人子宮內(nèi)膜細(xì)胞體外誘導(dǎo)蛻膜化的效果觀察
本文關(guān)鍵詞: 子宮內(nèi)膜細(xì)胞 蛻膜化 -溴-環(huán)磷酸腺苷(-Br-cAMP) 雌激素(E_) 孕激素(P) 出處:《生殖與避孕》2014年01期 論文類型:期刊論文
【摘要】:目的:觀察孕激素(progestogen,P)、雌激素(estrogen,E_2)和8-溴-環(huán)磷酸腺苷(8-Br-cAMP)不同組合的3種方法對(duì)人子宮內(nèi)膜細(xì)胞體外誘導(dǎo)蛻膜化的效果。方法:收集因子宮良性疾病行全子宮切除術(shù)患者的子宮內(nèi)膜,分離純化子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞(endometrial stromal cell,ESC),進(jìn)行細(xì)胞體外培養(yǎng)并傳代,免疫熒光鑒定細(xì)胞類型。分別采用P+E_2(PE組)、8-Br-cAMP(PC組)、P+E_2+8-BrcAMP(PEC組)3種不同組合方法蛻膜化誘導(dǎo)處理第3代ESC,并以空白對(duì)照為對(duì)照組。顯微鏡下觀察蛻膜化過(guò)程中的細(xì)胞形態(tài)變化,化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)3種不同蛻膜化誘導(dǎo)方法處理24h.48h及96h后細(xì)胞培養(yǎng)液中催乳素(PRL)水平,比較3種蛻膜化方法的效果。結(jié)果:蛻膜化過(guò)程中ESC形態(tài)從長(zhǎng)梭形逐漸變?yōu)閳A形,細(xì)胞體積變大,胞核增大,部分出現(xiàn)雙核或多核,細(xì)胞邊界變模糊。隨著培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng),各蛻膜化誘導(dǎo)組培養(yǎng)液中PRL呈不同水平升高。其中PC組PRL水平及蛻膜化細(xì)胞形態(tài)均較PE組和PEC組升高明顯(P0.05)。結(jié)論:P+8-Br-cAMP法,較P+E_2、P+E_2+8-BrcAMP法能更有效地誘導(dǎo)子宮ESC體外發(fā)生蛻膜化,是高效可靠、更合適的蛻膜化誘導(dǎo)方法。
[Abstract]:Objective: to observe the effects of three different combinations of progestogen P (P), estradiol estradiol (E _ 2) and 8-Br-cAMP) on decidualization induced by human endometrial cells in vitro. Methods: total hysterectomy was performed for benign uterine diseases. The endometrium of the patient, Endometrial stromal cells were isolated and purified from endometrial stromal cells, cultured in vitro and subcultured. The cell types were identified by immunofluorescence. The third generation ESCs were treated by decidualization induction with three different combinations of P E2PE group and 8-Br-cAMPP PC group. The morphologic changes of the cells during decidualization were observed under microscope. Chemiluminescence assay was used to detect the prolactin prolactin (PRL) levels in the cell culture medium after 24 h, 48 h and 96 h treatment with different decidualization methods, and to compare the effects of the three decidualization methods. Results: during decidualization, the shape of ESC gradually changed from spindle shape to round shape. The size of the cell becomes larger, the nucleus of the cell increases, part of the cell has binuclear or polynuclear, and the boundary of the cell becomes blurred. The PRL level and decidualized cell morphology in PC group were significantly higher than those in PE group and PEC group (P 0.05). Conclusion the ratio of P 8-Br-cAMP method is more effective than P E2P E28 Br-BrcAMP method in inducing decidualization of uterine ESC in vitro. It is an effective and more suitable method for decidualization induction.
【作者單位】: 首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京婦產(chǎn)醫(yī)院生殖中心;首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京婦產(chǎn)醫(yī)院婦科;首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京婦產(chǎn)醫(yī)院手術(shù)室;首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京婦產(chǎn)醫(yī)院檢驗(yàn)科;
【基金】:北京市自然科學(xué)基金項(xiàng)目(5122015) 北京市科技新星基金項(xiàng)目(H020821200190) 首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京婦產(chǎn)醫(yī)院院內(nèi)基金項(xiàng)目(201114)
【分類號(hào)】:R329
【參考文獻(xiàn)】
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【共引文獻(xiàn)】
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【相似文獻(xiàn)】
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6 趙靜;華美娟;蔣s,
本文編號(hào):1548108
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