hFLVCR對(duì)紅系造血調(diào)控的研究
本文關(guān)鍵詞:hFLVCR對(duì)紅系造血調(diào)控的研究 出處:《四川大學(xué)》2006年博士論文 論文類型:學(xué)位論文
更多相關(guān)文章: 人類貓白血病C亞類病毒受體 紅系造血 血紅素 反義寡核苷酸
【摘要】:人類貓白血病C亞類病毒受體(Human Feline Leukemia Virus Receptor,hFLVCR)廣泛表達(dá)于CD34+造血干/祖細(xì)胞、血液細(xì)胞及其他人類組織和細(xì)胞系(如K562等)。最新研究發(fā)現(xiàn)hFLVCR有輸出血紅素(heme)的重要功能,從而可能在紅系的早期分化過程中起重要作用,因此引起人們的關(guān)注。目前hFLVCR對(duì)于紅系造血的作用和機(jī)制尚未完全闡明。有關(guān)FLVCR的功能和病理生理意義的研究在國(guó)外尚處于起步階段,國(guó)內(nèi)更無報(bào)道,故這是一個(gè)有待深入探討的領(lǐng)域。 目的:1.體外動(dòng)態(tài)觀察氯高鐵血紅素(Hemin,Hm)誘導(dǎo)K562細(xì)胞向紅系分化過程中hFLVCR的蛋白和mRNA的表達(dá),以明確hFLVCR與紅系造血之間的關(guān)系。2.將hFLVCR反義寡核苷酸轉(zhuǎn)染K562細(xì)胞,封閉的含量及K562細(xì)胞的凋亡狀況,旨在探討hFLVCR對(duì)紅系造血的影響hFLVCR的功能。通過細(xì)胞化學(xué)染色、免疫組化和流式細(xì)胞術(shù)等,觀察K562細(xì)胞向紅系分化情況、細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)過氧化終產(chǎn)物丙二醛(MDA)和機(jī)制。 方法:1.用MTT法觀察誘導(dǎo)劑Hm對(duì)K562細(xì)胞增殖的影響。2.采用流式細(xì)胞術(shù)和實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù),動(dòng)態(tài)觀察氯高鐵血紅素誘導(dǎo)K562細(xì)胞向紅系分化過程中hFLVCR的蛋白和mRNA的表達(dá)。3..用免疫組化法觀察轉(zhuǎn)染hFLVCR反義寡核苷酸,,阻斷hFLVCR的表達(dá)后,K562
[Abstract]:Human Feline Leukemia Virus ReceptorhFLVCRs are widely expressed in CD34 hematopoietic stem / progenitor cells. Blood cells and other human tissues and cell lines (such as K562 et al.) have been found to have important functions in the production of heme by hFLVCR. This may play an important role in the early differentiation of erythroid. At present, the role and mechanism of hFLVCR in erythropoiesis have not been fully elucidated. The study on the function and pathophysiological significance of FLVCR is still in its infancy abroad. There is no report in China, so this is an area to be explored in depth. Objective to observe the expression of hFLVCR protein and mRNA in K562 cells during the differentiation of K562 cells in vitro. To clarify the relationship between hFLVCR and erythropoiesis. 2. Transfection of hFLVCR antisense oligodeoxynucleotides into K562 cells, blocking content and apoptosis of K562 cells. The purpose of this study was to investigate the effect of hFLVCR on erythropoiesis and to observe the differentiation of K562 cells into erythrocytes by cytochemical staining, immunohistochemistry and flow cytometry. Intracellular lipid peroxidation end product malondialdehyde (MDAA) and its mechanism. Methods 1. The effect of inducer Hm on the proliferation of K562 cells was observed by MTT assay. Flow cytometry and real-time fluorescence quantitative PCR were used to detect the effect of Hm on the proliferation of K562 cells. The expression of hFLVCR protein and mRNA in K562 cells induced by hemin was observed dynamically. 3. HFLVCR antisense oligonucleotides were detected by immunohistochemistry. K562 after blocking the expression of hFLVCR
【學(xué)位授予單位】:四川大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【學(xué)位授予年份】:2006
【分類號(hào)】:R33
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