本文選題：傷寒桿菌IVB型菌毛　切入點：THP-1細胞　出處：《武漢大學》2005年碩士論文

【摘要】：目的 初步探討傷寒桿菌IVB型菌毛是否參與細菌對機體造成的炎癥損傷,是否激活PKC、ERK、NF-κB信號通路誘導THP-1細胞IL-6的表達。方法 將THP-1細胞分別與有IVB型菌毛的A21-6菌、缺失IVB型菌毛的pilS菌共同孵育;ELISA法檢測IL-6的產量、RT-PCR檢測IL-6 mRNA的表達水平、非放射活性測定法檢測PKC活性變化、免疫印跡法檢測ERK磷酸化水平、熒光素酶報道基因分析法檢測NF-κB激活表達。結果 THP-1細胞經有IVB型菌毛的A21-6菌刺激后,IL-6的產生水平、mRNA的表達水平、PKC的活性變化、ERK激酶磷酸化水平和NF-κB激活表達均顯著高于相應的pilS菌組;PKC、ERK和NF-κB活化水平分別于刺激10min、30min和60min后即明顯升高;并分別于30min、60min和120min左右達到峰值。PKC抑制劑DECA一定程度上能夠抑制IVB型菌毛誘導的THP-1細胞PKC活性、NF-κB激活表達和IL-6產生水平。結論傷寒桿菌IVB型菌毛顯著增強了THP-1細胞PKC、ERK和NF-κB活化水平,IVB型菌毛在傷寒桿菌誘導單核/巨噬細胞PKC、ERK和NF-κB活化過程中是一種重要的強刺激因素;IVB型菌毛在傷寒桿菌誘導單核/巨噬細胞產生IL-6過程中也是一種重要的刺激因素;PKC、ERK和NF-κB三種信號通路分子參與了該過程的細胞內信號轉導。傷寒桿菌IVB型菌毛可能通過激活PKC→ERK→NF-κB途徑引起IL-6等致炎因子的大量合成與釋放,從而造成機體病理損傷。
[Abstract]:Objective to investigate whether the IVB fimbriae of S. typhimurium are involved in the inflammatory injury caused by bacteria and whether it activates the signal pathway of PKCERKN NF- 魏 B to induce the expression of IL-6 in THP-1 cells. Methods THP-1 cells and A21-6 bacteria with IVB fimbriae were divided into two groups. The expression level of IL-6 mRNA was detected by RT-PCR, PKC activity was detected by non-radioactivity assay, and ERK phosphorylation level was detected by Western blot. Luciferase reporter gene analysis was used to detect the activation and expression of NF- 魏 B. Results THP-1 cells were stimulated by A21-6 strain with IVB type pili. Results the level of IL-6 production and the activity of PKC were correlated with the phosphorylation of ERK kinase and the activation and expression of NF- 魏 B in THP-1 cells. The activation levels of PKC ERK and NF- 魏 B were significantly higher than those in the corresponding pilS group after stimulation for 10 min or 30 min and 60min, respectively. The peak value of PKC inhibitor, DECA, reached a peak at about 30 min or so. PKC inhibitor DECA could inhibit the activation, expression of NF- 魏 B and IL-6 production in THP-1 cells induced by IVB fimbriae to some extent. Conclusion the IVB fimbriae of S. typhimurium can significantly enhance THP-1 cells. The activation level of PKCU ERK and NF- 魏 B the IVB-type fimbriae are an important stimulator in the process of inducing the activation of mononuclear / macrophage PKC- 魏 B by S. typhimurium, and also in the process of inducing monocytes / macrophages to produce IL-6 by S. typhimurium. One of the important stimulant factors, PKC ERK and NF- 魏 B, is involved in the intracellular signal transduction of this process. The IVB fimbriae of S. typhimurium may be activated by the activation of PKC. 鈫扙RK. 鈫扤F- 魏 B pathway induces the synthesis and release of IL-6 and other inflammatory factors, resulting in pathological injury.
【學位授予單位】：武漢大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2005
【分類號】：R378

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