肝纖維化過程中calpain2與caspase-3表達(dá)變化及意義
本文關(guān)鍵詞:肝纖維化過程中calpain2與caspase-3表達(dá)變化及意義 出處:《中國公共衛(wèi)生》2014年01期 論文類型:期刊論文
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【摘要】:目的探討大鼠肝纖維化過程中鈣激活中性蛋白酶2(calpain 2)與半胱氨酸天冬氨酸酶3(caspase-3)表達(dá)變化及其在肝纖維化發(fā)生發(fā)展中作用。方法雄性Wistar大鼠40只,隨機(jī)分為對照4、8周組和肝纖維化模型4、8周組,每組各10只;肝纖維化組按0.3 mL/100g皮下注射40%CCl4植物油溶液,每隔3 d注射1次,對照組給予等量植物油;測定肝臟指數(shù)、血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)及谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)含量,蘇木素伊紅(HE)染色觀察肝組織病理學(xué)改變;免疫組織化學(xué)法及western blot檢測肝組織中calpain 2與活化的caspase-3蛋白表達(dá)含量;聚合酶鏈反應(yīng)檢測肝組織中calpain 2 mRNA表達(dá)。結(jié)果肝纖維化4、8周組大鼠血清ALT、AST分別為(727.00±249.70)、(1 260.00±579.25)和(616.00±209.98)、(1 167.00±318.18)U/L,均高于對照組(P0.01);肝纖維化組大鼠肝組織發(fā)生明顯的纖維化改變,其中以8周組更為明顯;與對照組比較,肝纖維化8周組大鼠肝組織中calpain 2蛋白(23.1±3.77)和mRNA(167.93±50.39)表達(dá)均升高(P0.01),而在肝纖維化4、8周組活性caspase-3蛋白表達(dá)[(18.76±3.54)、(25.46±4.77)]均增加(P0.01)。結(jié)論 calpain 2與caspase-3在蛋白及基因水平表達(dá)變化,可能參與了肝纖維化的發(fā)生發(fā)展過程。
[Abstract]:Objective: To explore the process of hepatic fibrosis in rats of calcium activated neutral protease 2 (calpain 2) and caspase 3 (caspase-3) expression and its role in the process of liver fibrosis. Methods 40 male Wistar rats were randomly divided into control group and hepatic fibrosis model 4,8 weeks 4,8 weeks group, n = 10 only; liver fibrosis in group 0.3 mL/100g subcutaneous injection of 40%CCl4 solution in vegetable oil, every 3 D 1 times of injection, control group were given the same amount of vegetable oil; Determination of liver index, serum alanine aminotransferase (ALT) and aspartate aminotransferase (AST) content, hematoxylin and eosin (HE) staining to observe the pathological changes of the liver; calpain detection liver tissue by immunohistochemistry and Western blot in 2 and activated caspase-3 protein; expression of 2 mRNA calpain in liver tissue were detected by polymerase chain reaction. Results the serum ALT 4,8 weeks group of hepatic fibrosis rats, respectively (727 + 249. AST 70), (1260 + 579.25) and (616 + 209.98), (1167 + 318.18) U/L, were higher than the control group (P0.01); liver fibrosis rats occurred obvious fibrosis, among which 8 weeks group is more obvious; compared with the control group, calpain in liver tissue of 8 week groups hepatic fibrosis in 2 protein (23.1 + 3.77) and mRNA (167.93 + 50.39) expression were increased (P0.01), and the expression of 4,8 in liver fibrosis group activated protein caspase-3 [(18.76 + 3.54), (25.46 + 4.77)] were increased (P0.01). Conclusion the expression of calpain and Caspase-3 in protein and 2 the gene level changes, may be involved in the occurrence and development process of liver fibrosis.
【作者單位】: 貴陽醫(yī)學(xué)院病理生理教研室;
【基金】:貴州省科技廳國際科技合作項(xiàng)目(黔科合外G字【2010】7016號)
【分類號】:R363
【正文快照】: Calpain家族是一類存在于細(xì)胞質(zhì)中的Ca2+依賴性半胱氨酸蛋白酶,其家族成員在細(xì)胞內(nèi)發(fā)揮多種生理作用,如細(xì)胞運(yùn)動、細(xì)胞周期調(diào)節(jié)、基因表達(dá)調(diào)節(jié)及細(xì)胞凋亡等[1]。有研究表明calpain可激活特異性定位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的caspase-12,并進(jìn)一步激活下游的效應(yīng)caspase-3,從而引起細(xì)胞凋亡[2]
【參考文獻(xiàn)】
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【二級參考文獻(xiàn)】
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本文編號:1372353
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