發(fā)布時(shí)間：2018-01-30 11:13

  本文關(guān)鍵詞： 麻疹病毒 血凝素蛋白 融和蛋白 受體 SLAM 免疫共沉淀 pull-down激光共聚焦 co-capping 流式細(xì)胞計(jì)數(shù)術(shù) 噬菌體展示系統(tǒng)　出處：《武漢大學(xué)》2005年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：麻疹病毒血凝素蛋白(Hemagglutinin protein,H)是介導(dǎo)麻疹病毒吸附、侵入宿主細(xì)胞的關(guān)鍵分子。CD46是被鑒定的麻疹病毒的第一個(gè)受體。人細(xì)胞表面的SLAM(signaling lymphocytic activation molecule)分子是2000年鑒定的麻疹病毒的第二受體。2001年,本室李凌云博士從絨猴B95a細(xì)胞cDNA文庫(kù)中發(fā)現(xiàn)了與SLAM高度同源的蛋白BIP,并且驗(yàn)證了它也能作為麻疹病毒的受體,我們稱為mSLAM。為了進(jìn)一步研究麻疹病毒第二受體SLAM(或mSLAM)在麻疹病毒侵染宿主過(guò)程中的作用,我們著重分析了麻疹病毒兩種糖蛋白H蛋白,F蛋白和SLAM的相互作用。在本文研究結(jié)果和前人研究的基礎(chǔ)上,為闡明麻疹病毒的侵染機(jī)制,提出了麻疹病毒H蛋白和F蛋白與SLAM受體之間形成三聚體模型。 首先我們利用免疫共沉淀方法在體內(nèi)證實(shí)了麻疹病毒的兩種糖蛋白H和F與細(xì)胞表面受體SLAM之間的相互作用。然后利用pull-down進(jìn)一步證實(shí)了三種蛋白在體外的相互結(jié)合,確定了三種蛋白之間相互作用并形成三聚體的蛋白復(fù)合物。通過(guò)轉(zhuǎn)染HeLa細(xì)胞在細(xì)胞形態(tài)學(xué)上對(duì)麻疹病毒的血凝集素蛋白H和融合蛋白F的功能進(jìn)行了研究。發(fā)現(xiàn)麻疹病毒的侵染融合必須在三種蛋白的共同作用下才能順利進(jìn)行。同時(shí),利用激光共聚焦的方法,發(fā)現(xiàn)了這兩種糖蛋白在SLAM的介導(dǎo)下,在細(xì)胞膜上的分布發(fā)生變化形成co-cap現(xiàn)象。從而確認(rèn)了三者在細(xì)胞內(nèi)部通過(guò)其共同形成的三聚體發(fā)揮功能。
[Abstract]:Measles virus hemagglutinin protein (HH) mediates measles virus adsorption. CD46, the key molecule that invades host cells, is the first receptor of the identified measles virus. Signaling lymphocytic activation molecule is the second receptor of measles virus identified in 2000. 2001. Dr Li Lingyun identified a highly homologous SLAM protein from the rhesus monkey B95a cell cDNA library and confirmed that it can also act as a receptor for measles virus. We call mSLAM.To further study the role of SLAM (or mSLAM), the second receptor of measles virus, in the process of measles virus infecting the host. The interaction between two glycoprotein H protein F protein and SLAM of measles virus was analyzed. Based on the results of this study and previous studies, the infection mechanism of measles virus was elucidated. A trimer model between H protein and F protein of measles virus and SLAM receptor was proposed. The interaction between the two glycoproteins H and F of measles virus and the cell surface receptor SLAM was confirmed by immunoprecipitation in vivo. Then, the interaction between H and F of measles virus and the cell surface receptor SLAM was further confirmed by pull-down. The interaction of three proteins in vitro. The interaction of three proteins and the formation of trimer protein complex were identified. The functions of hemagglutinin protein H and fusion protein F of measles virus were studied by transfection of HeLa cells in cell morphology. It was found that the infection and fusion of measles virus must be carried out successfully under the combined action of three proteins. Using laser confocal method, we found that these two glycoproteins were mediated by SLAM. The distribution on the cell membrane changed to form the co-cap phenomenon, which confirmed the function of the three trimers in the cell.
【學(xué)位授予單位】：武漢大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2005
【分類號(hào)】：R373

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1476103