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人工體神經(jīng)—內(nèi)臟神經(jīng)吻合后再生神經(jīng)的示蹤研究

發(fā)布時(shí)間:2018-01-29 14:08

  本文關(guān)鍵詞: 體神經(jīng) 內(nèi)臟神經(jīng) 神經(jīng)示蹤 再生 DiI 體神經(jīng) 內(nèi)臟神經(jīng) DiI 動態(tài)觀察 出處:《鄭州大學(xué)》2007年碩士論文 論文類型:學(xué)位論文


【摘要】: 各種原因所引起的脊髓損傷(Spinal Cord Injury,SCI)是棘手的社會和醫(yī)學(xué)難題,除此之外,脊柱裂(Spina Bifida,SB)又是最常見的出生缺陷之一。國家“七五”重點(diǎn)科技攻關(guān)課題全國神經(jīng)管缺陷的流行病學(xué)資料顯示,我國開放性脊柱裂發(fā)生率為8.5/萬活產(chǎn)兒,,美國每1000例新生兒發(fā)生約1例,每年發(fā)生大約4 000例。80%~85%的脊柱裂患兒發(fā)生腰骶部脊髓脊膜膨出,多表現(xiàn)為不同程度的下肢神經(jīng)癥狀及大小便失禁。大小便功能障礙不僅影響生活質(zhì)量,而且引起泌尿系感染和腎功能衰竭是患兒主要的致死因素。脊髓損傷引起的神經(jīng)源性膀胱,是截癱患者常見的死亡原因。有資料表明,在美國有超過50萬的截癱患者需要進(jìn)行膀胱功能重建,并且這一數(shù)字還在以每年5萬的速度不斷增加。 目前臨床治療措施有藥物調(diào)節(jié)膀胱逼尿肌和尿道括約肌舒縮、間歇清潔導(dǎo)尿、尿道括約肌切開、電刺激排尿等等,這些治療無法實(shí)現(xiàn)膀胱的自主儲尿和排尿功能;骶神經(jīng)前根電刺激曾被認(rèn)為能應(yīng)用于臨床的可使膀胱主動排空尿液的惟一的治療方法,但也存在著價(jià)格昂貴、療效不穩(wěn)定、體內(nèi)存在異物、可能損傷患者部分仍然正常的感覺功能和性功能、遠(yuǎn)期效果下降等問題。 肖傳國教授在1990年提出設(shè)想:利用脊髓損傷平面以下的廢用神經(jīng)建立人工體神經(jīng)—內(nèi)臟神經(jīng)反射弧,形成一種新的經(jīng)體表皮膚控制的神經(jīng)反射通路以實(shí)現(xiàn)膀胱的可控性排尿,并于1995年應(yīng)用于臨床截癱所致的大小便功能障礙并取的滿意療效,2000起應(yīng)用該理論和技術(shù)治療脊柱裂所致的大小便失禁又獲得成功。人工體神經(jīng)—內(nèi)臟神經(jīng)反射弧為治療神經(jīng)源性膀胱開辟了新的道路,多項(xiàng)研究已基本闡明了人工體神經(jīng)—內(nèi)臟神經(jīng)反射弧的作用機(jī)制,但新生的“異類神經(jīng) 元”的軸突在通過吻合口并沿著既往內(nèi)臟神經(jīng)路徑向盆神經(jīng)節(jié)生長的過程,目前還缺乏足夠的形態(tài)學(xué)依據(jù),本研究旨在研究術(shù)后大鼠的“異類神經(jīng)元”的軸突是否通過吻合口向盆神經(jīng)節(jié)繼續(xù)生長提供形態(tài)學(xué)依據(jù),從而進(jìn)一步闡述了人工體神經(jīng)—內(nèi)臟神經(jīng)反射弧理論基礎(chǔ)。 試驗(yàn)一體神經(jīng)—內(nèi)臟神經(jīng)吻合后吻合口的形態(tài)學(xué)觀察 目的:觀察大鼠體神經(jīng)—內(nèi)臟神經(jīng)吻合后再生神經(jīng)纖維是否通過吻合口。 方法:將SD雄性大鼠行人工體神經(jīng)—內(nèi)臟神經(jīng)反射弧手術(shù),6個(gè)月后,應(yīng)用神經(jīng)順行追蹤的方法,于脊髓L4節(jié)段左側(cè)前角注射DiI-DMSO溶液(濃度為5%),14天后取材L3-L5脊髓節(jié)段,吻合口神經(jīng)一段,行冰凍切片,脊髓行橫行切片,吻合口神經(jīng)行縱行切片,在光學(xué)顯微鏡及熒光顯微鏡下觀察結(jié)果。 結(jié)果:在脊髓L4節(jié)段左側(cè)前角注射DiI-DMSO溶液,光學(xué)顯微鏡下見吻合口部位稍許膨大,與周圍其他神經(jīng)無粘連,吻合口近段神經(jīng)比遠(yuǎn)段稍粗,神經(jīng)纖維分布規(guī)律。熒光顯微鏡下觀察可見吻合口縱行切片上亮度不一的點(diǎn)狀或成簇的橘紅色熒光,高倍鏡下可見點(diǎn)狀熒光顆粒成束排列,推測為含有示蹤劑的成束軸突。 結(jié)論:人工體神經(jīng)—內(nèi)臟神經(jīng)吻合后,再生的神經(jīng)纖維可以通過吻合口并沿著既往內(nèi)臟神經(jīng)的路徑繼續(xù)生長。 試驗(yàn)二人工反射弧建立后DiI通過吻合口的動態(tài)觀察 目的:對大鼠體神經(jīng)—內(nèi)臟神經(jīng)吻合術(shù)后再生神經(jīng)纖維通過吻合口進(jìn)行進(jìn)一步驗(yàn)證。 方法:SD雄性大鼠行人工體神經(jīng)—內(nèi)臟神經(jīng)反射弧手術(shù),4個(gè)月后,模型鼠用4%多聚甲醛灌注固定,取吻合口神經(jīng)一段,用帶有微玻管的微量注射器在吻合口神經(jīng)的近端,距離吻合口約2mm處注射示蹤劑DiI,之后分別在5、10、15、20天時(shí)在熒光顯微鏡下對同一張切片進(jìn)行觀察。 結(jié)果:注射示蹤劑DiI后5天,熒光顯微鏡下可見明亮的橘紅色熒光呈束狀由 注射部位發(fā)出,10天后束狀熒光顆粒繼續(xù)向吻合口延伸,15天和20天分別觀察到熒光顆粒到達(dá)和通過吻合口。 結(jié)論:人工體神經(jīng)—內(nèi)臟神經(jīng)吻合術(shù)后,由DiI標(biāo)記的新生的神經(jīng)纖維可以通過吻合口并沿著人工搭建的管橋繼續(xù)生長。
[Abstract]:Spinal cord injury caused by various reasons (Spinal Cord, Injury, SCI) is a difficult social and medical problems, in addition, spina bifida (Spina Bifida SB) is one of the most common birth defects. The "75" national key scientific and technological issues the neural tube defects of epidemiological data show that I in the open spina bifida incidence rate of 8.5/ million live births, about 1 cases per 1000 infants in America, each year about 4000 cases of.80% to 85% children with spina bifida in lumbosacral myelomeningocele, showed neurological symptoms and the size of the lowerlimb incontinence defecationdysfunction not only affect the life. The quality, but also cause urinary tract infections and renal failure. The main cause of children with neurogenic bladder caused by spinal cord injury is a common cause of death in patients with paraplegia. Data show that in the United States with over 500 thousand The paraplegic patients need to reconstruct the bladder function, and this number is still increasing at a rate of 5 million a year.
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本文編號:1473592

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