漢灘病毒G1蛋白胞質(zhì)區(qū)ITAM樣基序功能的研究
本文選題:漢坦病毒 切入點(diǎn):囊膜糖蛋白類 出處:《病毒學(xué)報(bào)》2007年06期 論文類型:期刊論文
【摘要】:漢灘病毒(HTNV)的G1蛋白胞質(zhì)區(qū)尾段包含保守的免疫受體酪氨酸活化基序(ITAM)樣基序,該基序與許多重要的免疫受體胞質(zhì)區(qū)ITAM基序同源性較高。為了研究HTNV的G1 ITAM樣基序的免疫信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)功能,首先人工合成了一段保守的酪氨酸殘基磷酸化的G1 ITAM樣基序多肽,應(yīng)用體外蛋白激酶共沉淀實(shí)驗(yàn),分別從Jur-kat細(xì)胞和Raji細(xì)胞裂解物中初篩到5~9種與該基序相互作用的磷酸化蛋白或激酶;然后通過突變體分析、體外磷酸化實(shí)驗(yàn)和體外激酶共沉淀-免疫印跡分析,進(jìn)一步確證了G1 ITAM樣基序在體外可以與Src家族蛋白酪氨酸激酶(PTK)Lyn、Fyn及其下游Syk家族激酶Syk、ZAP-70相互作用,而這種相互作用依賴于該基序中兩個(gè)高度保守的酪氨酸殘基的存在。上述研究表明,HTNV G1蛋白胞質(zhì)區(qū)包含一個(gè)高度保守的功能性ITAM樣基序,該基序在體外可以與TCR和BCR信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中關(guān)鍵的PTK相互作用,為進(jìn)一步探討HTNV G1蛋白ITAM樣基序在腎綜合征出血熱(HFRS)免疫信號(hào)傳遞中的作用奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:The cytoplasmic region of G1 protein of Hantaan virus (HTNV) contains conserved tyrosine activation motifs like motifs. In order to study the immuno-signal transduction function of HTNV G1 ITAM like motif, we synthesized a polypeptide of conserved tyrosine residues phosphorylated G1 ITAM like motifs. In vitro protein kinase coprecipitation assay was used to screen 9 phosphorylated proteins or kinases interacting with this motif from Jur-kat cells and Raji cell lysates respectively. In vitro phosphorylation assay and in vitro kinase coprecipitation and Western blotting analysis further confirmed that G1 ITAM like motif could interact with Src family protein tyrosine kinase (PTK), Src protein tyrosine kinase (PTK), and its downstream Syk family kinase, Sykton-ZAP-70, in vitro, and further confirmed that G 1 ITAM like motif could interact with Src family protein tyrosine kinase. This interaction depends on the existence of two highly conserved tyrosine residues in the motif. This motif can interact with the key PTK in TCR and BCR signal transduction in vitro, which lays a foundation for further exploring the role of HTNV G1 ITAM like motif in the immune signal transduction of hemorrhagic fever with renal syndrome (HFRS).
【作者單位】: 第四軍醫(yī)大學(xué)唐都醫(yī)院全軍感染病診療中心 第四軍醫(yī)大學(xué)唐都醫(yī)院全軍感染病診療中心 第四軍醫(yī)大學(xué)唐都醫(yī)院全軍感染病診療中心 德州大學(xué)醫(yī)學(xué)院病理和內(nèi)科學(xué)系 哈佛大學(xué)艾滋病研究中心和感染病科 德州大學(xué)醫(yī)學(xué)院病理和內(nèi)科學(xué)系 第四軍醫(yī)大學(xué)唐都醫(yī)院全軍感染病診療中心 第四軍醫(yī)大學(xué)唐都醫(yī)院全軍感染病診療中心 第四軍醫(yī)大學(xué)唐都醫(yī)院全軍感染病診療中心 第四軍醫(yī)大學(xué)唐都醫(yī)院全軍感染病診療中心 第四軍醫(yī)大學(xué)唐都醫(yī)院全軍感染病診療中心
【基金】:國家自然科學(xué)基金(No.30471540)
【分類號(hào)】:R373.9
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