本文關(guān)鍵詞：過表達(dá)Wnt3基因抑制肝前體細(xì)胞凋亡

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【摘要】：目的利用腺病毒載體轉(zhuǎn)染體外培養(yǎng)的肝前體細(xì)胞,研究過表達(dá)Wnt3對肝前體細(xì)胞凋亡的影響。方法用攜帶Wnt3的腺病毒載體(Ad-Wnt3)轉(zhuǎn)染肝前體細(xì)胞,同時(shí)設(shè)立空載體腺病毒轉(zhuǎn)染組(Ad-GFP)為對照。轉(zhuǎn)染72 h后,用熒光顯微鏡觀察Hoechst33342染色后細(xì)胞凋亡情況;流式細(xì)胞術(shù)檢測Annexin-PE/7-ADD法標(biāo)記的細(xì)胞凋亡率;RT-PCR和Western blot分別檢測細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白Bax、Bcl-2和Bcl-xl的mRNA及蛋白表達(dá)水平。結(jié)果 qRT-PCR和Western blot結(jié)果顯示,Wnt3在肝前體細(xì)胞中特異性表達(dá),表明腺病毒系統(tǒng)Ad-Wnt3能高效轉(zhuǎn)染肝前體細(xì)胞。與對照組相比較,肝前體細(xì)胞轉(zhuǎn)染W(wǎng)nt3后,肝前體細(xì)胞的凋亡水平明顯下降,凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2和Bcl-xl的mRNA及蛋白表達(dá)水平明顯升高(P0.05)。Bax的mRNA及蛋白表達(dá)水平則明顯下降(P0.05)。結(jié)論在肝前體細(xì)胞中,Wnt3基因過表達(dá)能抑制肝前體細(xì)胞凋亡,其機(jī)制可能是通過Bcl-2家族起作用。
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學(xué)分子醫(yī)學(xué)與腫瘤研究中心;重慶醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病理生理學(xué)教研室;
【關(guān)鍵詞】： 肝前體細(xì)胞 抗凋亡 Wnt
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81071770,81201679)~~
【分類號】：R329
【正文快照】： 近年來,肝癌干細(xì)胞理論的出現(xiàn),使人們對肝癌的發(fā)生、轉(zhuǎn)移、治療有了新的認(rèn)識。很多人認(rèn)為肝癌干細(xì)胞可能由肝干細(xì)胞或肝前體細(xì)胞分化障礙而來[1-3]。然而,Wnt/β-catenin途徑在調(diào)節(jié)肝肝前體細(xì)胞的增殖、凋亡和分化過程中起著至關(guān)重要的作用[4],肝癌里經(jīng)常發(fā)生Wnt/β-catenin信

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本文編號：1115294