本文選題：低強(qiáng)度脈沖超聲　切入點(diǎn)：成纖維細(xì)胞　出處：《重慶醫(yī)科大學(xué)》2007年碩士論文

【摘要】： 超聲波被廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)治療和診斷領(lǐng)域,高強(qiáng)度聚焦超聲作為一種無(wú)創(chuàng)性治療手段正日益受到人們的重視。低強(qiáng)度脈沖超聲波(low intensity pulsed ultrasound,LIPUS)具有刺激細(xì)胞增殖和細(xì)胞外基質(zhì)合成增加的作用,已逐漸應(yīng)用于骨與軟組織創(chuàng)傷的愈合和神經(jīng)修復(fù)治療中。目前,LIPUS對(duì)人皮膚成纖維細(xì)胞的影響研究還較少,為了探討超聲治療皮膚疾病的應(yīng)用前景,我們研究了LIPUS對(duì)人皮膚成纖維細(xì)胞的增殖及膠原蛋白合成的影響,為L(zhǎng)IPUS治療皮膚疾病提供理論依據(jù)。并開(kāi)展了聚焦超聲治療神經(jīng)性皮炎和慢性濕疹的臨床研究,進(jìn)行了超聲治療皮膚疾病的初步探討。 一、LIPUS促進(jìn)皮膚成纖維細(xì)胞增殖的適宜輻照參數(shù)篩選 用輻照參數(shù)為1 MHz、1.2 MHz、1.7 MHz,每一頻率下四種不同聲強(qiáng)的LIPUS,同一聲強(qiáng)分別輻照0 min(假照組)、5 min、10 min、15 min、20 min和30 min體外培養(yǎng)的成纖維細(xì)胞,輻照24 h后觀察成纖維細(xì)的生長(zhǎng)增殖情況,采用MTT法測(cè)定其吸光光度值,計(jì)算其相對(duì)成活值,通過(guò)比較不同輻照參數(shù)對(duì)細(xì)胞的相對(duì)成活率的影響,篩選出促進(jìn)皮膚成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)的最適宜頻率、聲強(qiáng)和輻照時(shí)間。 結(jié)果: (1)用MTT法測(cè)定三種頻率(1 MHz、1.2 MHz、1.7 MHz),每一頻率下四種聲強(qiáng)的LIPUS輻照成纖維細(xì)胞5 min,24 h后吸光光度值均增加,輻照成纖維細(xì)胞10 min,24 h后吸光光度值增加最高,較對(duì)照組都有顯著性差異(P0.05)。超過(guò)一定輻照時(shí)間后,吸光光度值下降,且隨著輻照時(shí)間的延長(zhǎng),吸光光度值下降顯著。(2)比較細(xì)胞的相對(duì)成活率發(fā)現(xiàn),頻率1 MHz、聲強(qiáng)0.1 W/cm2、輻照時(shí)間5 min時(shí)細(xì)胞相對(duì)成活率為1.195,10 min時(shí)達(dá)1.325,與其它輻照參數(shù)組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),兩者之間比較P0.05,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。10 min時(shí)的細(xì)胞相對(duì)成活率最高,與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:⑴不同頻率、不同聲強(qiáng)的LIPUS輻照一定時(shí)間均能促進(jìn)人真皮成纖維細(xì)胞增殖,超過(guò)一定輻照時(shí)間則會(huì)抑制細(xì)胞生長(zhǎng)。⑵頻率1 MHz、聲強(qiáng)0.1 W/cm2、輻照時(shí)間10 min為促進(jìn)成纖維細(xì)胞增殖較為適宜的輻照參數(shù)。 二、低強(qiáng)度脈沖超聲對(duì)皮膚成纖維細(xì)胞增殖及膠原蛋白合成的影響 采用最適宜聲參數(shù)——頻率1 MHz、聲強(qiáng)0.1 W/cm2的LIPUS輻照體外培養(yǎng)的人皮膚成纖維細(xì)胞,分別輻照5 min,10 min及20 min,采用H3-胸腺嘧啶核苷摻入試驗(yàn)檢測(cè)其對(duì)細(xì)胞合成DNA的影響,H3-脯胺酸摻入試驗(yàn)檢測(cè)其對(duì)細(xì)胞合成膠原蛋白的影響,并用流式細(xì)胞儀檢測(cè)其對(duì)細(xì)胞周期的影響。結(jié)果:頻率1 MHz、聲強(qiáng)0.1 W/cm2的LIPUS輻照成纖維細(xì)胞5 min,24 h后細(xì)胞H3-胸腺嘧啶核苷H3- TdR摻入量為對(duì)照組的1.27倍、H3-脯胺酸摻入量為對(duì)照組的2.22倍,輻照10 min,24 h后H3- TdR摻入量為對(duì)照組的1.55倍、H3-脯胺酸摻入量為對(duì)照組的2.31倍,與對(duì)照組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05),而輻照10 min時(shí)摻入量達(dá)最高,較5 min組有顯著性差異(P0.05),隨著輻照時(shí)間進(jìn)一步增加摻入量反而下降。LIPUS輻照5 min,S期細(xì)胞為(13.84±1.77)%,較對(duì)照組增加(P0.05);輻照10 min后S期細(xì)胞為(20.56±3.56)%,較對(duì)照組增加(P0.05);而輻照10 min G2/M期細(xì)胞(15.89±1.75)%,較對(duì)照組下降(P0.05)。結(jié)論:LIPUS輻照一定時(shí)間能夠促進(jìn)人皮膚成纖維細(xì)胞DNA及膠原蛋白合成增加,并可以使細(xì)胞的周期發(fā)生改變,促進(jìn)細(xì)胞從G2/M期進(jìn)入S期,從而促進(jìn)細(xì)胞的增殖。 三.聚焦超聲治療神經(jīng)性皮炎和慢性濕疹的初步探討 采用自身對(duì)照法對(duì)聚焦超聲治療51例神經(jīng)性皮炎患者和51例慢性濕疹患者進(jìn)行了療效觀察和安全性評(píng)價(jià)。治療組采用重慶海扶技術(shù)有限公司研制生產(chǎn)的CZP型皮膚超聲治療儀進(jìn)行治療,對(duì)照組治療采用安慰劑(白凡士林)外涂,每日2次。治療后一月觀察病人的主觀癥狀、體征以及出現(xiàn)的其他不良反應(yīng),評(píng)價(jià)超聲治療的有效性和安全性,并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果:治療后1月,治療組神經(jīng)性皮炎患者和慢性濕疹患者各項(xiàng)瘙癢/體征指標(biāo)計(jì)分及總計(jì)分均有明顯下降,與對(duì)照組組間比較有顯著差異(P0.05〉。治療后1月,神經(jīng)性皮炎患者治療組的痊愈率和痊愈顯效率分別為2%和52.9%;慢性濕疹患者治療組的痊愈率和痊愈顯效率分別為4%和54.9%,與對(duì)照組比較均顯著性增加(P0.05〉;不同程度(重度9,輕度≤9)神經(jīng)性皮炎和慢性濕疹治療1月后療效無(wú)顯著性差異;超聲治療后患者瘙癢情況明顯改善,治療后90.2%慢性濕疹患者、80.4%神經(jīng)性皮炎患者瘙癢基本消失或明顯減輕;治療后無(wú)不良反應(yīng)發(fā)生。結(jié)論:超聲波可以有效治療慢性濕疹和神經(jīng)性皮炎,是一種新型的、有效的、安全的物理治療手段,是一種值得推廣也需要進(jìn)一步研究的新興物理治療方法。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2007
【分類(lèi)號(hào)】：R312

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3 孫q，

本文編號(hào)：1663146