本文關(guān)鍵詞：HBsAg基因轉(zhuǎn)化番茄及其表達(dá)　出處：《西北大學(xué)》2006年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：本實(shí)驗(yàn)將整合有乙肝表面抗原主蛋白基因(HBsAg)的植物表達(dá)載體pCAMBIA1301通過根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化番茄,誘導(dǎo)出叢生芽并篩選轉(zhuǎn)基因植株,檢測目的基因的轉(zhuǎn)化情況和表達(dá)情況。實(shí)驗(yàn)主要取得了以下進(jìn)展: 1.將植物表達(dá)載體pCAMBIA1301/HB轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌LBA4404,利用利福霉素(Rif)和卡那霉素(Kan)篩選出轉(zhuǎn)化子,經(jīng)PCR和雙酶切鑒定,質(zhì)粒轉(zhuǎn)化成功,攜帶該載體質(zhì)粒的農(nóng)桿菌命名為LBA4404/pCAMBIA/HB。 2.櫻桃番茄幼苗外植體在MS+6-BA_(2.0)+IAA_(0.2)培養(yǎng)基中能很好的誘導(dǎo)分化叢生芽;以25mg/L的潮霉素(Hyg)為選擇壓力能高效篩選出抗Hyg轉(zhuǎn)化植株;轉(zhuǎn)化植株在1/2MS+Hyg_(25)生根培養(yǎng)基中生根正常,植株生長良好;經(jīng)過煉苗后移栽花盆的存活率為100%。 3.用農(nóng)桿菌LBA4404/HB浸染番茄幼苗外植體,以Hyg作為選擇抗生物篩選出抗性轉(zhuǎn)化植株,經(jīng)PCR和Southern-blot檢測證明所得轉(zhuǎn)化植株全部為轉(zhuǎn)基因植株。 4.粗提轉(zhuǎn)基因植株的總蛋白,進(jìn)行Western-blot和ELISA檢測,結(jié)果證明目的基因HBsAg在番茄中正確表達(dá),所表達(dá)的蛋白具有免疫原性。
[Abstract]:In this experiment, a plant expression vector pCAMBIA1301 with hepatitis B surface antigen major protein gene (HBsAg) was transformed into Tomato by Agrobacterium tumefaciens mediated transformation, and induced clustered buds and screened transgenic plants. The transformation and expression of target genes were detected. The main achievements of the experiment are as follows:
【學(xué)位授予單位】：西北大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2006
【分類號】：R392;S641.2

【引證文獻(xiàn)】

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 張艷婷;轉(zhuǎn)HBsAg基因?qū)е聶烟曳淹蛔凅w發(fā)生規(guī)律的研究[D];西北大學(xué);2012年

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本文編號：1342945