本文關鍵詞：新生SD大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元缺氧模型的改進

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【摘要】：目的建立更加科學且簡易的新生SD大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元缺氧模型的方法。方法取24 h內(nèi)的新生SD大鼠皮質(zhì),用木瓜酶和DNaseⅠ共同消化,10%FBS的DMEM/F12培養(yǎng)液終止消化,用10%FBS的DMEM/F12種植培養(yǎng),4 h后換成無血清neurobasal配制的維持培養(yǎng)液,未加入阿糖胞苷培養(yǎng),允許部分膠質(zhì)細胞生長,第9天用免疫熒光法鑒定神經(jīng)元的純度,7~10 d用于缺氧模型,在37℃、無糖DMEM、高純N2環(huán)境中缺氧1~6 h,觀察皮質(zhì)神經(jīng)元缺氧后形態(tài)學的變化,根據(jù)實驗目的選擇最適合的缺氧時間,建立缺氧模型。結果培養(yǎng)第10天,神經(jīng)元胞體飽滿,結構清晰完整,神經(jīng)元純度熒光鑒定結果為82.04%。隨著缺氧時間的增加,皮質(zhì)神經(jīng)元胞體和突起逐漸經(jīng)歷水腫到裂解的過程。結論有部分膠質(zhì)細胞的生長,建立了更加科學且簡易的新生SD大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元缺氧模型。
【作者單位】： 汕頭大學醫(yī)學院;汕頭大學醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院兒科;
【基金】：廣東省自然科學基金面上項目(編號:S2011010005065) 廣東省汕頭市科技計劃項目(編號:汕市財教[2011]134號-180)
【分類號】：R-332
【正文快照】： 神經(jīng)元細胞體外培養(yǎng)是神經(jīng)生物學領域中應用非常廣泛的科研技術[1-3],而缺氧模型在新生兒窒息方面的應用更是最基礎的科研方法,以往研究者都是使用了阿糖胞苷抑制膠質(zhì)細胞的生長[4-6],使得神經(jīng)元的純度得到了大大的提高,但是在新生兒窒息病理生理過程中神經(jīng)元和膠質(zhì)細胞是共

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