本文關(guān)鍵詞：CM-DiI標(biāo)記兔外周血平滑肌祖細(xì)胞可行性分析

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【摘要】：采用熒光染料CM-DiI標(biāo)記兔外周血平滑肌祖細(xì)胞(SPC),評(píng)價(jià)其生物可行性.分離和培養(yǎng)SPC,采用CMDiI進(jìn)行標(biāo)記,通過(guò)熒光顯微鏡和流式細(xì)胞儀檢測(cè)標(biāo)記效果和傳代后的細(xì)胞標(biāo)記率.同時(shí),進(jìn)行細(xì)胞爬片培養(yǎng)后免疫熒光染色,觀察標(biāo)記后細(xì)胞表達(dá)平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)、鈣調(diào)節(jié)蛋白(Calponin)和增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)的情況.進(jìn)行臺(tái)盼藍(lán)排斥實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞粘附實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn),觀察標(biāo)記后的SPC存活率以及粘附、增殖和遷移能力的變化.結(jié)果發(fā)現(xiàn),培養(yǎng)4d左右可見(jiàn)SPC開(kāi)始生長(zhǎng),一周后出現(xiàn)SPC克隆.通過(guò)免疫熒光和流式細(xì)胞術(shù)分析,CM-DiI標(biāo)記率為96%左右,連續(xù)傳代2周后標(biāo)記率仍在40%以上.標(biāo)記后的細(xì)胞可表達(dá)α-SMA、Calponin和PCNA.同時(shí)發(fā)現(xiàn),標(biāo)記后的細(xì)胞存活率無(wú)明顯降低,細(xì)胞粘附能力、增殖能力和遷移能力無(wú)明顯改變.本研究證明采用CM-DiI標(biāo)記SPC操作簡(jiǎn)便,效果好,不改變細(xì)胞表型,不影響細(xì)胞的存活率和粘附、增殖及遷移能力,可作為SPC的熒光示蹤劑.
【作者單位】： 南京大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬鼓樓醫(yī)院泌尿男科;上海市第十人民醫(yī)院;同濟(jì)大學(xué)附屬第十人民醫(yī)院泌尿外科;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(31100702/C100307,81170563/H0415) 高等學(xué)校博士學(xué)科點(diǎn)專項(xiàng)科研基金(20110072120054)
【分類號(hào)】：R329
【正文快照】： 組織工程膀胱是近年來(lái)隨著組織工程技術(shù)的發(fā)展而發(fā)展起來(lái)的一個(gè)科學(xué)領(lǐng)域.膀胱平滑肌細(xì)胞在膀胱的儲(chǔ)尿和排尿功能中承擔(dān)了重要的角色.因此,平滑肌的再生是構(gòu)建組織工程膀胱的關(guān)鍵環(huán)節(jié).尋求一種合適種子細(xì)胞以利于平滑肌的再生已經(jīng)成為組織工程膀胱成功的關(guān)鍵因素[1].平滑肌祖

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 楊斌;陳，

本文編號(hào)：1180739