長角血蜱性信息素的主要成分及其功能
本文選題:長角血蜱 切入點:性信息素 出處:《河北師范大學(xué)》2007年碩士論文 論文類型:學(xué)位論文
【摘要】: 蜱類為專性吸血的外寄生動物,是節(jié)肢動物中的一個特殊類群,傳播多種人、畜和野生動物疾病,對人類健康和畜牧業(yè)造成極大危害。蜱類性信息素由吸血后雌蜱釋放,刺激并吸引性活動的雄蜱,從而完成尋找配偶和交配過程,對生殖起關(guān)鍵作用。因此,對蜱類性信息素的研究對于控制其種群數(shù)量,減小危害有重要意義。 本研究以廣泛分布于我國的長角血蜱(Haemaphysalis longicornis Neumann)為研究對象,運用固相萃取、薄層層析、氣相色譜和氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用等現(xiàn)代生物學(xué)及交叉學(xué)科的研究方法對多種收集方法得到的性信息素樣品進(jìn)行分析,鑒定其中主要化學(xué)物質(zhì)的種類和含量,并通過生物測定確定其活性成分和生物學(xué)作用。本研究深入闡明長角血蜱性信息素的主要成分和生物學(xué)功能,對于蜱類防治有重要理論和實際應(yīng)用意義。主要結(jié)果如下: 長角血蜱交配期雄蜱對氣流收集法、腺體浸提法和整蜱浸提法三種方法得到的樣品均有一系列大致相同的反應(yīng):開始是第一對附肢在空中揮舞表現(xiàn)出積極的尋找行為;在15min內(nèi)多數(shù)雄蜱會陸續(xù)停止爬行并停留在一定區(qū)域;最后將附肢收攏在軀體下面,保持靜止不動的狀態(tài)。氣流收集法得到的樣品對雄蜱吸引率最高。氣流收集法、腺體浸提法和整蜱浸提法得到的性信息素樣品對交配期雄蜱吸引率依次為:88㳠、76㳠和59㳠。性信息素樣品提取方法的比較研究發(fā)現(xiàn),不同收集方法樣品成分種類和含量均由較大差異。氣流收集法對保留時間較小的物質(zhì)收集效率極高。這類物質(zhì)揮發(fā)性很強,并且在結(jié)構(gòu)上有共同點,均攜帶有數(shù)目不等的氯原子(六氯乙烷、五氯丙烷、八氯丙烷、六氯丙烷和七氯丙烷)。這類物質(zhì)在長角血蜱中的生物學(xué)作用尚未確定。腺體收集法能夠增加性信息素的提取量,在樣品中檢測到微量2,6-二氯酚(2,6-DCP)和含量較大的膽甾醇。整蜱浸提法對于保留時間小于12min的物質(zhì)提取效率很低,而在14min-21min色譜峰比較集中,這種方法能夠較好提取長角血蜱體表物質(zhì),如幾種不同的長鏈脂肪酸和膽甾醇酯類等。 本研究采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用方法在長角血蜱腺體提取物中鑒定出微量2,6-DCP,為吸引性信息素主要成分。氣相色譜分析長角血蜱交配期雌蜱揮發(fā)物中可能存在另外一種結(jié)構(gòu)類似的物質(zhì)——2,4-DCP,與2,6-DCP的比例為1∶8.74,在生物測定中對交配期雄蜱吸引率達(dá)到62㳠,與2,6-DCP并無顯著差異,2,4-DCP在長角血蜱交配中也有重要作用。 本研究通過氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用方法鑒定出長角血蜱交配期雌蜱性信息素樣品中存在膽甾醇、膽甾醇油酸酯和膽甾二醇乙酸酯。通過體表點滴法進(jìn)行生物測定,發(fā)現(xiàn)膽甾醇、膽甾醇油酸酯和膽甾二醇二乙酸酯類似物膽甾醇乙酸酯三種標(biāo)準(zhǔn)樣品均可使長角血蜱交配成功率顯著恢復(fù),可確定膽甾醇和膽甾醇油酸酯為長角血蜱MSP主要成分。 本研究還首次在長角血蜱交配期雌蜱樣品中發(fā)現(xiàn)長鏈飽和脂肪酸——十四烷酸、十八烷酸,這兩種物質(zhì)是長角血蜱GSP可能成分。
[Abstract]:Foreign animal parasitic ticks, is a special group of arthropod animal in the spread of a variety of people, livestock and wild animal diseases, causing great harm to human health and animal husbandry. Tick pheromone released by a female ticks after feeding, stimulate and attract activity of the male ticks, thus completing the looking for a spouse and mating process, plays a key role in reproduction. Therefore, the tick sex pheromone for the control of the population, have important significance to reduce the harm.
In this study, widely distributed in China and haemaphysalislongicornis (Haemaphysalis longicornis Neumann) as the research object, using solid phase extraction, thin-layer chromatography, gas chromatography and gas chromatography-mass spectrometry method in the research of modern biology and interdisciplinary method to collect a variety of sex pheromone samples analysis, type and content the main chemical substances identified, and the biological determination of active ingredients and determine its biological role. This study further clarify the information of haemaphysalislongicornis main components and biological elements of the function, has important theoretical and practical significance for the prevention and control of ticks. The main results are as follows:
Haemaphysalis longicornis mating male ticks on the air collecting method, gland extraction and extraction from the whole tick three methods of samples have a series of roughly the same reaction: the beginning is the first pair of appendages waving in the air show actively seeking behavior; most male ticks will continue to stop crawling and stay in a certain area in 15min; the appendage folded in the body below the stationary state. The sample collection method of air flow rate was the highest. The male ticks attract air collecting method, gland extraction and whole tick extracted sex pheromone samples of mating male ticks attract rate as follows: 88, 76?? and 59?. a comparative study of the sex pheromone sample extraction method, different methods of collecting sample component and the content are quite different. The retention time of air collecting method small matter collection efficiency is very high. This kind of material is highly volatile, and at the junction Have a common structure, are carrying the number of chlorine atoms (hexachloroethane, five epichlorohydrin, eight epichlorohydrin, hexachloropropane and seven chloro propane). The biological effects of these substances in Haemaphysalis longicornis in glands has not been determined. Collection method can increase the amount of information extraction, to trace 2,6- two detection of chlorophenol in the sample (2,6-DCP) and high content of cholesterol. The whole tick extraction for material retention time is less than 12min the extraction efficiency is very low, and more concentrated in the 14min-21min peak, this method can better extract haemaphysalislongicornis surface material, such as different kinds of long chain fatty acids and cholesterol esters.
This research uses gas chromatography - mass spectrometry identification of trace 2,6-DCP in haemaphysalislongicornis gland extracts with methods, in order to attract major sex pheromone components. Gas chromatographic analysis of haemaphysalislongicornis mating female ticks were there may be another kind of structural similar material -- 2,4-DCP from 2,6-DCP, and the ratio of 1 8.74, in the bioassay of mating male ticks to attract up to 62?, and 2,6-DCP had no significant difference, 2,4-DCP also plays an important role in haemaphysalislongicornis mating.
This study by gas chromatography-mass spectrometry method for identifying Haemaphysalis longicornis mating exist cholesterol period female ticks of sex pheromone in the sample, cholesteryl oleate and cholesteryl acetate. Glycol bioassay was carried out through the surface drip method found that cholesterol, cholesteryl oleate and cholesteryl ester analogues of two alcohol two cholesteryl acetate three standard samples can make the longicornis mating success rate recovered significantly, can determine cholesterol and cholesteryl oleate as the main component of haemaphysalislongicornis MSP.
In this study, for the first time, long chain saturated fatty acids - fourteen alkanic acid and eighteen alkanic acid were found in the female ticks of the ticks, and these two substances were GSP components of the tick.
【學(xué)位授予單位】:河北師范大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2007
【分類號】:R384;S852.7
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,本文編號:1619212
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