本文選題：產(chǎn)氨短桿菌　切入點：乳清酸　出處：《上海師范大學(xué)》2005年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：尿嘧啶核苷酸(Uridine 5’monophosphate,UMP)是一種重要的藥物、藥物前體和食品添加劑。本論文的目的在于研究以乳清酸為底物,利用微生物轉(zhuǎn)化生成UMP。 本研究采用HPLC 法和液質(zhì)聯(lián)用法確證了產(chǎn)氨短桿菌Corynebacterium ammoniagenesR248 能將底物乳清酸轉(zhuǎn)化生成UMP。研究了發(fā)酵轉(zhuǎn)化和細(xì)胞轉(zhuǎn)化反應(yīng)體系中幾種因素對R248 菌株轉(zhuǎn)化UMP 的影響,結(jié)果表明,乳清酸1g/L、生物素50μg/L、pH 5.0、25℃轉(zhuǎn)化培養(yǎng)4 天后, UMP 生成能力為420mg/L。乳清酸20g/L、細(xì)胞量20%、pH 7.2、250ml 三角瓶裝液量5ml、32℃反應(yīng)26 小時后,R248 的細(xì)胞轉(zhuǎn)化能力為991mg/L。 采用鏈霉素抗性、卡那霉素抗性和產(chǎn)物結(jié)構(gòu)類似物抗性等作為篩選手段,對產(chǎn)氨短桿菌R248 進(jìn)行離子束和紫外誘變,選育出一株UMP 生成能力比出發(fā)菌株R248 提高7 倍突變株M14。 對高活性突變株M14 的細(xì)胞轉(zhuǎn)化和發(fā)酵轉(zhuǎn)化條件進(jìn)行優(yōu)化。結(jié)果表明,發(fā)酵轉(zhuǎn)化中突變株M14 轉(zhuǎn)化能力為0.98g/L;突變株M14 在乳清酸20g/L、細(xì)胞量30%、pH 8.06、葡萄糖50g/L、磷酸鹽15g/L、21×180mm 試管裝液量5ml、32℃細(xì)胞轉(zhuǎn)化6 小時后UMP 的轉(zhuǎn)化能力為2.1g/L。 產(chǎn)氨短桿菌R248 發(fā)酵轉(zhuǎn)化和細(xì)胞轉(zhuǎn)化生成UMP,高活性突變菌株M14 的選育,以及突變株M14 轉(zhuǎn)化條件的優(yōu)化,對進(jìn)一步研究產(chǎn)氨短桿菌Corynebacterium ammoniagenes 轉(zhuǎn)化乳清酸生成UMP 具有重要意義。
[Abstract]:Uridine 5 monophosphate (UMP) is an important drug, drug precursor and food additive. In this study, HPLC method and liquid-quality analysis were used to confirm that Bacillus ammoniaci Corynebacterium ammoniagenesR248 could transform substrate whey acid into UMP.The effects of several factors in fermentation transformation and cell transformation reaction system on the transformation of R248 into UMP were studied. Whey acid 1 g / L, biotin 50 渭 g / L, pH 5.0 ~ 25 鈩，

本文編號：1567522