本文關(guān)鍵詞：乙肝病毒HBx基因穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞系的建立及其誘導(dǎo)的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激

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【摘要】：目的建立乙肝病毒(HBV)HBx基因穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞系,并觀察該細胞系的增殖活性及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)基因的表達情況。方法采用RT-PCR法從HepG2.2.15細胞株中克隆HBx基因編碼區(qū)片段,構(gòu)建pcDNA3.1-HBx真核表達質(zhì)粒。利用脂質(zhì)體將pcDNA3.1-HBx轉(zhuǎn)染至人HepG2細胞系,通過G418篩選后,經(jīng)Western blot法對HBx的表達進行驗證。并用MTT法檢測細胞的增殖活性,同時觀察過表達HBx蛋白對內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)基因表達的影響。結(jié)果成功構(gòu)建了HBx的真核表達質(zhì)粒;建立了HBV HBx基因穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞系;MTT法檢測顯示該細胞系增殖活性明顯上升;同時也發(fā)現(xiàn)HBx基因的過表達可上調(diào)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)基因BiP、PERK、ATF6、XBP1、MANF的表達,而CHOP的表達降低。結(jié)論 HBx基因過表達可誘導(dǎo)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激,并促進HepG2細胞增殖。
【作者單位】： 安徽醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院;安徽醫(yī)科大學(xué)生物藥物研究所;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(編號:81173074、91129729、81372576)
【分類號】：R373.21
【正文快照】： 乙肝病毒(hepatitis B virus,HBV)感染引起的慢性乙型肝炎被普遍認為是導(dǎo)致肝癌發(fā)生的重要因素。據(jù)統(tǒng)計,我國半數(shù)以上的肝癌患者有慢性乙肝病史。研究[1-3]顯示亞洲和北美地區(qū)乙肝抗原陽性攜帶者罹患肝癌的比例是非感染人群的25~37倍。HBV是嗜肝DNA病毒家族的溶原性病毒,基因

【共引文獻】

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本文編號：1191699