本文關(guān)鍵詞：新生SD大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元缺氧模型的改進(jìn)

  更多相關(guān)文章： 皮質(zhì) 神經(jīng)元 細(xì)胞培養(yǎng) 大鼠 缺氧 模型 膠質(zhì)細(xì)胞

【摘要】：目的建立更加科學(xué)且簡(jiǎn)易的新生SD大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元缺氧模型的方法。方法取24 h內(nèi)的新生SD大鼠皮質(zhì),用木瓜酶和DNaseⅠ共同消化,10%FBS的DMEM/F12培養(yǎng)液終止消化,用10%FBS的DMEM/F12種植培養(yǎng),4 h后換成無(wú)血清neurobasal配制的維持培養(yǎng)液,未加入阿糖胞苷培養(yǎng),允許部分膠質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng),第9天用免疫熒光法鑒定神經(jīng)元的純度,7~10 d用于缺氧模型,在37℃、無(wú)糖DMEM、高純N2環(huán)境中缺氧1~6 h,觀察皮質(zhì)神經(jīng)元缺氧后形態(tài)學(xué)的變化,根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪x擇最適合的缺氧時(shí)間,建立缺氧模型。結(jié)果培養(yǎng)第10天,神經(jīng)元胞體飽滿,結(jié)構(gòu)清晰完整,神經(jīng)元純度熒光鑒定結(jié)果為82.04%。隨著缺氧時(shí)間的增加,皮質(zhì)神經(jīng)元胞體和突起逐漸經(jīng)歷水腫到裂解的過(guò)程。結(jié)論有部分膠質(zhì)細(xì)胞的生長(zhǎng),建立了更加科學(xué)且簡(jiǎn)易的新生SD大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元缺氧模型。
【作者單位】： 汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院;汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院兒科;
【基金】：廣東省自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(編號(hào):S2011010005065) 廣東省汕頭市科技計(jì)劃項(xiàng)目(編號(hào):汕市財(cái)教[2011]134號(hào)-180)
【分類號(hào)】：R-332
【正文快照】： 神經(jīng)元細(xì)胞體外培養(yǎng)是神經(jīng)生物學(xué)領(lǐng)域中應(yīng)用非常廣泛的科研技術(shù)[1-3],而缺氧模型在新生兒窒息方面的應(yīng)用更是最基礎(chǔ)的科研方法,以往研究者都是使用了阿糖胞苷抑制膠質(zhì)細(xì)胞的生長(zhǎng)[4-6],使得神經(jīng)元的純度得到了大大的提高,但是在新生兒窒息病理生理過(guò)程中神經(jīng)元和膠質(zhì)細(xì)胞是共

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本文編號(hào)：1161756