犬經(jīng)皮插管腎動脈注射人HGF基因的實驗研究
本文選題:介入插管技術(shù) 切入點:腎動脈 出處:《南京醫(yī)科大學學報(自然科學版)》2005年08期 論文類型:期刊論文
【摘要】:目的:運用介入插管技術(shù),經(jīng)犬腎動脈快速注射含人肝細胞生長因子(HGF)重組基因的質(zhì)粒(pCMV鄄HGF)。檢測不同時間犬腎臟組織中外源性人HGF蛋白的水平,了解外源性HGF基因在犬腎臟組織內(nèi)的表達情況。方法:健康成年犬6只,在麻醉和無菌條件下均經(jīng)左腎動脈介入插管。其中4只注射pCMV鄄HGF質(zhì)粒,1只注射空質(zhì)粒(pcDNA3)對照,1只為注射等滲鹽水空白對照。注射后不同時間留取犬靜脈血以及部分腎組織,采用ELISA方法,分別檢測血清及腎組織中人HGF蛋白的水平。結(jié)果:①該實驗建立的檢測人重組HGF的ELISA敏感性高(15~1000ng/ml),重復性強;②接受3種不同處理的犬靜脈血中均未檢測到人重組HGF蛋白的存在;③注射pCMV鄄HGF質(zhì)粒的犬腎組織中能夠檢測到人重組HGF蛋白的存在。72h腎組織中HGF的水平范圍在27~667ng/mg蛋白之間。注射空質(zhì)粒和等滲鹽水的犬(即2號和5號犬)腎組織則無表達。結(jié)論:運用介入插管技術(shù),經(jīng)犬腎動脈快速注射pCMV鄄HGF可以在腎臟內(nèi)產(chǎn)生基因高轉(zhuǎn)染表達。
[Abstract]:Objective: using interventional catheterization technique, the recombinant plasmid pCMV-HGF containing human hepatocyte growth factor (HGF) gene was injected into the canine renal artery rapidly. The levels of exogenous human HGF protein in the canine kidney tissue were detected at different times. Objective: to investigate the expression of exogenous HGF gene in canine kidney. Under anaesthesia and aseptic conditions, interventional catheterization of left renal artery was performed. Among them, 4 were injected with pCMV-HGF plasmid, 1 was injected with empty plasmid pcDNA3) and 1 was injected with isoosmotic saline. The venous blood and some renal tissues were collected at different time after injection. Using ELISA method, Results the ELISA sensitivity of human recombinant HGF was 151000 ng / ml, and the reproducibility of human recombinant HGF eggs was not detected in the venous blood of dogs treated with three different treatments. Human recombinant HGF protein was detected in the kidney tissue of dogs injected with pCMV-HGF plasmid. 72 h after injection, the level of HGF in renal tissue was in the range of 27667 ng / mg protein. Dogs injected with empty plasmids and isosmotic saline (I. e., 2 and 5 dogs) showed that the level of HGF in renal tissue was in the range of 27667 ng / mg. There was no expression in renal tissue. Conclusion: interventional intubation, Rapid injection of pCMV-HGF into the renal artery can produce high-transfection expression in the kidney.
【作者單位】: 南京醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院介入放射科 南京醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院介入放射科 南京醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院腎內(nèi)科
【分類號】:R692.5
【共引文獻】
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,本文編號:1583553
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