleic acid vaccine (Nic acid vaccine) is a new vaccine that emerged in 1990s and has shown great potential in the prevention and treatment of many diseases. However, nucleic acid vaccine is a new thing, and there are still many unsolved problems, among which safety is the most important. Directly related to the application of nucleic acid vaccine. Comprehensive evaluation of the safety of hepatitis B DNA vaccine, we conducted the following toxicological study: 1. Acute toxicity test. In this study, the acute toxicity of mice or guinea pigs immunized with hepatitis B DNA vaccine was investigated by intramuscular or subcutaneous injection, respectively. The results showed that there was no obvious acute toxicity of hepatitis B DNA vaccine in mice or guinea pigs, and the half lethal dose was several hundred times of the recommended clinical dose. 2. Long-term toxicity test of repeated doses. Mice were immunized with DNA vaccine of 4.5 mg 路kg ~ (-1) mg 路kg ~ (-1) 路kg ~ (-1) and 0.5 mg 路kg ~ (-1) 路kg ~ (-1) respectively for 56 days (twice every week, then once a week). The toxicity was observed from the beginning of the experiment to 30 days after the withdrawal of the drug. There was no significant change in food intake and feces between the control group and the control group. The hematological and clinical biochemical indexes fluctuated within the normal range, and no toxic reactions related to the tested drug were found. No toxic changes related to the tested drugs were found in organ weight test. The immune indexes of mice were observed under the above administration conditions. It was found that the hepatitis B DNA vaccine had no signs of producing immune tolerance and could not lead to autoimmunity. ANA is not induced, chronic inflammation and non-specific immune activation are not induced. The chromosome integration of plasmid DNA was detected by PCR method. The results showed that the integration plasmid in 1 渭 g genomic DNA was less than 10 copies (i.e., the maximum sensitivity of PCR), indicating that the possibility of integration of plasmid DNA into host cell genome and malignant transformation of the cell was very little. 3. Mutagenicity and reproductive toxicity. The results of mutagenicity test showed that the chromosomal aberration of CHL cells by HBV DNA vaccine was less than 5% in the -S9 and S9 systems. There was no chromosomal aberration of HBV DNA vaccine. The nontoxic dose of HBV vaccine did not cause maternal toxicity and embryotoxicity, and the dose of NOAELs was more than 5.4 mg / kg.
【學(xué)位授予單位】：第二軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2005
【分類號】：R392.1

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號：1673607