發(fā)布時間：2018-01-21 00:01

  本文關(guān)鍵詞： 泡沫細(xì)胞 血管平滑肌細(xì)胞 Toll樣受體 三磷酸腺苷-結(jié)合盒轉(zhuǎn)運子A　出處：《第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報》2014年07期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的探討Toll樣受體4(Toll-like receptor 4,TLR4)促進平滑肌源性泡沫細(xì)胞的形成是否與三磷酸腺苷-結(jié)合盒轉(zhuǎn)運子A1(ATP-binding cassette transporter,ABCA1)表達(dá)異常相關(guān)。方法組織貼塊法培養(yǎng)原代血管平滑肌細(xì)胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs);細(xì)胞分為野生型(Wild type)空白對照組、Wild type氧化低密度脂蛋白(oxLDL)組、TLR4敲除(TLR4-/-)空白對照組和TLR4-/-oxLDL組;油紅O染色觀察VSMCs內(nèi)脂質(zhì)聚集,并用異丙醇萃取油紅O測定光密度值;RT-qPCR、Western blot檢測VSMCs中TLR4、ABCA1、IL-1β及TNF-αmRNA和蛋白表達(dá)水平;細(xì)胞免疫熒光染色鑒定原代VSMCs及觀察核轉(zhuǎn)錄因子-kappa B(NF-κB)核轉(zhuǎn)位。結(jié)果①Wild type oxLDL組中見細(xì)胞內(nèi)大量脂滴形成,油紅O光密度值為Wild type空白對照組的2.3倍(P0.01);TLR4-/-oxLDL組中只見少許脂質(zhì)沉積于細(xì)胞內(nèi),油紅O光密度值與TLR4-/-空白對照組相比無明顯變化(P0.05)。②Wild type oxLDL組ABCA1 mRNA及蛋白表達(dá)水平較Wild type空白對照組分別下降61%(P0.05),44%(P0.01);TLR4-/-oxLDL組ABCA1 mRNA及蛋白表達(dá)水平分別為TLR4-/-空白對照組的2.3倍(P0.05),1.7倍(P0.05)。③Wild type oxLDL組VSMCs中NF-κB核轉(zhuǎn)位明顯增多,IL-1β和TNF-αmRNA表達(dá)較Wild type空白對照組分別升高3.9倍(P0.05),1.7倍(P0.05);TLR4-/-oxLDL組VSMCs中無明顯NF-κB核轉(zhuǎn)位,僅IL-1βmRNA表達(dá)較TLR4-/-空白對照組升高1.2倍(P0.05)。結(jié)論 TLR4及其調(diào)節(jié)的炎性反應(yīng)參與平滑肌源性泡沫細(xì)胞形成過程中ABCA1表達(dá)異常。
[Abstract]:Objective to investigate Toll-like receptor 4 (Toll-like receptor 4) of Toll like receptors. TLR4) promotes the formation of smooth muscle derived foam cells and ATP-binding cassette transporter with adenosine triphosphate binding cassette transporter A1. Methods the primary vascular smooth muscle cells were cultured by tissue patch method. The cells were divided into wild type (wild type) control group and wild type oxidized low density lipoprotein (LDL) group. TLR4 knockout TLR4 / -) blank control group and TLR4-/-oxLDL group; Oil red O staining was used to observe the accumulation of lipid in VSMCs and the optical density was determined by isopropanol extraction. The expression levels of IL-1 尾, TNF- 偽 mRNA and protein in VSMCs were detected by RT-qPCRG Western blot. Identification of Primary VSMCs by Cellular Immunofluorescence staining and observation of Nuclear transcription Factor -kappa Bon NF- 魏 B. Results 1 A large number of lipid droplets were found in the wild type oxLDL group. The optical density of oil red O was 2.3 times that of Wild type control group (P 0.01). In TLR4-/-oxLDL group, a little lipid was deposited in the cells. The optical density of oil red O was not significantly different from that of TLR4-r-blank control group (P0.05). 2 the expression of ABCA1 mRNA and protein in wild type oxLDL group decreased 61% and P 0.05 respectively compared with Wild type control group. P0.01C; The expression level of ABCA1 mRNA and protein in TLR4-/-oxLDL group was 2.3-fold of that in control group (P 0.05). The nuclear translocation of NF- 魏 B in VSMCs was significantly increased in the group of 1.7-fold P0.05N. 3 Wild type oxLDL. The expression of IL-1 尾 and TNF- 偽 mRNA was 3.9-fold higher than that of Wild type control group. No significant nuclear translocation of NF- 魏 B was observed in VSMCs of TLR4-/-oxLDL group. The expression of IL-1 尾 mRNA was only 1.2-fold higher than that of TLR4-r-blank control group (P0.05). Conclusion TLR4 and its inflammatory response are involved in the abnormal expression of ABCA1 in the formation of smooth muscle derived foam cells.
【作者單位】： 第三軍醫(yī)大學(xué)大坪醫(yī)院野戰(zhàn)外科研究所神經(jīng)內(nèi)科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金面上項目(81271282) 重慶市杰出青年科學(xué)基金(CSTC2012JJJQ10003)~~
【分類號】：R329.2
【正文快照】： 泡沫細(xì)胞聚集是動脈粥樣硬化最主要的特征,在中晚期動脈粥樣硬化病變中,巨噬細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞約占30%,而平滑肌細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞高達(dá)45%[1]。巨噬細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞形成機制已有大量研究,而平滑肌細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞形成機制的研究卻很少。研究證實,在動脈粥樣硬化斑塊中,Toll樣

【共引文獻(xiàn)】

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