本文關(guān)鍵詞：全骨髓貼壁接觸培養(yǎng)SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞

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【摘要】：背景:體外分離培養(yǎng)出生長狀態(tài)好、高純度、增殖能力強和數(shù)量充足的大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞,是將其作為種子細胞用于組織和細胞移植的重要前提。目的:建立簡便、快速、有效的SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞體外分離培養(yǎng)方法,并觀察其生物學特性。方法:采用全骨髓法將SD大鼠雙側(cè)股骨和脛骨骨髓細胞進行體外分離培養(yǎng),貼壁接種法進行細胞純化、傳代。觀察細胞生長形態(tài)及特征,繪制細胞生長曲線,檢測細胞表面標記物,采用體外誘導劑誘導細胞分別向成骨、成軟骨、成脂方向分化。結(jié)果與結(jié)論:全骨髓貼壁接種法分離培養(yǎng)的骨髓間充質(zhì)干細胞生長旺盛、純度高,細胞生長形態(tài)呈長梭形,極性排列,細胞生長呈S形生長曲線,群體倍增時間為29 h,細胞在連續(xù)傳10代后仍具有較強的增殖能力。第3代骨髓間充質(zhì)干細胞的表面標記物CD44、CD29、CD90均呈陽性表達,CD45、CD34、CD11b則呈陰性表達。第3代骨髓間充質(zhì)干細胞分別經(jīng)成骨、成軟骨、成脂誘導劑誘導后,茜素紅染色、堿性磷酸酶染色、von-kossa礦化結(jié)節(jié)染色、甲苯胺藍染色和油紅O染色均呈陽性。結(jié)果驗證全骨髓貼壁接種法是一種簡便可靠的體外分離培養(yǎng)方法,能獲得純度較高的骨髓間充質(zhì)干細胞,經(jīng)實驗鑒定第3代骨髓間充質(zhì)干細胞生物活性最佳,且具有多向誘導分化能力,適合作為后續(xù)實驗的種子細胞。
【作者單位】： 大連醫(yī)科大學附屬第二醫(yī)院骨外科;
【基金】：遼寧省科學技術(shù)計劃項目基金(2011225013),課題名稱:NEP1-40與NT-3基因修飾的骨髓間充質(zhì)干細胞聯(lián)合應用對脊髓損傷修復作用的實驗研究~~
【分類號】：R329
【正文快照】： 0引言Introduction近來研究表明,骨髓間充質(zhì)干細胞(bone marrowmesenchymal stem cells,BMSCs)不但具有來源廣泛、易于獲取、增殖迅速、可自體移植、體外基因轉(zhuǎn)染率高等特點,而且在不同誘導劑培養(yǎng)下可分別誘導分化為成骨細胞、成軟骨細胞、脂肪細胞、神經(jīng)細胞及肝細胞等[1-4]

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 董晨輝;王子明;杜全印;王雨;黃愷;王愛民;;金黃色葡萄球菌腸毒素C_2對兔骨髓間充質(zhì)干細胞增殖和成骨分化的實驗研究[J];創(chuàng)傷外科雜志;2013年05期

2 張鋒;胡昌龍;陳波;李巧玉;;Ad-VEGF-骨髓間充質(zhì)干細胞移植在腦梗死治療中的作用[J];國際神經(jīng)病學神經(jīng)外科學雜志;2013年Z1期

3 蔣濤;任先軍;陰洪;周長立;王開見;;大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞分離培養(yǎng)及多向分化研究的體外實驗[J];脊柱外科雜志;2013年05期

4 羊明智;彭立軍;胡文凱;;甲鈷胺體外誘導大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞向神經(jīng)元樣細胞分化[J];中國組織工程研究;2013年32期

5 陳增生;褚強;劉艷鳳;宋璇;李萍;;誘導劑共培養(yǎng):誰更適宜骨髓間充質(zhì)干細胞向神經(jīng)細胞的分化?(英文)[J];中國組織工程研究;2013年32期

6 楊陸蒙;李新喜;白超;王洋;田野;羅軍;;大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)方法的比較及細胞鑒定[J];新疆醫(yī)科大學學報;2013年10期

7 尤青青;戴春;;骨髓間充質(zhì)干細胞移植對大鼠糖尿病腎病保護作用的研究[J];中華臨床醫(yī)師雜志(電子版);2013年10期

8 何微;吳添文;黃雷;趙為民;夏穎;唐芳;牟玉蓮;李奎;;h1-calponin基因?qū)ξ逯干叫⌒拓i骨髓間充質(zhì)干細胞體外成骨分化的影響[J];中國農(nóng)業(yè)科學;2013年17期

9 丁影;鄒天慧;劉慧竹;王U嗢，

本文編號：1170202