本文關(guān)鍵詞：BORIS和CT45兩種新的CT抗原單克隆抗體的制備及其蛋白水平表達(dá)和分布的初步研究　出處：《第四軍醫(yī)大學(xué)》2007年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】： 隨著腫瘤免疫學(xué)的發(fā)展,越來越多的腫瘤相關(guān)抗原被應(yīng)用于腫瘤的免疫研究中。腫瘤/睪丸抗原(Cancer/Testis Antigens, CTA)具有可局限性表達(dá)于腫瘤組織并且可以在腫瘤患者體內(nèi)引起免疫反應(yīng)等特點,因而成為近年來腫瘤免疫研究的熱點。但是目前CT抗原的研究大多停留在DNA及mRNA的水平上,蛋白水平上的研究還相對滯后,主要原因是缺乏特異性強敏感性高的單克隆抗體。 BORIS和CT45是兩種新近發(fā)現(xiàn)的CT抗原,為了進(jìn)一步在蛋白水平上對其進(jìn)行研究,我們首次制備BORIS及CT45的單克隆抗體,并對其在蛋白水平上的表達(dá)和分布進(jìn)行了初步的研究。 應(yīng)用淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù),制備和鑒定了BORIS和CT45兩種CT抗原的單克隆抗體,并篩選出特異性強及敏感性高能識別天然抗原的相應(yīng)單克隆抗體:FMU-BORIS13和CT45-03,免疫組織化學(xué)染色最佳工作濃度分別為4.5μg/ml和2.6μg/ml。以獲得的單抗為工具,運用免疫組織化學(xué)染色的方法在睪丸組織正常乳腺組織乳腺良性疾病組織乳腺癌及肺癌組織上對兩種CT抗原在蛋白水平上的分布進(jìn)行了初步的研究。結(jié)果發(fā)現(xiàn)在睪丸組織中:兩種CT抗原主要分布在生精細(xì)胞發(fā)育的早期即主要表達(dá)在精原細(xì)胞及初級精母細(xì)胞的細(xì)胞核中。在乳腺癌組織中BORIS呈高水平的表達(dá),表達(dá)率為85.5% (94/110);在正常乳腺組織及乳腺良性疾病組織中也檢測到了BORIS的表達(dá),但表達(dá)水平遠(yuǎn)低于乳腺癌組織;在肺癌組織中CT45表達(dá)百分率較低僅為4.8%(3/62)。兩種CT抗原在腫瘤組織中的表達(dá)與腫瘤組織的分期分級無明顯相關(guān)性。 應(yīng)用單克隆抗體在睪丸組織及腫瘤組織對兩種抗原進(jìn)行初步的檢測,證實了兩種CT抗原在蛋白水平上的分布符合CT抗原的特點。兩種新的CT抗原的單克隆抗體的獲得,為蛋白水平上進(jìn)一步研究兩種CT抗原提供了有力的工具。
[Abstract]:With the development of tumor immunology, immune of tumor associated antigen was applied in more and more tumors. The cancer / testis antigens (Cancer/Testis, Antigens, CTA) has the limitations expressed in tumor tissue and can cause immune reactions etc. in cancer patients, so it has become a hot research topic in recent years. But the tumor immunity at present study on CT antigen mostly remained at DNA and mRNA level, the research on the protein level is still lagging behind, the main reason is the lack of specificity of monoclonal antibody with high sensitivity.?
BORIS and CT45 are two newly discovered CT antigens. In order to further research on protein level, we prepared BORIS and CT45 monoclonal antibodies for the first time, and studied their expression and distribution at protein level.
The application of hybridoma technology and preparation of monoclonal antibody BORIS and CT45 two CT antigen were identified and screened the corresponding monoclonal antibody specificity and sensitivity of high recognition of natural antigens: FMU-BORIS13 and CT45-03, immunohistochemical staining of optimal concentration were 4.5 g/ml and 2.6 g/ml. to obtain the monoclonal antibody for the tool, using immunohistochemical staining method in testicular tissue of normal breast tissue?? breast benign disease? Breast cancer and lung cancer tissue of two CT antigen distribution at protein level were studied. The results showed that in testis: two CT antigen mainly distributed in the early development of spermatogenic cell that is mainly expressed in spermatogonia and primary spermatocyte nuclei. In breast cancer the expression of BORIS was high level, the expression rate was 85.5% (94/110) in normal breast group; Fabric and benign breast disease tissues also detected the expression of BORIS, but the expression level is far lower than that of breast cancer; in lung cancer tissues positive percentage of CT45 was only 4.8% (3/62). The expression of two CT antigen in tumor tissues and tumor staging had no obvious correlation.
Application of monoclonal antibody to detection of these two antigens in testicular tissue and tumor tissue, confirmed the distribution of two kinds of CT antigen at the protein level in accordance with the characteristics of CT antigen. Monoclonal antibodies of two kinds of new CT antigen, which provides a powerful tool for further research on the protein level of two CT antigen.

【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2007
【分類號】：R392

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號：1372215