本文關(guān)鍵詞：大胚齡人腦神經(jīng)干細(xì)胞的分離培養(yǎng)及誘導(dǎo)分化的研究　出處：《南昌大學(xué)》2006年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

  更多相關(guān)文章： 神經(jīng)干細(xì)胞 骨髓基質(zhì)細(xì)胞 分化 共培養(yǎng)

【摘要】：目的 1．探討大胚齡人腦神經(jīng)干細(xì)胞(neural stem cells，NSCs)的分離及培養(yǎng)方法。 2．探討骨髓基質(zhì)細(xì)胞(bone marrow stromal cells，，BMSCs)對(duì)NSCs分化的影響。 方法 1．從16-20周胚齡胎腦室下區(qū)分離組織，采用機(jī)械法獲得單細(xì)胞懸液，臺(tái)盼藍(lán)染色計(jì)數(shù)細(xì)胞存活率。 2．采用無(wú)血清培養(yǎng)基(DMEM／F_(12))，加入2％B_(27)、EGF和bFGF培養(yǎng)NSCs，倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞的增殖情況；采用機(jī)械法分離法傳代NSCs；采用免疫細(xì)胞熒光法檢測(cè)神經(jīng)上皮干細(xì)胞蛋白(nestin)及分化后神經(jīng)細(xì)胞抗原的表達(dá)。 3．采用密度梯度離心結(jié)合貼壁分離法分離、純化人BMSCs。 4．將人BMSCs和NSCs在體外通過(guò)不同的方式混合培養(yǎng)，實(shí)驗(yàn)分為三組：自然分化組、直接接觸混合培養(yǎng)組及Transwell共培養(yǎng)組。觀察BMSCs對(duì)NSCs分化的影響。采用免疫細(xì)胞熒光法及Western blot法檢測(cè)各組神經(jīng)元和星形膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志物的表達(dá)。 結(jié)果 1．采用機(jī)械法從胎腦室下區(qū)獲得的單細(xì)胞懸液，臺(tái)盼藍(lán)染色顯示細(xì)胞存活率80％左右。 2．NSCs原代培養(yǎng)時(shí)，鏡下見(jiàn)單個(gè)細(xì)胞呈貼壁生長(zhǎng)。在生長(zhǎng)因子EGF和bFGF的刺激下，2天后細(xì)胞分裂增殖形成3—5個(gè)細(xì)胞聚成的團(tuán)塊。隨著團(tuán)塊直徑增大，逐漸形成形態(tài)規(guī)則的神經(jīng)球，并呈懸浮生長(zhǎng)，球周邊不斷有分裂
[Abstract]:objective
1. to investigate the isolation and culture of neural stem cells (NSCs) of human brain stem cells (SSCs) of large embryo age.
2. to investigate the effect of bone marrow stromal cells (bone marrow stromal cells, BMSCs) on the differentiation of NSCs.
Method
1. weeks from 16-20 fetal subventricular zone tissue separation, to obtain a single cell suspension by mechanical method, trypan blue staining and cell survival rate.
2. a serum free medium (DMEM / F_ (12)), 2%B_ (27), adding EGF and bFGF in cultured NSCs cell proliferation, observed under inverted microscope; separation passage NSCs using mechanical method; detection of neuroepithelial stem cell protein by immunofluorescence (nestin) and differentiation of nerve cells after antigen the expression.
3. the purification of human BMSCs. by the separation of density gradient centrifugation and adherent separation method
4. the BMSCs and NSCs in vitro by mixed culture of different ways, were divided into three groups: natural differentiation group, direct contact co culture group and Transwell group were cultured. The effect of BMSCs on differentiation of NSCs. Using immunofluorescence method and Western blot method to detect the neuron and astrocyte marker expression.
Result
1. the single cell suspension obtained by mechanical method was obtained from the subventricular region of the fetal brain. Trypan blue staining showed that the cell survival rate was about 80%.
2.NSCs were cultured, microscopically, single cells were adherent growth. The growth factor EGF and bFGF under the stimulation of cell proliferation, 2 days after the formation of 3 - 5 cells together into clumps. With mass diameter increases, gradually formed the morphological rules of neurospheres, and growth in suspension, the ball around the time a split

【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2006
【分類號(hào)】：R329.2

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 李蘇;王順和;;骨髓基質(zhì)細(xì)胞向神經(jīng)細(xì)胞誘導(dǎo)分化的研究進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)綜述;2006年11期

2 高小青;杜杰;楊朝鮮;吳巖;鄧?yán)?袁瓊蘭;;大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞體外培養(yǎng)向神經(jīng)干細(xì)胞的誘導(dǎo)分化[J];中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù);2008年12期

3 代廣輝;修俊剛;周振軍;陳中燦;徐如祥;姜曉丹;杜謀選;;超順磁性氧化鐵對(duì)大鼠神經(jīng)干細(xì)胞生物學(xué)活性的影響[J];南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2007年01期

4 婁淑杰,顧平,李怡,陳菲,張明徽,何成,王銘維,路長(zhǎng)林;骨髓基質(zhì)細(xì)胞對(duì)神經(jīng)干細(xì)胞分化為神經(jīng)元的影響[J];中國(guó)神經(jīng)科學(xué)雜志;2002年02期

5 宋玉成;劉永海;張尊勝;沈霞;;腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子誘導(dǎo)大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞成為神經(jīng)干細(xì)胞及其分化作用的實(shí)驗(yàn)研究[J];神經(jīng)疾病與精神衛(wèi)生;2005年05期

6 陳霞;楊志軍;羅永春;蔡穎謙;杜謀選;鄒雨汐;;菲立磁胞內(nèi)標(biāo)記食蟹猴骨髓基質(zhì)細(xì)胞(英文)[J];中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù);2010年32期

7 戴宜武,徐如祥,趙春平,姜曉丹,杜謀選,鄒雨汐,蔡穎謙;骨髓基質(zhì)細(xì)胞源神經(jīng)干細(xì)胞自體移植治療腦干損傷初步觀察[J];中華神經(jīng)醫(yī)學(xué)雜志;2003年01期

8 姚維成;孟慶海;趙英杰;;成鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞向神經(jīng)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化的實(shí)驗(yàn)研究[J];中國(guó)實(shí)用神經(jīng)疾病雜志;2006年04期

9 戴宜武;趙春平;羅永春;秦家振;李培建;劉志良;梁春陽(yáng);何江弘;沈春森;魏群;;自體骨髓基質(zhì)細(xì)胞源神經(jīng)干細(xì)胞移植治療持續(xù)性植物狀態(tài)[J];中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù);2008年29期

10 宋玉成,劉永海,張尊勝,沈霞;骨髓基質(zhì)細(xì)胞源神經(jīng)干細(xì)胞對(duì)大鼠局灶性腦缺血神經(jīng)細(xì)胞凋亡及相關(guān)蛋白表達(dá)的動(dòng)態(tài)影響[J];中風(fēng)與神經(jīng)疾病雜志;2005年04期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 戴宜武;徐如祥;;自體骨髓基質(zhì)源神經(jīng)干細(xì)胞移植治療持續(xù)性植物狀態(tài)研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)神經(jīng)外科學(xué)分會(huì)第九次學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2010年

2 林欣;只達(dá)石;楊樹(shù)源;張文治;蘇心;;神經(jīng)干細(xì)胞和骨髓基質(zhì)細(xì)胞體外共培養(yǎng)的研究[A];中國(guó)醫(yī)師協(xié)會(huì)神經(jīng)外科醫(yī)師分會(huì)第二屆全國(guó)代表大會(huì)論文匯編[C];2007年

3 戴宜武;徐如祥;趙春平;羅永春;秦家振;李培建;劉志良;梁春陽(yáng);何江弘;沈春森;魏群;;自體骨髓基質(zhì)細(xì)胞源神經(jīng)干細(xì)胞移植治療持續(xù)性植物狀態(tài)[A];第七屆全國(guó)創(chuàng)傷學(xué)術(shù)會(huì)議暨2009海峽兩岸創(chuàng)傷醫(yī)學(xué)論壇論文匯編[C];2009年

4 孫一睿;胡錦;王爾松;奚才華;姚海軍;;單層黏附培養(yǎng)技術(shù)在哺乳動(dòng)物神經(jīng)干細(xì)胞體外穩(wěn)定增殖和多向分化中的應(yīng)用[A];中國(guó)醫(yī)師協(xié)會(huì)神經(jīng)外科醫(yī)師分會(huì)第四屆全國(guó)代表大會(huì)論文匯編[C];2009年

5 李力;萬(wàn)琪;劉永紅;張巍;;小鼠神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)及缺血神經(jīng)元對(duì)其增殖、分化的影響[A];科技、工程與經(jīng)濟(jì)社會(huì)協(xié)調(diào)發(fā)展——中國(guó)科協(xié)第五屆青年學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2004年

6 田東萍;蘇敏;吳賢英;張舸;;硒、B-27在神經(jīng)干細(xì)胞球存活與分化中的作用[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)病理學(xué)分會(huì)2005年學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2005年

7 沈健;俞康;;血寶和再障患者血清對(duì)骨髓基質(zhì)細(xì)胞的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第11屆全國(guó)內(nèi)科學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2007年

8 楊華靜;徐鵬;張?zhí)K明;;低濃度β-淀粉樣蛋白對(duì)神經(jīng)干細(xì)胞的作用機(jī)制研究[A];第十一屆全國(guó)神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2008年

9 方希敏;李原;錢江潮;周海霞;王菊香;曾煒煒;徐霞;;正常骨髓基質(zhì)細(xì)胞對(duì)HL-60細(xì)胞分化作用的初探[A];第六屆江浙滬兒科學(xué)術(shù)會(huì)議暨兒科學(xué)基礎(chǔ)與臨床研究進(jìn)展學(xué)術(shù)班論文匯編[C];2009年

10 文玉軍;王登科;孫征;劉海洋;張蓮香;秦毅;;成年和老年大鼠腦出血后海馬齒狀回神經(jīng)干細(xì)胞的變化[A];中國(guó)解剖學(xué)會(huì)2011年年會(huì)論文文摘匯編[C];2011年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 時(shí)仲省 高思敏;移植神經(jīng)干細(xì)胞 癱瘓兔子可爬行[N];大眾衛(wèi)生報(bào);2001年

2 王成應(yīng);能克隆的神經(jīng)干細(xì)胞被分離[N];健康報(bào);2004年

3 孫國(guó)根;神經(jīng)干細(xì)胞并非“全能制造者”[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2009年

4 劉海英;腦癌源于腦下室區(qū)的神經(jīng)干細(xì)胞[N];科技日?qǐng)?bào);2009年

5 孫國(guó)根　白毅;靈長(zhǎng)類腦內(nèi)神經(jīng)干細(xì)胞被發(fā)現(xiàn)[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2011年

6 沈麗 付鈺;神奇的神經(jīng)干細(xì)胞[N];科技日?qǐng)?bào);2002年

7 北京康復(fù)中心神經(jīng)外科 黃紅云;神經(jīng)干細(xì)胞之謎[N];健康報(bào);2008年

8 記者 吳苡婷;為腦損傷患者治療打開(kāi)希望之門[N];上�？萍紙�(bào);2009年

9 劉霞;美將成人皮膚細(xì)胞變成神經(jīng)干細(xì)胞[N];科技日?qǐng)?bào);2011年

10 ;英研究用神經(jīng)干細(xì)胞治療中風(fēng)[N];人民日?qǐng)?bào)海外版;2000年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 滕曉華;治療性克隆核供體細(xì)胞選擇的實(shí)驗(yàn)研究[D];第一軍醫(yī)大學(xué);2005年

2 王煥明;大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化及自體移植治療顳葉癲癇實(shí)驗(yàn)研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2007年

3 朱汝森;成人骨髓源性神經(jīng)干細(xì)胞致瘤性的分子遺傳學(xué)研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2008年

4 戴宜武;骨髓基質(zhì)細(xì)胞定向分化為神經(jīng)干細(xì)胞及自體移植治療中腦損傷研究[D];第一軍醫(yī)大學(xué);2002年

5 張力;人胚神經(jīng)干細(xì)胞及骨髓基質(zhì)細(xì)胞移植治療帕金森病恒河猴模型的實(shí)驗(yàn)研究[D];復(fù)旦大學(xué);2003年

6 鄭敏;神經(jīng)干細(xì)胞定向分化與移植治療帕金森病的實(shí)驗(yàn)研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2003年

7 盧洪流;成年大鼠腦內(nèi)神經(jīng)干細(xì)胞的在體研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2001年

8 涂漢軍;干細(xì)胞轉(zhuǎn)染TRAIL基因移植治療大鼠C6膠質(zhì)母細(xì)胞瘤[D];武漢大學(xué);2010年

9 李巍;神經(jīng)干細(xì)胞的分化調(diào)控及BDNF基因修飾后對(duì)大鼠脊髓損傷修復(fù)的研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2002年

10 張所軍;神經(jīng)干細(xì)胞向膠質(zhì)瘤干細(xì)胞遷移及對(duì)其生長(zhǎng)特性的影響[D];華中科技大學(xué);2011年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 李鋼;成年食蟹猴骨髓基質(zhì)細(xì)胞的誘導(dǎo)分化及移植修復(fù)腦皮層損傷[D];中國(guó)人民解放軍第一軍醫(yī)大學(xué);2003年

2 趙英杰;成鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞向神經(jīng)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化的實(shí)驗(yàn)研究[D];青島大學(xué);2006年

3 倫鵬;骨髓來(lái)源和腦來(lái)源神經(jīng)干細(xì)胞移植治療大鼠腦損傷的實(shí)驗(yàn)研究[D];青島大學(xué);2006年

4 郭再玉;恒河猴骨髓基質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)干細(xì)胞體外增殖、分化規(guī)律及其電生理特性的實(shí)驗(yàn)研究[D];第一軍醫(yī)大學(xué);2005年

5 馮年花;人誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞向神經(jīng)干細(xì)胞分化的實(shí)驗(yàn)研究[D];南昌大學(xué);2010年

6 宋精梅;比較新生大鼠腦部不同部位的神經(jīng)干細(xì)胞被誘導(dǎo)分化為少突膠質(zhì)細(xì)胞的差異[D];福建醫(yī)科大學(xué);2010年

7 李政;內(nèi)皮祖細(xì)胞調(diào)控神經(jīng)干細(xì)胞分化及其機(jī)制研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2010年

8 王念;絞股藍(lán)皂苷對(duì)脊髓源神經(jīng)干細(xì)胞體外培養(yǎng)的影響[D];陜西師范大學(xué);2011年

9 劉朋;海藻酸鈣/明膠微膠珠的制備及在神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)中的應(yīng)用[D];大連理工大學(xué);2011年

10 郭兵;大鼠羊膜上皮細(xì)胞體外向類神經(jīng)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化及其移植后對(duì)視神經(jīng)再生的作用[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2010年

本文編號(hào)：1406192