本文關(guān)鍵詞： 骨髓 間質(zhì)干細(xì)胞 慢病毒屬 受體 CXCR 干細(xì)胞 骨髓干細(xì)胞 慢病毒 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 CXCR 細(xì)胞增殖 免疫調(diào)節(jié)因子 遼寧省自然科學(xué)基金　出處：《中國組織工程研究》2014年41期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：背景:間充質(zhì)干細(xì)胞在體內(nèi)歸巢主要調(diào)控因子是CXCR4,如何提高干細(xì)胞自身CXCR4的表達(dá)量是調(diào)節(jié)干細(xì)胞體內(nèi)靶器官歸巢能力的關(guān)鍵。目的:構(gòu)建CXCR4或GFP基因慢病毒表達(dá)載體,并觀察其對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞自身生長特性及分泌功能的影響。方法:骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞應(yīng)用慢病毒載體轉(zhuǎn)染系統(tǒng)轉(zhuǎn)染CXCR4基因達(dá)到過表達(dá),同時單獨轉(zhuǎn)GFP基因作為對照。通過熒光顯微鏡、RT-PCR、免疫蛋白印跡方法驗證病毒轉(zhuǎn)染效率;流式細(xì)胞技術(shù)測定骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的增殖、凋亡情況;Western Blot法測定間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基上清中分泌蛋白及細(xì)胞因子變化。結(jié)果與結(jié)論:慢病毒轉(zhuǎn)染系統(tǒng)可以安全、有效地轉(zhuǎn)染CXCR4基因或GFP基因到骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞。流式細(xì)胞儀檢測顯示過表達(dá)CXCR4的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖能力、生存能力加強(qiáng),凋亡細(xì)胞減少(P0.05);細(xì)胞上清蛋白分析提示過表達(dá)CXCR4后,骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)上清內(nèi)出現(xiàn)很多的蛋白因子升高(P0.05),其中大多數(shù)對細(xì)胞自身復(fù)制及免疫調(diào)節(jié)有益。結(jié)果表明慢病毒轉(zhuǎn)染是一種安全高效的基因修飾手段,可以通過CXCR4基因修飾的方法提高骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的生存能力、降低凋亡率,調(diào)節(jié)細(xì)胞保護(hù)性因子及免疫調(diào)節(jié)因子的分泌功能。
[Abstract]:Background: the main regulatory factor for homing of mesenchymal stem cells in vivo is CXCR4. How to improve the expression of stem cells CXCR4 is the key to regulate the homing ability of target organs in stem cells. Objective: to construct the lentivirus expression vector of CXCR4 or GFP gene. Methods: bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) were transfected with lentivirus vector transfection system to achieve overexpression of CXCR4 gene. At the same time, the GFP gene was transferred alone as control. The transfection efficiency was verified by fluorescence microscope and Western blot. The proliferation and apoptosis of bone marrow mesenchymal stem cells were measured by flow cytometry. The secretory protein and cytokines in the supernatant of mesenchymal stem cell medium were determined by Western Blot. Results & conclusion: lentivirus transfection system is safe. CXCR4 gene or GFP gene was effectively transfected into bone marrow mesenchymal stem cells. Flow cytometry showed the proliferation ability and survival ability of bone marrow mesenchymal stem cells expressing CXCR4. Apoptotic cells decreased P0.05A; The analysis of superalbumin showed that after overexpression of CXCR4, there were a lot of protein factors in the supernatant of bone marrow mesenchymal stem cells (P0.05). The results showed that lentivirus transfection was a safe and efficient method for gene modification. CXCR4 gene modification can improve the viability of bone marrow mesenchymal stem cells, reduce apoptosis rate and regulate the secretion of protective and immunomodulatory factors.
【作者單位】： 解放軍沈陽軍區(qū)總醫(yī)院泌尿男科;
【基金】：遼寧省自然科學(xué)基金項目(2013020199)~~
【分類號】：R329.2
【正文快照】： 文章亮點:1細(xì)胞上清分泌蛋白是干細(xì)胞在體內(nèi)修復(fù)組織損傷、調(diào)節(jié)免疫功能的主要手段。研究提示轉(zhuǎn)染CXCR4的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞可以分泌更多的免疫調(diào)節(jié)蛋白,對治療免疫性疾病有重要意義。2轉(zhuǎn)染CXCR4的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞凋亡率下降、細(xì)胞多處于增殖期,提示過表達(dá)CXCR4的間充質(zhì)干細(xì)胞

【參考文獻(xiàn)】

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3 宗阿南;鄭志紅;史曉萍;王祿增;尚昌連;;探討《關(guān)于善待實驗動物的指導(dǎo)性意見》飼育、應(yīng)用、運輸及相關(guān)方面的措施[J];實驗動物科學(xué);2008年02期

4 Song Pan;Jingzhi Wan;Shaosheng Liu;Song Zhang;Hao Xiong;Jun Zhou;Wu Xiong;Kunfei Yu;Yong Fu;;Lentivirus carrying the Atoh1 gene infects normal rat cochlea[J];Neural Regeneration Research;2013年17期

5 ;Construction of a recombinant lentivirus containing human microRNA-7-3 and its inhibitory effects on glioma proliferation[J];Neural Regeneration Research;2012年27期

6 徐鵬;葛海燕;;TGF-α對人脂肪來源干細(xì)胞Survivin蛋白的影響[J];同濟(jì)大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2013年01期

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9 芮曉暉,蔡端,張群華,孫鵬,石偉,張延齡;T NFα-和IL-10在非協(xié)調(diào)性異種肝移植中的作用探討[J];中華肝膽外科雜志;2002年11期

10 薛武軍，李旭，，郭奇，陳勇，邢俊平，田普訓(xùn)，潘曉鳴，何曉麗;監(jiān)測腎移植術(shù)后IL－2和sIL－2R的變化及其意義[J];中華泌尿外科雜志;1995年03期

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7 仲明遠(yuǎn);白介素-2受體監(jiān)測在腎移植術(shù)后的作用[J];華南國防醫(yī)學(xué)雜志;2001年02期

8 魯波,蘇澤軒,章詠裳;FK506對大鼠同種皮膚移植的免疫抑制作用[J];暨南大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)與醫(yī)學(xué)版);1997年04期

9 趙新利;王艷;張彩霞;譚軍;;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞治療在腦卒中的研究[J];環(huán)球中醫(yī)藥;2013年S2期

10 閻紅娥;王帥;鮑文華;孫云暉;王春玲;劉生生;李爽;;基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1和微血管密度在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)[J];黑龍江醫(yī)藥科學(xué);2014年01期

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4 羅智博;同種異體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞穴位注射零天與七天治療急性心肌梗死兔的對比研究[D];遼寧中醫(yī)藥大學(xué);2009年

5 陳廣順;穩(wěn)定表達(dá)Foxp3的間充質(zhì)干細(xì)胞對大鼠移植肝免疫保護(hù)作用的研究[D];中南大學(xué);2013年

6 梁成振;荷載干細(xì)胞的TGF-β3/地塞米松/PLGA微球用于退變椎間盤的研究[D];浙江大學(xué);2013年

7 顧炎;腫瘤馴化的B淋巴細(xì)胞通過分泌病理性抗體促進(jìn)乳腺癌轉(zhuǎn)移及其相關(guān)機(jī)制研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2013年

8 覃海泉;選擇性門靜脈分支結(jié)扎對大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向肝臟歸巢的影響及機(jī)制研究[D];武漢大學(xué);2013年

9 楊會營;脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞對乳腺癌細(xì)胞輻射抵抗的影響[D];南方醫(yī)科大學(xué);2014年

10 龔自力;超聲微泡促進(jìn)骨髓間質(zhì)細(xì)胞跨血腦屏障遷移的實驗研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2014年

【二級參考文獻(xiàn)】

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1 劉江;徐全;陳艱;;G-CSF干預(yù)性治療對大鼠急性心肌梗死區(qū)毛細(xì)血管形成的影響[J];江西醫(yī)藥;2006年08期

2 趙英杰;李照建;王任直;魏俊吉;李桂林;趙浩;;rAAV1載體介導(dǎo)外源性VEGF-165和Angiopoietin-1基因治療大鼠腦缺血的療效評價及其機(jī)制研究[J];科技導(dǎo)報;2009年21期

3 吳鐵軍,湯服民;骨髓間質(zhì)干細(xì)胞移植治療心肌梗死研究進(jìn)展[J];實用醫(yī)藥雜志;2005年09期

4 畢樹雄,戴\戎,湯亭亭;IL-4與IL-10聯(lián)合誘導(dǎo)異種骨移植免疫耐受的體外研究[J];實用骨科雜志;2004年04期

5 ;Bone marrow mesenchymal stem cell transplantation for treatment of spinal cord injury An in vivo magnetic resonance imaging tracking study[J];Neural Regeneration Research;2011年13期

6 徐延軍;胡吟燕;翟所強(qiáng);孫建和;徐金操;候昭暉;申衛(wèi)東;于寧;楊仕明;韓東一;;耳后入路圓窗膜顯微注射小鼠耳蝸基因轉(zhuǎn)染新途徑的研究[J];聽力學(xué)及言語疾病雜志;2009年03期

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9 崔曉;胡永善;吳毅;徐麗麗;葉文成;白玉龍;鄭慶平;曾慧玲;朱大年;;電針對腦缺血大鼠血管生成素及其受體表達(dá)的影響[J];中國康復(fù)醫(yī)學(xué)雜志;2007年10期

10 陳偉;楊仕明;郭維;胡吟燕;孫建和;韓東一;翟所強(qiáng);楊偉炎;何志洲;;腺病毒攜帶EGFP基因經(jīng)完整圓窗膜轉(zhuǎn)導(dǎo)豚鼠耳蝸的實驗研究[J];中華耳科學(xué)雜志;2007年02期

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4 胡昔權(quán);;運動訓(xùn)練對腦梗死大鼠室管膜下區(qū)神經(jīng)新生及SDF-1α/CXCR4影響的研究[A];中國康復(fù)醫(yī)學(xué)會第十三屆全國腦血管病康復(fù)學(xué)術(shù)會議會議指南[C];2010年

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6 羅濤;蔡琳;周欣;劉紅梅;李玉明;;G-CSF中介的CXCR4和非CXCR4途徑在心肌梗死后心律失常發(fā)生中的作用[A];中華醫(yī)學(xué)會心電生理和起搏分會第八次全國學(xué)術(shù)年會論文集[C];2008年

7 楊勤;張亞聲;;復(fù)方苦參注射液聯(lián)合5-氟尿嘧啶節(jié)律化療對人胃癌裸鼠移植瘤VEGF、CXCR4和SDF-1的影響[A];中華中醫(yī)藥學(xué)會脾胃病分會第二十三次全國脾胃病學(xué)術(shù)交流會論文匯編[C];2011年

8 潘貽飛;李權(quán);盧山珊;郭貴龍;;直腸癌中HER-2、VEGF與CXCR4的表達(dá)及相關(guān)性[A];2007年浙江省腫瘤外科學(xué)術(shù)年會暨溫州醫(yī)學(xué)會腫瘤分會第四屆年會論文匯編[C];2007年

9 陳愉生;黃麗萍;李鴻茹;王貴清;苗彥;林明;許能鑾;;SDF-1,CXCR4在肺癌組織中的表達(dá)及其與凋亡抑制蛋白基因livin的相關(guān)性初步探討[A];中華醫(yī)學(xué)會呼吸病學(xué)年會——2013第十四次全國呼吸病學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2013年

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3 劉紅梅;G-CSF介導(dǎo)的“CXCR4效應(yīng)”和“非CXCR4效應(yīng)”在心肌梗死后組織修復(fù)中的作用[D];天津醫(yī)科大學(xué);2009年

4 王勤;CXCR4結(jié)合多肽標(biāo)記超微超順磁性納米氧化鐵顆粒在裸鼠胰腺癌模型中的在體磁共振成像研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2013年

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5 張悅;CXCR4基因修飾骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外遷移實驗[D];天津科技大學(xué);2008年

6 王梁;CXCR4在腎癌轉(zhuǎn)移中的作用及其機(jī)制的初步研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2007年

7 劉永軍;CXCR4基因在胃癌中的表達(dá)及其意義[D];中國醫(yī)科大學(xué);2005年

8 劉玉圣;不同轉(zhuǎn)移潛能人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系趨化因子受體CXCR4的表達(dá)及對瘤細(xì)胞趨化作用影響的研究[D];青島大學(xué);2011年

9 劉智榮;CXCR4、FoxM1在胃癌中的表達(dá)及其臨床意義的研究[D];蚌埠醫(yī)學(xué)院;2011年

10 熊斌;趨化因子受體CXCR4和CCR7在甲狀腺癌中的表達(dá)和臨床病理意義[D];川北醫(yī)學(xué)院;2011年

本文編號：1476432