新生小鼠海馬神經(jīng)元培養(yǎng)及形態(tài)學(xué)觀察的優(yōu)化方法
發(fā)布時間:2017-12-24 16:30
本文關(guān)鍵詞:新生小鼠海馬神經(jīng)元培養(yǎng)及形態(tài)學(xué)觀察的優(yōu)化方法 出處:《重慶醫(yī)學(xué)》2014年22期 論文類型:期刊論文
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【摘要】:目的探討一種更加優(yōu)化的體外培養(yǎng)海馬神經(jīng)元及進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察的方法,為阿爾茨海默病(AD)神經(jīng)突觸的研究奠定基礎(chǔ)。方法選擇新出生后0~1d的C57BL/6J小鼠,斷頭取雙側(cè)海馬,采用低濃度胰酶消化加機(jī)械分離的方法,使用無血清培養(yǎng)基進(jìn)行神經(jīng)元原代培養(yǎng),培養(yǎng)17d后利用磷酸鈣共沉淀法進(jìn)行綠色熒光蛋白(GFP)的轉(zhuǎn)染,于熒光顯微鏡下觀察海馬神經(jīng)元和樹突棘形態(tài)特征。結(jié)果采用此方法進(jìn)行的海馬神經(jīng)元原代細(xì)胞培養(yǎng),神經(jīng)元生長良好,轉(zhuǎn)染GFP后可以看到清晰的軸突/樹突和樹突棘突等典型的神經(jīng)細(xì)胞結(jié)構(gòu)特征。結(jié)論此技術(shù)方法所培養(yǎng)的海馬神經(jīng)元生長良好,磷酸鈣共沉淀法轉(zhuǎn)染GFP后能夠更加清晰地觀察到神經(jīng)元及樹突棘的形態(tài)特征。
【作者單位】: 廣州中醫(yī)藥大學(xué)臨床藥理研究所;
【基金】:國家自然科學(xué)基金面上項目(81273817) 教育部高等學(xué)校博士學(xué)科點專項科研基金(20114425110007) 高等學(xué)校博士學(xué)科點專項科研基金(20124425120016) 廣東省自然基金資助項目(S2012040006514) 廣東省科技計劃項目(2010A030100009)
【分類號】:R338.2
【正文快照】: 海馬在認(rèn)知、學(xué)習(xí)和記憶等方面都扮演著極為重要的角色[1],是阿爾茨海默病(Alzheimer′s disease,AD)的主要病變部位,利用海馬神經(jīng)元建立一個直觀的體外研究的神經(jīng)元活動的實驗?zāi)P?對阿爾茨海默病等神經(jīng)性疾病的研究有著極大的價值。關(guān)于神經(jīng)突觸的研究方面,樹突棘的形態(tài)學(xué)觀
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1 鄒飛,,高天明,陳培熹;海馬神經(jīng)元乙酰膽堿激活通道在不同培養(yǎng)期的功能特性[J];生理學(xué)報;1994年06期
2 汪溪潔,程宏,程潔,高蓉,肖杭;大鼠海馬神經(jīng)元急性分離和膜片鉗方法的研究[J];上海實驗動物科學(xué);2004年03期
3 馬原野;田蕓芬;蔡景霞;李■明;孫公鐸;;JSD對樹
本文編號:1329121
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