本文關(guān)鍵詞： 狂犬病疫苗 DNA 非限制性核酸內(nèi)切酶 層析　出處：《中國生物制品學(xué)雜志》2014年04期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的評價非限制性核酸內(nèi)切酶對狂犬病疫苗中Vero細(xì)胞DNA的去除效果。方法將不同終濃度的Benzonase非限制性核酸內(nèi)切酶加入狂犬病病毒收獲液中,在PBS或Tris兩種緩沖體系下,以不同溫度酶解不同時間,經(jīng)分子篩層析純化后,采用羅氏Ⅱ型高效地高辛DNA標(biāo)記和檢測試劑盒檢測狂犬病病毒收獲液中DNA的殘留量,用確定的酶處理條件,采用酶檢測試劑盒檢測狂犬病病毒收獲液中非限制性核酸內(nèi)切酶的殘留量,采用ELASA法檢測抗原含量。結(jié)果非限制性核酸內(nèi)切酶的處理濃度為50~90 U/ml,緩沖體系為PBS或Tris,經(jīng)37℃處理2~3 h,轉(zhuǎn)入18~26℃處理12~18 h酶解,再經(jīng)分子篩層析純化后,狂犬病病毒收獲液中的Vero細(xì)胞DNA去除率在80%以上,病毒抗原回收率在75%以上;用確定的酶處理條件處理狂犬病病毒收獲液,可使狂犬病病毒與Benzonase非限制性核酸內(nèi)切酶完全分離。結(jié)論采用非限制性核酸內(nèi)切酶可有效去除狂犬病疫苗中Vero細(xì)胞殘留DNA。
[Abstract]:Objective to evaluate the effect of non-restriction endonuclease on DNA removal of Vero cells from rabies vaccine. Methods different final concentrations of Benzonase non-restriction endonuclease were added to rabies virus collection. In the liquid. In the buffer system of PBS or Tris, the enzyme was hydrolyzed at different temperature and at different time, and purified by molecular sieve chromatography. The residue of DNA in rabies virus harvest solution was detected by DNA labeling and detection kit of Roche 鈪，

本文編號：1449634