本文關鍵詞：Notch信號通路阻斷劑對人臍帶間充質干細胞軟骨分化的影響

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【摘要】：背景:Notch信號通路作為一條在細胞增殖和分化過程中起重要作用的信號通路,目前它在人臍帶間充質干細胞在體外向軟骨細胞誘導分化過程中的作用仍然未知。目的:首次探討Notch信號通路特異性阻斷劑2,4-二氨基-5-苯噻唑(DAPT)對人臍帶間充質干細胞向軟骨細胞誘導分化的影響。方法:從人臍帶中分離獲得間充質干細胞,體外向軟骨細胞誘導分化。實驗分4組:①無誘導組換成含體積分數(shù)5%胎牛血清和1%雙抗的DMEM高糖培養(yǎng)基培養(yǎng)。②單純誘導組換成終濃度為6.25 mg/L胰島素、6.25 mg/L轉鐵蛋白、10μg/L轉化生長因子β1、0.1μmol/L地塞米松、50 mg/L維生素C、體積分數(shù)5%胎牛血清和1%雙抗的軟骨誘導培養(yǎng)基培養(yǎng)。③二甲基亞砜組在軟骨誘導培養(yǎng)基中加入終濃度為0.1%的二甲基亞砜培養(yǎng)。④2,4-二氨基-5-苯噻唑組在軟骨誘導培養(yǎng)基中加入終濃度為5μmol/L的2,4-二氨基-5-苯噻唑(溶于二甲基亞砜)培養(yǎng),二甲基亞砜終濃度為0.1%。結果與結論:誘導人臍帶間充質干細胞向軟骨細胞分化后,細胞形態(tài)由長梭形變?yōu)槎噙呅?且甲苯胺藍染色和免疫熒光染色均呈現(xiàn)陽性;軟骨誘導分化后Jag-1、PS-1、Notch-1、Hes-1的基因表達均明顯下降(P0.01);添加2,4-二氨基-5-苯噻唑后,與單純誘導組相比,人臍帶間充質干細胞中Jag-1、PS-1、Hes-1(P0.01)和Notch-1(P0.05)的基因表達顯著降低;蛋白聚糖和Ⅱ型膠原蛋白含量均降低(P0.01);蛋白聚糖的基因表達顯著降低(P0.01),Ⅱ型膠原蛋白的基因表達也出現(xiàn)一定程度的下降。提示Notch信號存在于人臍帶間充質干細胞中,誘導人臍帶間充質干細胞向軟骨細胞分化后,這種信號強度迅速減弱;2,4-二氨基-5-苯噻唑可能通過Jag-1-Notch-1-Hes-1途徑抑制人臍帶間充質干細胞向軟骨細胞分化。
【作者單位】： 暨南大學醫(yī)學院生物化學系;暨南大學理工學院力學和土木工程系;
【基金】：廣東省自然科學基金資助項目(9151008901000050) 暨南大學大學生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓練計劃(Cx12200)~~
【分類號】：R329
【正文快照】： 0引言Introduction關節(jié)軟骨組織由軟骨細胞和細胞外基質組成,蛋白聚糖和Ⅱ型膠原蛋白是關節(jié)軟骨組織細胞外基質的主要成分,在體內起著重要作用[1-2]。關節(jié)缺損及骨關節(jié)炎等原因造成的關節(jié)軟骨損傷和退化是骨科常見的難題,給患者帶來極大的痛苦和經(jīng)濟負擔。雖然自體軟骨細胞移

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 孫安科,裴國獻;軟骨組織工程種子細胞的來源、培養(yǎng)和評價[J];國外醫(yī)學.生物醫(yī)學工程分冊;2003年04期

2 羅二梅;宇麗;張家文;柳菁;;還原型谷胱甘肽對人臍帶間充質干細胞成軟骨誘導的影響[J];中國生物工程雜志;2013年03期

3 洪奇華;Notch信號途徑及其調控[J];細胞生物學雜志;2004年04期

4 徐若男;施明;王福生;;人臍帶間充質干細胞的特征及其臨床應用前景[J];中國免疫學雜志;2010年01期

5 靳小兵;;軟骨組織工程研究新進展[J];中國修復重建外科雜志;2011年02期

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 金磊;福軍亮;張政;王嗣予;徐若男;呂吉云;張紀元;王福生;;臍帶間充質干細胞治療HIV感染的安全性評價[J];傳染病信息;2010年06期

2 付亞娟;葉楓;呂衛(wèi)國;謝幸;;Notch信號通路的研究現(xiàn)狀[J];醫(yī)學分子生物學雜志;2007年05期

3 劉紀紅;張倩;郭晴;;基于SIFT的軟骨切片電鏡圖像拼接算法[J];東北大學學報(自然科學版);2014年06期

4 李江濤;趙和泰;張效北;韓笑元;李偉;覃雪燕;李丁;何龍;;間充質干細胞治療慢性重癥乙型肝炎臨床分析[J];中外醫(yī)療;2012年03期

5 熊熠;林月秋;申財芳;;軟骨組織工程種子細胞的選擇[J];西南軍醫(yī);2011年06期

6 尹成玉;崔勇;王斌;劉韜;董輝;高杰;高旭超;;視神經(jīng)損傷治療的進展[J];科技信息;2011年31期

7 王民增;劉巒松;李東魁;李建明;;Notch1、Notch2表達與移行細胞腫瘤惡變及發(fā)展關系的研究[J];現(xiàn)代泌尿外科雜志;2013年01期

8 張玉琳;于紀棉;曾斌;王靜文;倪晶晶;;人臍帶間充質干細胞最適宜培養(yǎng)條件研究[J];中國民族民間醫(yī)藥;2013年11期

9 張亞倩;梁軍;田沁森;丁玉芳;余道海;;人臍帶間充質干細胞分離培養(yǎng)方法的優(yōu)化[J];牡丹江醫(yī)學院學報;2013年05期

10 羅二梅;張家文;胡笑軻;唐明喬;宇麗;;共培養(yǎng)人臍帶間充質干細胞(hUC-MSCs)和兔關節(jié)軟骨細胞誘導hUC-MSCs分化成軟骨細胞[J];基礎醫(yī)學與臨床;2014年01期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 耿濤;楊福合;邢秀梅;李春義;;Notch信號通路在體外培養(yǎng)的鹿茸干細胞中的表達[A];2010中國鹿業(yè)進展[C];2010年

2 周凌云;李榮亨;;Notch和Wnt信號通路與骨關節(jié)炎[A];全國第十一屆中西醫(yī)結合風濕病學術會議論文匯編[C];2013年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 陳劍鋒;表達載體介導的Notch2基因沉默抑制人骨肉瘤侵襲和轉移的實驗研究[D];華中科技大學;2011年

2 黃丹琳;人臍帶間充質干細胞移植治療大鼠梗阻性腎間質纖維化的實驗研究[D];中南大學;2011年

3 李軍鋒;泛素—蛋白酶體途徑參與小鼠SPEN家族MINT蛋白轉錄調控作用的研究[D];第四軍醫(yī)大學;2006年

4 于春泳;NOTCH-1信號通路對腦膠質瘤干細胞增殖與分化調控作用的實驗研究[D];第三軍醫(yī)大學;2008年

5 馬健會;mTOR信號通路通過Notch信號調節(jié)細胞分化[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;2009年

6 于雷;癌基因c-Myc、Kras及Notch2與輻射誘發(fā)胸腺淋巴瘤的相關研究[D];吉林大學;2010年

7 秦煒煒;模擬失重條件下microRNA-494抑制成骨細胞分化作用機制的研究[D];第四軍醫(yī)大學;2010年

8 趙磊;人臍帶間充質干細胞生物學特性及脈沖電磁場促進其成骨分化研究[D];吉林大學;2010年

9 杜紅陽;地黃多糖通過Notch信號通路誘導BMSCs分化為神經(jīng)樣細胞作用的實驗研究[D];遼寧中醫(yī)藥大學;2012年

10 孫志濤;鹿茸歸經(jīng)靶向調控骨關節(jié)炎TGF-β/Smads信號通路機制研究[D];廣州中醫(yī)藥大學;2013年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 周志剛;人臍帶間充質干細胞定向誘導分化成類神經(jīng)元的實驗研究[D];暨南大學;2011年

2 孫麗哲;Notch在中國鹵蟲不同發(fā)育時期的表達模式[D];遼寧師范大學;2011年

3 習旭濤;人臍帶間充質干細胞初始接種密度對成骨誘導分化影響的初步研究[D];中南大學;2011年

4 江祺川;BMP-2與b-FGF對大鼠關節(jié)軟骨細胞體外增殖和分化的作用[D];遼寧醫(yī)學院;2011年

5 尹成玉;間充質干細胞治療視神經(jīng)損傷的臨床觀察[D];青島大學;2011年

6 蘇新;b-FGF、IGF-Ⅰ對體外培養(yǎng)的兔關節(jié)軟骨細胞Ⅱ型膠原表達的影響[D];南京醫(yī)科大學;2006年

7 朱海強;PHA生物材料支架對臍帶間充質干細胞向成骨分化的影響[D];汕頭大學;2010年

8 韓爽;自體脂肪干細胞復合人臍帶Wharton膠支架修復兔膝關節(jié)軟骨缺損的實驗研究[D];山西醫(yī)科大學;2012年

9 孫娟;肝硬化患者生命質量調查及干細胞治療對其生命質量的影響[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進修學院;2012年

10 王凱;離體神經(jīng)元損傷后Homer1a與Notch信號的作用及關系研究[D];第四軍醫(yī)大學;2012年

【二級參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前9條

1 柳菁;宇麗;許超;羅二梅;;長期培養(yǎng)人臍帶間充質干細胞分化能力改變的研究[J];中國生物工程雜志;2012年02期

2 李振華;趙文海;周秋麗;;鹿茸多肽對抗骨關節(jié)炎軟骨細胞氧化損傷作用的實驗研究[J];中國骨傷;2011年03期

3 王健,夏萬堯,崔磊,曹誼林,商慶新;同種異體組織工程化軟骨組織的免疫學差異[J];中華創(chuàng)傷雜志;2001年07期

4 孫安科,陳文弦,崔鵬程,羅家勝;同種異體工程化軟骨的構建和修復甲狀軟骨缺損的實驗研究[J];中華耳鼻咽喉科雜志;2001年04期

5 焦巖濤,王大章,韓文利,胡靜;bFGF、IGF-Ⅰ及TGF-β_1對人髁突軟骨細胞增殖的影響[J];中華口腔醫(yī)學雜志;2000年05期

6 ;Human umbilical cord Wharton's Jelly-derived mesenchymal stem cells differentiation into nerve-like cells[J];Chinese Medical Journal;2005年23期

7 劉方軍 ,曹誼林 ,商慶新 ,崔磊 ,劉偉;真核表達載體pcDNA3.1-h轉化生長因子-β1的構建[J];中華實驗外科雜志;2002年03期

8 夏萬堯,曹誼林,商慶新,劉彥春,王倬,崔磊,王健;同種異體組織工程化軟骨組織形成的初步研究[J];中華整形外科雜志;2000年05期

9 夏萬堯 ,商慶新 ,徐蓉 ,曹誼林 ,崔磊 ,丁小邦;骨髓間質干細胞向軟骨細胞表型定向誘導分化的實驗研究[J];中華整形外科雜志;2002年01期

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 陳晨;張毅;;Notch信號通路與間充質干細胞分化[J];中國實驗血液學雜志;2010年02期

2 張琦,林玲,胡建石,鄭志z，

本文編號：1294102