發(fā)布時間：2017-12-30 14:32

  本文關(guān)鍵詞：淋球菌外膜蛋白NspA在大腸桿菌中高效表達(dá)及其性能的初步研究　出處：《四川大學(xué)》2006年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

  更多相關(guān)文章： 淋球菌 外膜蛋白NspA pET 30c(+) 基因克隆 蛋白質(zhì)表達(dá) 金屬離子親和層析 純化 多克隆抗體 ELISA

【摘要】：目的：淋病是性傳播疾病中最常見、發(fā)病率排列第一的疾�。灰彩俏覈畛蟮赖男圆≈唬粌H發(fā)病人數(shù)最多，而且有逐年上升趨勢，其感染還有增加HIV易感性的可能。目前常用的抗生素治療雖然可以縮短淋球菌感染持續(xù)的時間并減少其傳播，但近年來淋球菌耐藥菌株的增多和新型耐藥株的不斷出現(xiàn)，這一策略已經(jīng)陷入困境和危機(jī)，因此迫切需要尋求新的預(yù)防和治療方法，而疫苗的研究是首選的策略之一。迄今為止，國內(nèi)外尚無預(yù)防淋病的疫苗問世。最近對奈瑟菌外膜蛋白NspA的研究發(fā)現(xiàn)，NspA具有高度的抗原保守性，其保守性高于同樣是淋球菌候選抗原的PI蛋白。NspA蛋白持續(xù)表達(dá)暴露在細(xì)胞表面，誘導(dǎo)產(chǎn)生的抗NspA抗體有溶菌活性，因此，NspA是一個潛在的制備淋球菌疫苗的候選抗原，可望用于制備成防治淋病的疫苗。 本研究通過擴(kuò)增淋病奈瑟菌(Neisseria gonorrhoeae)外膜蛋白nspA(Neisseria surface protein A)基因，構(gòu)建pET-NspA重組子，實現(xiàn)NspA重組蛋白在大腸桿菌中的高效表達(dá)，通過金屬離子親和層析純化表達(dá)蛋白，，免疫動物獲得多克隆抗體血清，并對抗血清的性質(zhì)進(jìn)行初步研究，為后續(xù)研究淋球菌NspA的免疫學(xué)性能、相應(yīng)的抗體制備及疫苗的研制奠定了基礎(chǔ)，特別是為研制適合我國流行情況的相關(guān)疫苗奠定了堅實的基礎(chǔ)。 方法：本研究分為三部分。 1．淋病奈瑟菌(Neisseria gonorrhoeae)外膜蛋白NspA原核表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建及序列分析根據(jù)nspA基因序列特性，設(shè)計三套引物，用PCR方法自淋球菌基因組中擴(kuò)增nspA目的片段。利用限制性內(nèi)切酶剪切產(chǎn)生的粘性末端將擴(kuò)增所得片段與原核表達(dá)質(zhì)粒載體pET 30c(+)連接，構(gòu)建重組質(zhì)粒
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：四川大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2006
【分類號】：R378;R759

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本文編號：1355359