本文關鍵詞： 松果體 褪黑素 大鼠 室旁核 CRH神經(jīng)元 正中隆起 原位雜交 免疫組織化學 ELISA　出處：《福建醫(yī)科大學》2005年碩士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：目的: 研究松果體及其褪黑素對大鼠下丘腦室旁核CRH 神經(jīng)元形態(tài)和功能的影響以及補充褪黑素的作用,豐富松果體及褪黑素對下丘腦——垂體——腎上腺軸影響的形態(tài)及功能方面的研究,為進一步揭示松果體及褪黑素對免疫功能以及免疫相關性疾病如腫瘤、自身免疫性疾病等的影響機制提供理論依據(jù)。 方法: ①運用CRHmRNA 原位雜交的方法來觀察松果體摘除及補充外源性褪黑素后下丘腦室旁核CRHmRNA 陽性細胞的變化;②應用免疫組織化學染色的方法觀察松果體摘除及補充外源性褪黑素后下丘腦室旁核CRH 陽性細胞和神經(jīng)垂體正中隆起CRH 陽性染色的變化;③運用ELISA 法檢測松果體摘除及補充褪黑素后血清CRH 濃度的變化。 結果: ①松果體摘除后大鼠下丘腦室旁核CRH 原位雜交和免疫組化的結果與假手術對照組相比均顯示陽性細胞數(shù)增多、陽性面積增加、平均灰度降低,提示松果體摘除后下丘腦CRH 神經(jīng)元的表達增強;②松果體摘除大鼠補充褪黑素后,下丘腦CRH 原位雜交和免疫組化染色增強呈劑量依賴性恢復,不過不論是低劑量組還是高劑量組,也不論是術后4 周還是術后8 周,均不能恢復至正常;③松果體摘除后神經(jīng)垂體正中隆起CRH 免疫組化結果顯示陽性面積增加、平均灰度降低,提示下丘腦CRH 神經(jīng)元釋放CRH 增加;④ELISA 法檢測血清CRH結果示各組血清CRH 濃度差異沒有顯著性,表明松果體摘除及補充褪黑素對血清CRH 水平?jīng)]有顯著影響。 結論: 松果體摘除導致大鼠下丘腦室旁核CRH 神經(jīng)元合成和釋放CRH 增加,并通過垂體門脈系統(tǒng)激活整條HPA 軸,而補充外源性褪黑素后能在一定程度上逆轉(zhuǎn)上述異常,表明松果體是神經(jīng)——內(nèi)分泌——免疫網(wǎng)絡的結構和功能的重要穩(wěn)定因素之一。
[Abstract]:Objective: to study the effects of pineal body and melatonin on the morphology and function of CRH neurons in hypothalamic paraventricular nucleus (PVN) of rats and the effects of melatonin supplementation. Studies on the morphology and function of pineal and melatonin on hypothalamus-pituitary-adrenal axis, in order to further reveal the immune function of pineal and melatonin and immune-related diseases such as tumors. The influence mechanism of autoimmune disease and so on provides the theoretical basis. Methods: 1the changes of CRHmRNA positive cells in hypothalamic paraventricular nucleus after pinealectomy and exogenous melatonin supplementation were observed by CRHmRNA in situ hybridization. 2Immunohistochemical staining was used to observe the changes of CRH positive cells and CRH positive staining in the paraventricular nucleus of hypothalamus after pinealectomy and supplementation of exogenous melatonin. 3 the changes of serum CRH levels after pinealectomy and melatonin supplementation were detected by ELISA method. Results: 1 the results of CRH in situ hybridization and immunohistochemistry in the paraventricular nucleus of hypothalamus after pinealectomy showed that the number of positive cells increased, the positive area increased and the average gray level decreased compared with the sham-operated control group. The results suggested that the expression of CRH neurons in hypothalamus was increased after pinealectomy. 2After the pinealectomy rats were supplemented with melatonin, the enhancement of CRH in situ hybridization and immunohistochemical staining in hypothalamus recovered in a dose-dependent manner, but both in low dose group and high dose group. No matter 4 weeks or 8 weeks after operation, they could not return to normal. 3After pinealectomy, the CRH immunohistochemical results of neurohypophyseal median eminence showed that the positive area increased and the average gray level decreased, suggesting that the CRH release from CRH neurons in the hypothalamus increased. The results of Elisa showed that there was no significant difference in serum CRH concentration among the three groups, indicating that pinealectomy and melatonin supplementation had no significant effect on serum CRH level. Conclusion: pinealectomy can increase the synthesis and release of CRH from CRH neurons in the paraventricular nucleus of hypothalamus and activate the whole HPA axis through the pituitary portal system. These abnormalities can be reversed to a certain extent by supplementation of exogenous melatonin, which indicates that the pineal gland is one of the important stable factors in the structure and function of neuro-endocrine immune network.
【學位授予單位】：福建醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2005
【分類號】：R33

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