本文關(guān)鍵詞： 鼠巨細(xì)胞病毒 感染 Morris水迷宮 學(xué)習(xí)記憶能力 MCMV感染 [Ca~(2+)]_i CaM mRNA；CaMKII RT-PCR Western Blotting 鼠巨細(xì)胞病毒 海馬 星形膠質(zhì)細(xì)胞 GFAP　出處：《華中科技大學(xué)》2006年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】： 第一部分MCMV感染小鼠模型的建立及行為學(xué)改變 目的：巨細(xì)胞病毒(CMV)感染模型的建立并觀察幼年時(shí)期巨細(xì)胞病毒(MCMV)感染小鼠成年后學(xué)習(xí)記憶的能力。方法：用MCMV毒株感染鼠胚肺細(xì)胞(MEL)，測(cè)定病毒感染性滴度及建立感染性模型。將新生BALB／C乳鼠同母鼠按窩隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)對(duì)照組和病毒感染組，感染病毒方法為：新生小鼠出生后當(dāng)天用微量注射器顱內(nèi)注射病毒懸液，對(duì)照組顱內(nèi)注射等量生理鹽水。3個(gè)月后，利用Morris水迷宮試驗(yàn)對(duì)兩組動(dòng)物的學(xué)習(xí)和記憶成績(jī)進(jìn)行測(cè)試。結(jié)果：Morris水迷宮測(cè)試的結(jié)果顯示，病毒感染組小鼠的學(xué)習(xí)記憶成績(jī)明顯下降，且有顯著性差異(P＜0.01)。結(jié)論：巨細(xì)胞病毒感染能夠?qū)е滦∈笊窠?jīng)系統(tǒng)功能紊亂，學(xué)習(xí)記憶能力下降。 第二部分MCMV感染小鼠腦內(nèi)Ca~(2+)／CaM／CaMKII水平及線粒體膜電位和突觸形態(tài)的改變 目的：觀察小鼠海馬神經(jīng)細(xì)胞中鈣離子—鈣調(diào)素(CaM)—鈣調(diào)蛋白激酶Ⅱ(CaMKII)水平及線粒體膜電位的變化以及從形態(tài)學(xué)的角度觀察突觸結(jié)構(gòu)的變化對(duì)巨細(xì)胞病毒感染小鼠學(xué)習(xí)記憶的影響，探討巨細(xì)胞病毒感染中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能紊亂的神經(jīng)生物學(xué)機(jī)制。方法：制造模型方法同前，將感染組和對(duì)照組小鼠分別分為5組：1、采用熒光分光光度計(jì)，對(duì)各組海馬神經(jīng)細(xì)胞[Ca~(2+)]_i進(jìn)行測(cè)定；2、RT-PCR組，通過(guò)對(duì)海馬組織總RNA的提取，測(cè)定CaM mRNA水平的變化；3、Western Blotting組，通過(guò)對(duì)海馬組織膜蛋白的提取，測(cè)定神經(jīng)細(xì)胞胞膜中CaMKII蛋白表達(dá)水平的變化，4流式細(xì)胞儀檢測(cè)線粒體膜電位的變化，5透射電鏡觀察突觸界面的變化。結(jié)果：病毒感染組海馬組織神經(jīng)細(xì)胞中[Ca~(2+)]_i較對(duì)照組增高，海馬CaM mRNA的水平增加，而膜蛋白CaMKII的水平表達(dá)下降，差異有顯著性意義(P＜0.01)。病毒感染組神經(jīng)細(xì)胞線粒體膜電位降低及突觸間隙增寬、后膜PSD變薄。結(jié)論：巨細(xì)胞病毒感染可以導(dǎo)致小鼠腦海馬組織神經(jīng)細(xì)胞中Ca~(2+)／CaM／CaMKII系統(tǒng)的改變，使線粒體膜電位降低，突觸參數(shù)改變，影響信息傳遞效率，由于CaMKII是空間學(xué)習(xí)和記憶的分子基礎(chǔ)，因此其表達(dá)變化也間接反映了學(xué)習(xí)與記憶的情況，鈣及其信號(hào)系統(tǒng)功能失衡可能是巨細(xì)胞病毒感染致中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能紊亂、記憶能力降低的機(jī)制之一。 第三部分MCMV感染對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞及膠質(zhì)纖維酸性蛋白的影響 目的觀察小鼠巨細(xì)胞病毒感染后對(duì)海馬組織星形膠質(zhì)細(xì)胞膠質(zhì)纖維酸性蛋白表達(dá)的影響，定量分析海馬膠質(zhì)纖維酸性蛋白表達(dá)變化與病毒感染的關(guān)系。方法制造模型方法同前，3個(gè)月后將病毒感染組和對(duì)照組小鼠分別分為2組，分別采用RT-PCR方法及免疫組織化學(xué)方法，測(cè)檢MCMV感染后小鼠海馬星形膠質(zhì)細(xì)胞中膠質(zhì)纖維酸性蛋白GFAP在逆轉(zhuǎn)錄水平及蛋白水平的變化。結(jié)果RT-PCR方法結(jié)果顯示，病毒感染后小鼠海馬GFAPmRNA水平呈上升趨勢(shì)，，GFAP免疫組化結(jié)果顯示，病毒感染后海馬CA1、CA3區(qū)GFAP陽(yáng)性表達(dá)的細(xì)胞數(shù)目增多，胞體肥大，突起增多、增粗，差異有顯著性意義(P＜0.01)。結(jié)論巨細(xì)胞病毒感染可以導(dǎo)致海馬中星形膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)目增多，以及膠質(zhì)纖維酸性蛋白表達(dá)增高，這些改變可能是其導(dǎo)致小鼠學(xué)習(xí)記憶障礙的生物學(xué)機(jī)制之一。
[Abstract]:Establishment and behavioral changes of mouse model infected with MCMV in first part Objective : To establish and observe the ability of cytomegalovirus ( MCMV ) infection in mice to learn memory after being infected by cytomegalovirus ( CMV ) . Methods : Using MCMV strain to infect mouse embryo lung cells ( MEL ) , the infectious titer of virus was measured and the infectious model was established . The results showed that the results of Morris water maze test showed that the learning and memory of mice infected with virus infection were significantly decreased , and there was a significant difference ( P < 0.01 ) . Conclusion : The cytomegalovirus infection can lead to the disorder of nervous system function in mice and decrease the learning and memory ability . Changes of Ca ~ ( 2 + ) / CaM / CaMKII levels and mitochondrial membrane potential and synaptic morphology in brain of second part of MCMV - infected mice Objective : To observe the changes of Ca ~ ( 2 + ) / CaM / CaMKII in hippocampus of mice . The changes of Ca ~ ( 2 + ) / CaM / CaMKII in hippocampus of mice were measured by fluorescence spectrophotometer . Effect of the third part of MCMV infection on the acidic protein of astrocytes and glial fibers Objective To investigate the expression of GFAP in hippocampus of hippocampus after virus infection and to quantitatively analyze the relationship between the expression of GFAP and GFAP in hippocampus after virus infection . The results of RT - PCR showed that the number of GFAP - positive cells in hippocampus CA1 , CA 3 were increased after virus infection .

【學(xué)位授予單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2006
【分類號(hào)】：R373

【參考文獻(xiàn)】

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1 胡鏡清,溫澤淮,賴世隆;Morris水迷宮檢測(cè)的記憶屬性與方法學(xué)初探[J];廣州中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào);2000年02期

2 王文霞,臧衛(wèi)周,徐軍;阻滯星形膠質(zhì)細(xì)胞增生后大鼠行為學(xué)及腦電圖改變的差異性[J];中國(guó)臨床康復(fù);2004年31期

3 王國(guó)卿,封麗芳,夏作理;星形膠質(zhì)細(xì)胞的生物學(xué)功能與神經(jīng)元修復(fù)[J];中國(guó)臨床康復(fù);2005年01期

4 聞良珍,吳圣楣,呂繩敏,王志新,曾萬(wàn)江,錢小虎,敖黎明,劉蘭青,凌霞珍;三城市孕婦人巨細(xì)胞病毒感染及其母嬰傳播的流行病學(xué)調(diào)查[J];中華婦產(chǎn)科雜志;1996年12期

5 熊錦文,陳素華,聞良珍;套式聚合酶鏈反應(yīng)檢測(cè)豚鼠巨細(xì)胞病毒宮內(nèi)感染[J];中華實(shí)驗(yàn)和臨床病毒學(xué)雜志;2004年01期

6 章子貴，陸漢新，李振武，姜建明，吳馥梅;小鼠記憶保持能力與海馬CA3區(qū)突觸界面結(jié)構(gòu)的相關(guān)性[J];神經(jīng)科學(xué);1995年03期

本文編號(hào)：1476516